一种牛特异性应激阻断剂的制备方法及其应用技术

本发明专利技术适用于抗应激治疗领域，提供了一种牛特异性应激阻断剂的制备方法及其应用，其中，该制备方法包括以下步骤：以牛免疫检查点的氨基酸序列为模板，合成带有双酶切位点的编码牛免疫检查点胞外区序列；牛免疫检查点的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；将编码牛免疫检查点胞外区序列通过酶切连接的方法构建至质粒载体中，得到重组质粒；将重组质粒转化至感受态细胞，然后诱导目的蛋白表达，经纯化后得到重组蛋白；利用重组蛋白免疫动物后，经细胞融合、克隆筛选，获得阻断牛免疫检查点的阳性杂交瘤细胞株；将阳性杂交瘤细胞株注射经液体石蜡预处理的动物后，收集腹水并纯化，得到牛特异性应激阻断剂，其对牛免疫检查点具有较强的特异性、较高的亲和力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗应激治疗领域，尤其涉及一种牛特异性应激阻断剂的制备方法及其应用。

技术介绍

1、应激（stress）是指机体受到由各种内外环境的紧张性刺激物（应激原）所引起的一类非特异反应，又称为应激反应。在兽医临床中，动物处于长期限位饲养、拥挤、饥饿、圈舍温度异常、持续噪音等恶劣环境中时，易导致动物发生应激综合症，严重损害动物的健康，阻碍动物养殖业的健康发展。当动物受到一系列内外应激原刺激时，起初生理应激反应激活交感神经系统和下丘脑-垂体-肾上腺轴（hpa轴），使机体启动防御适应性机制恢复内环境稳态，但随着应激原刺激的强度增加，时间延长，长期而强烈的刺激使机体内环境稳态遭到破坏，hpa轴过度激活，导致肾上腺皮质释放大量的糖皮质激素（glucocorticoids，gc），主要是皮质醇（啮齿动物为皮质酮）。持续高水平的gc可引起中枢神经系统中的m1型小胶质细胞迅速激活并发生形态变化，分枝变短变粗，胞体增大，表现出促炎和神经毒性作用。极化的m1小胶质细胞往往引起hpa轴的亢进，进而促进应激的发展，而极化的m2小胶质细胞则能够缓解应激状态。应激会使小胶质细胞异本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种牛特异性应激阻断剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的牛特异性应激阻断剂的制备方法，其特征在于，所述动物为小鼠。

3.根据权利要求1所述的牛特异性应激阻断剂的制备方法，其特征在于，合成所采用的引物组包括核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示的上游引物以及核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.3所示的下游引物。

4.根据权利要求1所述的牛特异性应激阻断剂的制备方法，其特征在于，双酶切位点包括Hind III和EcoR I酶切位点。

5.根据权利要求1所述的牛特异性应激阻断剂的制备方法，其特征在于，所述...

【技术特征摘要】

1.一种牛特异性应激阻断剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的牛特异性应激阻断剂的制备方法，其特征在于，所述动物为小鼠。

3.根据权利要求1所述的牛特异性应激阻断剂的制备方法，其特征在于，合成所采用的引物组包括核苷酸序列如序列表seq id no.2所示的上游引物以及核苷酸序列如序列表seq id no.3所示的下游引物。

4.根据权利要求1所述的牛特异性应激阻断剂的制备方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：丛日华，黄田田，袁非凡，杜育锋，陈鸿，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：