基于G4二聚体增强的CRISPR/Cas12a微流控芯片适配体传感器及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种基于G4二聚体增强的CRISPR/Cas12a微流控芯片适配体传感器及应用。该传感器采用三层PMMA结构，集成了可更换的自组装预存试剂管和具有菱形微柱的"收缩‑扩张"微混合通道，实现了对鼠伤寒沙门氏菌的快速、灵敏、特异性检测；其中，微混合通道的菱形微柱设计可产生非对称涡流，增强流体混合效率；自组装预存试剂管实现了试剂的自动化加入，使芯片可重复使用。该传感器检测范围为3.6×10<supgt;1</supgt;至3.6×10<supgt;6</supgt; CFU/mL，检出限为36 CFU/mL，在牛奶、预切蔬菜和鸡肉等实际样品中的回收率为88.11‑105.19%。本发明专利技术通过G4二聚体的荧光增强作用，提高了检测灵敏度，结合微流控技术实现了检测过程的自动化和高效率，适用于食品安全检测领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，尤其涉及一种新型基于g4二聚体增强的crispr/cas12a微流控芯片适配体传感器及在鼠伤寒沙门氏菌中的应用。

技术介绍

1、鼠伤寒沙门氏菌（s. typhimurium）是全球最普遍的食源性病原体之一，也是人类沙门氏菌病的主要病原体。食用受污染的食品，特别是肉类、蛋类和乳制品，可能导致严重的胃肠道症状，包括腹泻、发烧、恶心和呕吐。在免疫功能低下者、老年人和幼儿中，感染可能发展为危及生命的并发症，如败血症和肠穿孔。虽然传统的基于培养的检测方法仍然是金标准，具有高特异性，但它们耗时且需要大量人工。其他方法，包括免疫学和分子生物学方法，在速度、灵敏度和实际实施方面各有优劣。免疫学方法能提供快速结果，但面临交叉反应和基质干扰的挑战，而分子技术如pcr虽然具有高特异性和灵敏度，但需要专业技术和设备。

2、crispr/cas系统作为基因编辑工具的出现彻底改变了生物传感应用，特别是在快速食品安全检测方面。在各种cas蛋白中，cas12a因其独特的侧向切割活性而成为一个有前途的候选者。crispr/cas12a在crrna的引导下本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于G4二聚体增强的CRISPR/Cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，包括：至少一个检测单元；

2.根据权利要求1所述的基于G4二聚体增强的CRISPR/Cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，所述微混合通道为收缩-扩张微混合通道；

3.根据权利要求2所述的基于G4二聚体增强的CRISPR/Cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，所述微混合通道内设置有菱形微柱，所述菱形微柱的尺寸为0.8×0.8 mm。

4.根据权利要求1所述的基于G4二聚体增强的CRISPR/Cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，所述自组...

【技术特征摘要】

1.一种基于g4二聚体增强的crispr/cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，包括：至少一个检测单元；

2.根据权利要求1所述的基于g4二聚体增强的crispr/cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，所述微混合通道为收缩-扩张微混合通道；

3.根据权利要求2所述的基于g4二聚体增强的crispr/cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，所述微混合通道内设置有菱形微柱，所述菱形微柱的尺寸为0.8×0.8 mm。

4.根据权利要求1所述的基于g4二聚体增强的crispr/cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，所述自组装预存试剂管包括锥形管、密封盖、微混合通道连接管和反应腔室连接管；

5.根据权利要求1所述的基于g4二聚体增强的crispr/cas12a微流控芯片适配体传感器，其特征在于，所述传感器是由三层pmma材质通过热键合制成。

6.根据权利要求1-5任一所述的基于g4二聚...

【专利技术属性】
技术研发人员：满燕，杜远芳，王营军，谭慧敏，余舟，石聪，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：