【技术实现步骤摘要】
本申请属于核酸检测,尤其涉及一种核酸检测用的探针及其应用。
技术介绍
1、实时荧光聚合酶链式反应(real-time pcr)是核酸检测领域中的常用检测方法,其操作简便,应用广泛。taqman探针是一种广泛应用于实时定量pcr的荧光探针,其原理是利用taq dna聚合酶的5'-3'外切酶活性,在pcr扩增过程中水解双标记的探针,释放报告基团产生荧光信号。但其存在如下问题:taqman探针的荧光基团与淬灭基团有一定距离(一般是探针5'端至3'端的总长度),这样容易导致探针背景荧光值较高,导致信噪比(signal-to-background ratio)低,从而导致多重实时pcr检测灵敏度的下降。
2、为了提升荧光实时pcr信号检出水平,sanjay tyagi和fred russell kramer于1996年开创性提出了分子信标(molecular beacon)的概念,其基本原理是在taqman探针的5'端和3'端设计两条互补配对的区域,使探针形成发夹结构,通过这个特殊的二级结构使探针在未与靶标结合时呈现发夹结构,荧光被淬
...【技术保护点】
1.一种核酸检测用的探针,其特征在于,所述探针的核苷酸序列从5'端到3'端依次包括诱导开环序列、上游成环序列、环序列、下游成环序列和锚定延伸序列;其中,所述上游成环序列和所述下游成环序列反向互补配对,所述探针的核苷酸序列5'端连接有第一淬灭基团,所述探针的核苷酸序列3'端连接有第二淬灭基团,所述锚定延伸序列的上游连接有荧光基团。
2.根据权利要求1所述的探针,其特征在于,所述环序列设置有间臂修饰。
3. 根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述间臂修饰包括一个或多个Spacer18、Spacer 9、Spacer C3或Spacer C6修饰
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【技术特征摘要】
1.一种核酸检测用的探针,其特征在于,所述探针的核苷酸序列从5'端到3'端依次包括诱导开环序列、上游成环序列、环序列、下游成环序列和锚定延伸序列;其中,所述上游成环序列和所述下游成环序列反向互补配对,所述探针的核苷酸序列5'端连接有第一淬灭基团,所述探针的核苷酸序列3'端连接有第二淬灭基团,所述锚定延伸序列的上游连接有荧光基团。
2.根据权利要求1所述的探针,其特征在于,所述环序列设置有间臂修饰。
3. 根据权利要求2所述的探针,其特征在于,所述间臂修饰包括一个或多个spacer18、spacer 9、spacer c3或spacer c6修饰。
4.根据权利要求1所述的探针,其特征在于,所述诱导开环序列具有1-20个碱基的长度;
5.根据权利要求4所述的探针,其特征在于,所述诱导开环序列具有2-9...
【专利技术属性】
技术研发人员:杜琛,扈庆华,李迎慧,邹旋,石晓路,吕子全,姜伊祥,李学云,周杰,张勇,徐良彩,梁肇海,李玲玲,
申请(专利权)人:深圳市疾病预防控制中心深圳市卫生监督局,深圳市卫生检验中心,深圳市预防医学研究所,
类型:发明
国别省市:
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