红景天苷预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途制造技术

本申请涉及一种一种红景天苷预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途，预防的实施过程包括材料仪器和实施方法；材料仪器包括试剂、抗体、引物和仪器；实施方法包括骨髓间充质干细胞复苏和培养以及代龄计算、CCK8法检测细胞活力、自由基诱导剂诱导骨髓间充质干细胞细胞早熟性衰老模型构建、流式细胞术检测细胞活性氧自由基水平、Western blot检测衰老相关蛋白表达量、qRT‑PCR检测衰老相关基因表达量、β半乳糖苷酶染色和统计分析。本申请具有显著降低由氧化剂AAPH引起的大鼠源骨髓间充质干细胞胞内活性氧自由基水平的升高并改善其早熟性细胞衰老特征，对提升干细胞质量具有重要应用前景的效果。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及医药技术的领域，尤其是涉及一种红景天苷在预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途。

技术介绍

1、骨髓间充质干细胞是骨髓来源的具有分化能力的非造血多能干细胞，因其低免疫原性、取材方便、生物学性能稳定等优点，已成为干细胞与再生医学领域的常用种子细胞。然而，骨髓间充质干细胞在体外培养和移植过程中极易衰老，这是限制其临床应用的一个较为棘手的问题，也是导致于细胞临床使用成本居高不下的原因之一。

2、随着体外传代次数的增加，间充质干细胞可快速衰老：细胞形态改变、增殖能力减弱、干性逐渐消失等。有研究显示与第5代的间充质干细胞相比，15代的细胞增殖能力降低、衰老相关β半乳糖苷酶染色阳性细胞数目增加、衰老相关基因表达上调。骨髓间充质干细胞衰老导致其移植迁移率和存活率低、分化功能差等问题，严重影响其移植治疗效果。

3、因此，寻找能有效延缓骨髓间充质干细胞衰老的方法，对打破其临床移植瓶颈用于疾病治疗，具有重要的应用价值。

4、氧化应激诱导的早熟性衰老是由于体内自由基过度产生和抗氧化防御系统失衡，导致细胞和组织过早衰，涉本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种红景天苷预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途，其特征在于：预防的实施过程包括材料仪器和实施方法；

2.根据权利要求1所述的一种红景天苷预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途，其特征在于：所述Western blot检测衰老相关蛋白表达量包括提取总蛋白、测定蛋白浓度、蛋白质变性处理、SDS-PAGE蛋白电泳和免疫印记。

3.根据权利要求1所述的一种红景天苷预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途，其特征在于：所述试剂包括红景天苷、大鼠骨髓间充质干细胞、大鼠骨髓间充质干细胞完全培养基、胰酶-EDTA消化液、Cell C...

【技术特征摘要】

1.一种红景天苷预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途，其特征在于：预防的实施过程包括材料仪器和实施方法；

2.根据权利要求1所述的一种红景天苷预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途，其特征在于：所述western blot检测衰老相关蛋白表达量包括提取总蛋白、测定蛋白浓度、蛋白质变性处理、sds-page蛋白电泳和免疫印记。

3.根据权利要求1所述的一种红景天苷预防氧化应激诱导的骨髓间充质干细胞早熟性衰老的新用途，其特征在于：所述试剂包括红景天苷、大鼠骨髓间充质干细胞、大鼠骨髓间充质干细胞完全培养基、胰酶-edta消化液、cell counting kit-8、磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、蛋白marker、2×sybr green、10×tris-glycine sds电泳缓冲液、10×印迹膜转印缓冲液、rna快速提取试剂盒、二甲亚砜、聚乙二醇脱水山梨醇单月桂酸、2,2'-azobis-2-methyl-propanimidamide,dihydrochlori、四甲基乙二胺溶液、过硫酸铵、western一抗、二抗稀释液、western一抗二抗去除液、5×蛋白上样缓冲液、ripa裂解液、丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺溶液、4×tris-...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄俊，毛根祥，常允闯，
申请(专利权)人：浙江大学绍兴研究院，
类型：发明
国别省市：