痘病毒鼠源单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域。本发明专利技术以大肠杆菌表达的猴痘病毒表面膜抗原H3L蛋白作为抗原，用H3L蛋白与弗氏完全佐剂乳化后接种Balb/c小鼠，抗原共免疫三次。取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0细胞融合来制备H3L特异性的杂交瘤细胞，随后对杂交瘤进行克隆检测，以筛选针对H3L抗体特异性的杂交瘤细胞，经过三轮抗原特异性筛选，获得一株高亲和力的痘病毒鼠源单克隆抗体，重链可变区结构域的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，轻链可变区结构域的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。通过ELISA检测此株抗体与抗原H3L有较好的结合能力，并且在体外中和实验中具有良好的保护作用。这株抗体不仅可以应用于痘病毒感染引发疾病的研究与治疗，也可以作为痘病毒检测和治疗的工具，具有检测痘病毒感染的潜在应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药

技术介绍

1、猴痘(monkeypox)是由猴痘病毒(monkeypox virus,mpxv)引起的一种传染性疾病，目前为止猴痘仍在世界广泛传播。猴痘病毒属于正痘病毒属(orthopoxvirus genus,opv)，该种属病毒还包括痘苗病毒(vaccinia virus,vacv)，天花病毒(variola virus,varv)和鼠痘病毒(ectromelia virus,ectv)等，这些痘病毒具有高度的同源性。猴痘病毒或经过遗传改造的其他痘病毒都可能跨物种感染人类。由于大规模的免疫接种已经停止了近40年，目前大多数的人群对包括varv在内的opv成员缺乏免疫力。因此，筛选具有高亲和力、特异性强的抗痘病毒抗体是非常必要的，可以为痘病毒的快速检测手段以及疾病的免疫治疗提供战略抗体储备。

2、正痘病毒感染宿主细胞包括两种感染形式：胞内成熟毒粒(mature virion，mv)和胞外包装毒粒(extracellular enveloped，ev)。h3l蛋白是opv成员所共有的表面蛋白，含有由h3l基因编辑的324个氨本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.痘病毒鼠源单克隆抗体，其特征在于，重链可变区结构域的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，轻链可变区结构域的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。

2.依据权利要求1所述痘病毒鼠源单克隆抗体，其特征在于，重链恒定区氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.7所示和轻链恒定区氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.8所示。

3.依据权利要求1所述痘病毒鼠源单克隆抗体，其特征在于，重链氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.5所示和轻链氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.6所示。

4.依据权利要求1所述痘病毒鼠源单克隆抗体，其特征...

【技术特征摘要】

1.痘病毒鼠源单克隆抗体，其特征在于，重链可变区结构域的氨基酸序列如序列表中seq id no.1所示，轻链可变区结构域的氨基酸序列如序列表中seq id no.3所示。

2.依据权利要求1所述痘病毒鼠源单克隆抗体，其特征在于，重链恒定区氨基酸序列如序列表中seq id no.7所示和轻链恒定区氨基酸序列如序列表中seq id no.8所示。

3.依据权利要求1所述痘病毒鼠源单克隆抗体，其特征在于，重链氨基酸序列如序列表中seq id no.5所示和轻链氨基酸序列如序列表中seq id no.6所示。

4.依据权利要求1所述痘病毒鼠源单克隆抗体，其特征在于，所述重链可变区结构域属igh-v7183 vh5家族。

5.依据权利要求1所述痘病毒鼠源单克隆抗体，...

【专利技术属性】
技术研发人员：方敏，赵健，王泽泉，王祥斌，赵瑞，王金海，顾光磊，胡潇允，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：