一种高脂肪含量的昆虫DNA活体提取方法技术

本发明专利技术公开了一种高脂肪含量的昆虫DNA活体提取方法，包括步骤：S1、取昆虫，在显微镜下，用消毒后的注射针向其背部注入生理盐水；S2、当昆虫有体液渗出后，收集体液；S3、将收集到的体液加入DNA提取液中，混匀，然后进行热处理，即提取到DNA。本发明专利技术针对高脂肪含量的昆虫难以活体成功提取到用于分子分析的DNA的问题，提供了一种成功率高、操作简单的DNA提取方法，该方法重复性好、成功率高，昆虫活体提取DNA后仍然能够正常存活，可用于后续对应的深入研究，解决了现有技术中昆虫活体DNA提取方法的成功率低、昆虫致死率高的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种高脂肪含量的昆虫dna活体提取方法。

技术介绍

1、异色瓢虫(学名：harmoniaaxyridis)是鞘翅目(coleoptera)瓢虫科(coccinellidae)和瓢虫属(harmonia)昆虫。异色瓢虫是农业和林业上一种重要的捕食性天敌昆虫，目前在世界各地广泛用于害虫控制。利用其群集性，在越冬场所收集越冬瓢虫，人工助迁到松大蚜、杨圆蚧发生地释放，能收到一定的防治效果，对多种蚜虫均能起到控制作用。因此，其实验室研究也尤其重要。异色瓢虫属完全变态昆虫,它的一生包括卵、幼虫、蛹和成虫4个时期；幼虫不具翅膀,腹部向后方延伸。身体上有突起与刺,和成虫型态迥异。

2、在昆虫研究领域，经常需要提取其dna进行研究，目前昆虫dna提取技术已经很成熟，但多数都是从昆虫体上取部分血液、细胞、组织等进行dna提取，通常是从已经死去的昆虫取样本提取，或者取完样本后昆虫通常会死亡，应用于这方面的昆虫dna提取试剂很多，可以直接购买商用试剂盒按照说明书进行操作。

3、目前，已报道的昆虫活体dna提取的方法有裂解液法，该本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高脂肪含量的昆虫DNA活体提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的高脂肪含量的昆虫DNA活体提取方法，其特征在于：步骤S1中，注入的生理盐水的体积为40～80纳升。

3.根据权利要求1所述的高脂肪含量的昆虫DNA活体提取方法，其特征在于：步骤S2中，收集的体液的体积为3～7微升。

4.根据权利要求1所述的高脂肪含量的昆虫DNA活体提取方法，其特征在于：所述DNA提取液为STE/TNE缓冲液和蛋白酶K的混合溶液；所述热处理为先在60～70℃处理12～18min，然后在90～98℃处理7～13min。>

5.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种高脂肪含量的昆虫dna活体提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的高脂肪含量的昆虫dna活体提取方法，其特征在于：步骤s1中，注入的生理盐水的体积为40～80纳升。

3.根据权利要求1所述的高脂肪含量的昆虫dna活体提取方法，其特征在于：步骤s2中，收集的体液的体积为3～7微升。

4.根据权利要求1所述的高脂肪含量的昆虫dna活体提取方法，其特征在于：所述dna提取液为ste/tne缓冲液和蛋白酶k的混合溶液；所述热处理为先在60～70℃处理12～18min，然后在90～98℃处理7～13min。

5.根据权利要求1所述的高脂肪含量的昆虫dna活体提取方法，其特征在于：所述体液与dna提取液的体积比为5:25～35，从昆虫收集的体液为3～7微升，优选4～6微升。

6.根据权利要求4所...

【专利技术属性】
技术研发人员：石岩，周旬，张伟伟，曹贺贺，张彬，丁天波，杨春红，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：