一株生产食品级透明质酸二糖的大肠杆菌Nissle 1917及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一株生产食品级透明质酸二糖的大肠杆菌Nissle 1917及其应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术在大肠杆菌Nissle 1917中敲除肝素前体合酶基因簇后，使用内源隐形质粒pMUT1和pMUT2异源表达多杀巴斯德杆菌来源的透明质酸合酶和普通变形杆菌来源的透明质酸裂解酶，通过过表达谷氨酸棒杆菌ATCC13032来源的UDP‑葡萄糖脱氢酶和磷酸葡萄糖胺变位酶强化了UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰葡糖胺合成途径，得到的重组大肠杆菌发酵产物为分子量分布均一的透明质酸二糖，实现了食品级透明质酸二糖的高效大批量生产，5L发酵罐产量达15g/L，解决了现有技术中透明质酸二糖生产成本高昂，生产工艺复杂的问题，有利于透明质酸二糖在食品领域的应用推广。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，尤其是指一株生产食品级透明质酸二糖的大肠杆菌nissle 1917及其应用。

技术介绍

1、透明质酸(hyaluronic acid，ha)是一种高分子量的线性黏多糖，广泛分布于人体的皮肤、关节、眼睛以及结缔组织中。透明质酸基于多种特异性和非特异性机制参与人体内重要的代谢和生理过程，包括促进皮肤水合作用、调节肠道微生物平衡、参与细胞修复与再生等。然而，随着年龄的增长，人体内透明质酸水平逐渐下降，至60岁时其含量仅为正常水平的25％。透明质酸的流失会引起皮肤干燥、松弛、机体老化等一系列健康问题。鉴于透明质酸卓越的保湿能力，通过口服补充透明质酸改善皮肤水合作用，提高皮肤弹性和减少皱纹，已成为一种有效的抗衰老手段。此外，透明质酸还能与肠道微生物相互作用，促进益生菌在肠道中的生长。因此，如何安全高效地补充透明质酸受到了广泛的关注。

2、透明质酸二糖作为透明质酸的基本组成单元，具有保湿、润滑及促进伤口愈合等多重效果，在化妆品、医药及食品领域均有广泛应用。透明质酸二糖的制备主要采用酶降解法，通过透明质酸酶对透明质酸进行降解以获得目标本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一株生产透明质酸二糖的重组大肠杆菌，其特征在于：在大肠杆菌Nissle 1917中异源表达透明质酸合酶和透明质酸裂解酶，过表达UDP-葡萄糖脱氢酶，所述透明质酸合酶来源于多杀巴斯德杆菌，所述透明质酸裂解酶来源于普通变形杆菌，所述UDP-葡萄糖脱氢酶来源于谷氨酸棒杆菌ATCC13032。

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于：所述透明质酸合酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述透明质酸裂解酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于：使用pMUT1质粒表达所述透明质酸合酶，使用pMUT2质粒...

【技术特征摘要】

1.一株生产透明质酸二糖的重组大肠杆菌，其特征在于：在大肠杆菌nissle 1917中异源表达透明质酸合酶和透明质酸裂解酶，过表达udp-葡萄糖脱氢酶，所述透明质酸合酶来源于多杀巴斯德杆菌，所述透明质酸裂解酶来源于普通变形杆菌，所述udp-葡萄糖脱氢酶来源于谷氨酸棒杆菌atcc13032。

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于：所述透明质酸合酶的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述透明质酸裂解酶的核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于：使用pmut1质粒表达所述透明质酸合酶，使用pmut2质粒表达所述透明质酸裂解酶。

4.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于：所述重组大...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡立涛，程建华，柯珺，欧淑华，
申请(专利权)人：巨微无锡生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：