【技术实现步骤摘要】
本专利技术的领域是重组核酸和包含其的细胞，以产生表达嵌合抗原受体（car）的基因修饰的细胞，尤其是表达具有fcε受体γ（fcεriγ）信号传导结构域的car的修饰的nk和nk-92细胞。
技术介绍
1、自然杀伤（nk）细胞是细胞毒性淋巴细胞，构成先天免疫系统的重要组成部分。在大多数情况下，nk细胞约占循环淋巴细胞的10%-15%，并结合并杀伤靶细胞，该靶细胞包括病毒感染细胞和许多恶性细胞。nk细胞杀伤对特定抗原没有特异性，可以在没有既往免疫敏化的情况下发生。靶向细胞的杀伤通常由细胞溶解蛋白（包括穿孔素、颗粒酶和颗粒溶素）介导。
2、自体nk细胞已经用作治疗实体。为此，从全血的外周血淋巴细胞级分中分离出nk细胞，在细胞培养物中扩增以获得足够数量的细胞，然后将其重新输注至受试者中。自体nk细胞至少在某些情况下显示出在离体治疗和体内治疗中具有中等有效性。然而，自体nk细胞的分离和生长需要大量的时间和成本。此外，并非所有nk细胞均具有细胞溶解作用，这进一步限制了自体nk细胞疗法。
3、这些困难中的至少一些可以通过使用nk...
【技术保护点】
1.一种基因修饰的NK细胞，该基因修饰的NK细胞包含：
2.如权利要求1所述的基因修饰的NK细胞，其中，该自杀基因选自单纯疱疹病毒胸苷激酶(TK)基因、胞嘧啶脱氨酶基因、水痘带状疱疹病毒胸苷激酶基因、硝基还原酶基因、大肠杆菌gpt基因、大肠杆菌Deo基因和细胞色素P450。
3.如权利要求2所述的基因修饰的NK细胞，其中，该TK基因是野生型TK基因或突变TK基因(例如，tk30、tk75、sr39tk)。
4.如权利要求1所述的基因修饰的NK细胞，其中，该NK细胞是NK-92细胞。
5.如权利要求1至4中任一项所述的基因...
【技术特征摘要】
1.一种基因修饰的nk细胞，该基因修饰的nk细胞包含：
2.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该自杀基因选自单纯疱疹病毒胸苷激酶(tk)基因、胞嘧啶脱氨酶基因、水痘带状疱疹病毒胸苷激酶基因、硝基还原酶基因、大肠杆菌gpt基因、大肠杆菌deo基因和细胞色素p450。
3.如权利要求2所述的基因修饰的nk细胞，其中，该tk基因是野生型tk基因或突变tk基因(例如，tk30、tk75、sr39tk)。
4.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该nk细胞是nk-92细胞。
5.如权利要求1至4中任一项所述的基因修饰的nk细胞，其中，该重组表达的细胞因子是il-2。
6.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该重组表达的细胞因子包含内质滞留序列。
7.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该重组表达的cd16是高亲和力cd16变体，该cd16变体具有seq id no:35所示的氨基酸序列并具有158v突变。
8.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该细胞外结合结构域与肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原、或患者特异性抗原及肿瘤特异性抗原特异性结合。
9.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该细胞外结合结构域与病毒特异性抗原特异性结合。
10.如权利要求9所述的基因修饰的nk细胞，其中，该病毒特异性抗原是hiv病毒、hpv病毒、rsv病毒、流感病毒、埃博拉病毒或hcv病毒的抗原。
11.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该基因修饰的nk细胞包含三顺反子核酸序列，该三顺反子核酸序列包含编码该重组表达的细胞因子的序列、编码该重组表达的cd16的序列和编码该重组表达的car的序列。
12.如权利要求11所述的基因修饰的nk细胞，其中，该三顺反子核酸序列被整合至该nk细胞的基因组中。
13.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其用于治疗癌症或病毒感染。
14.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该铰链结构域包含多肽，该多肽具有seq id no:3所示的氨基酸序列。
15.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该铰链结构域包含多肽，该多肽具有seq id no:4所示的氨基酸序列。
16.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该跨膜结构域包含多肽，该多肽具有seq id no:6所示的氨基酸序列。
17.如权利要求1所述的基因修饰的nk细胞，其中，该细胞外结合结构域具有seq idno:11所示的氨基酸序列，该铰链结构域具...
【专利技术属性】
技术研发人员：劳伦·H·布瓦塞尔，汉斯·G·克林格曼，班纳吉·丹达帕特，希玛蒂·钦娜彭，
申请(专利权)人：免疫生物公司，
类型：发明
国别省市：
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