核酸检测用的探针及其应用制造技术

技术编号:44870814 阅读:33 留言:0更新日期:2025-04-08 00:12
本申请涉及核酸检测技术领域,尤其涉及一种核酸检测用的探针及其应用。本申请提供的核酸检测用的探针的核苷酸序列从5'端到3'端依次包括诱导开环序列、上游成环序列、环序列、下游成环序列和锚定延伸序列;其中,上游成环序列和下游成环序列反向互补配对,探针的核苷酸序列5'端连接有第一淬灭基团,探针的核苷酸序列3'端连接有第二淬灭基团,锚定延伸序列的上游连接有荧光基团。本申请提供的探针可以显著降低背景荧光值,且信噪比得到提升,从而显著提升了荧光信号的检测灵敏度。因此,本申请提供的探针可以很好地用于核酸检测中,可以制备核酸检测相关产品如核酸检测试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本申请属于核酸检测,尤其涉及一种核酸检测用的探针及其应用


技术介绍

1、实时荧光聚合酶链式反应(real-time pcr)是核酸检测领域中的常用检测方法,其操作简便,应用广泛。taqman探针是一种广泛应用于实时定量pcr的荧光探针,其原理是利用taq dna聚合酶的5'-3'外切酶活性,在pcr扩增过程中水解双标记的探针,释放报告基团产生荧光信号。但其存在如下问题:taqman探针的荧光基团与淬灭基团有一定距离(一般是探针5'端至3'端的总长度),这样容易导致探针背景荧光值较高,导致信噪比(signal-to-background ratio)低,从而导致多重实时pcr检测灵敏度的下降。

2、为了提升荧光实时pcr信号检出水平,sanjay tyagi和fred russell kramer于1996年开创性提出了分子信标(molecular beacon)的概念,其基本原理是在taqman探针的5'端和3'端设计两条互补配对的区域,使探针形成发夹结构,通过这个特殊的二级结构使探针在未与靶标结合时呈现发夹结构,荧光被淬灭,实现背景荧光值的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种核酸检测用的探针,其特征在于,所述探针的核苷酸序列从5'端到3'端依次包括诱导开环序列、上游成环序列、环序列、下游成环序列和锚定延伸序列;其中,所述上游成环序列和所述下游成环序列反向互补配对,所述探针的核苷酸序列5'端连接有第一淬灭基团,所述探针的核苷酸序列3'端连接有第二淬灭基团,所述锚定延伸序列的上游连接有荧光基团。

2.根据权利要求1所述的探针,其特征在于,所述环序列设置有间臂修饰。

3. 根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述间臂修饰包括一个或多个Spacer18、Spacer 9、Spacer C3或Spacer C6修饰

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【技术特征摘要】

1.一种核酸检测用的探针,其特征在于,所述探针的核苷酸序列从5'端到3'端依次包括诱导开环序列、上游成环序列、环序列、下游成环序列和锚定延伸序列;其中,所述上游成环序列和所述下游成环序列反向互补配对,所述探针的核苷酸序列5'端连接有第一淬灭基团,所述探针的核苷酸序列3'端连接有第二淬灭基团,所述锚定延伸序列的上游连接有荧光基团。

2.根据权利要求1所述的探针,其特征在于,所述环序列设置有间臂修饰。

3. 根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述间臂修饰包括一个或多个spacer18、spacer 9、spacer c3或spacer c6修饰。

4.根据权利要求1所述的探针,其特征在于,所述诱导开环序列具有1-20个碱基的长度;

5.根据权利要求4所述的探针,其特征在于,所述诱导开环序列具有2-9...

【专利技术属性】
技术研发人员:杜琛扈庆华李迎慧邹旋石晓路吕子全姜伊祥李学云周杰张勇徐良彩梁肇海李玲玲
申请(专利权)人:深圳市疾病预防控制中心深圳市卫生监督局深圳市卫生检验中心深圳市预防医学研究所
类型:发明
国别省市:

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