【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分析检测，特别涉及一种利用高效液相色谱检测四氢姜黄素及其杂质的方法。
技术介绍
1、四氢姜黄素，化学式为1,7-双(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3,5-庚二酮，源自姜科姜黄属植物姜黄(curcμma longa l.)，是该植物的主要活性成分之一，同时也是姜黄素在人体内的重要代谢产物。它因具备抗氧化、美白护肤、抗肿瘤、抗糖尿病及抗炎等多重功效，特别是在抗氧化方面展现出显著活性，近年来备受关注。
2、由于四氢姜黄素类化合物含有二酮结构，存在酮式与烯醇式的互变异构现象，这两种形式在特定条件下能够相互转化。因此，在采用高效液相色谱法对四氢姜黄素进行检测时，相关文献中经常观察到酮式和烯醇式的船型峰共存。这一现象不仅阻碍了四氢姜黄素含量的精确测定，同时也增加了对其他工艺杂质(例如姜黄素、二氢姜黄素、六氢姜黄素及八氢姜黄素，同样也存在互变异构，互变异构的条件各不相同)检测的难度，从而对四氢姜黄素相关产品的质量控制造成了不利影响。
技术实现思路
1、本专利技术为解决以上技术问题，提出了一种利用高效液相色谱检测四氢姜黄素及其杂质的方法。本方法主要通过高效液相色谱法，建立了针对四氢姜黄素及其杂质(包括姜黄素、二氢姜黄素、六氢姜黄素、八氢姜黄素)的检测分析手段。该专利技术方法的特点在于检测结果准确可靠，灵敏度高，重复性能优异，准确度与稳定性均强，能够有效评估四氢姜黄素相关产品的质量水平，为四氢姜黄素类产品的质量控制提供了坚实的依据。
2、在探索四氢姜黄素类产品的质
3、面对这一难题，专利技术人进一步提出在流动相中引入离子对试剂的解决方案。这一举措在维持流动相局部ph稳态的同时，不仅有效增加了流动相的表面张力，还显著提升了四氢姜黄素的保留因子。这一设计不仅确保了四氢姜黄素及其各类杂质能够被精准检出，更在保障四氢姜黄素类产品中降解杂质与工艺杂质得到有效控制的基础上，进一步提升了产品的质量水平。
4、本专利技术的技术方案是：
5、一种利用高效液相色谱检测四氢姜黄素及其杂质的方法，主要包括以下的步骤：
6、(1)制备对照品混合标准溶液：准确称取各杂质，使用有机溶剂的水溶液完全溶解后，转移至容量瓶中，再加入有机溶剂的水溶液稀释至刻度，摇匀，制成杂质储备液；
7、准确称取四氢姜黄素，使用有机溶剂的水溶液完全溶解后，转移至容量瓶中，再准确量取杂质储备液于容量瓶中，加入有机溶剂的水溶液稀释至刻度，摇匀，获得对照品混合标准溶液；
8、(2)制备供试品溶液：准确称取产品，使用有机溶剂的水溶液完全溶解后，转移至容量瓶中，再加入有机溶剂的水溶液稀释至刻度，摇匀并过滤，滤液作为供试品溶液；
9、(3)分别准确吸取(1)中的对照品混合标准溶液和(2)中的供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行分析检测。
10、优选的，高效液相色谱仪的仪器参数如下：
11、色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm；
12、柱温：30-40℃；
13、流动相：a相为碱性铵盐缓冲液-离子对试剂混合溶液，b相为乙腈；
14、流速：0.9-1.1ml/min；
15、梯度洗脱：0.01-2.00min，20％b相；2.00-20.00min，20-40％b相；20.00-21.00min，40-50％b相；21.00-23.00min，50％b相；23.00-23.10min，50-20％b相；23.10-35.00min，20％b相；
16、检测波长：275-285nm；
17、进样量：20μl；
18、检测器为二极管阵列检测器。
19、优选的，(1)中，杂质选自姜黄素、二氢姜黄素、六氢姜黄素、八氢姜黄素中的至少一种；对照品混合标准溶液中杂质的浓度为0.5μg/ml；
20、对照品混合标准溶液中的四氢姜黄素浓度为500μg/ml。
21、优选的，(1)中有机溶剂的水溶液为乙腈和水按照体积比1：1的比例混合后的溶液。
22、优选的，(2)中有机溶剂的水溶液为乙腈和水按照体积比1：1的比例混合后的溶液。
23、优选的，(2)中产品为四氢姜黄素产品，是通过姜黄素还原酶催化姜黄素所得的。
24、优选的，流动相中碱性铵盐缓冲液为碳酸氢铵缓冲液，离子对试剂为三乙胺。
25、优选的，碳酸氢铵缓冲液的浓度为0.02-0.04mol/l，三乙胺的浓度为体积分数0.6-0.7％。
26、本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
27、(1)本专利技术采用高效液相色谱技术，专门用于检测四氢姜黄素(通过工程菌株发酵得到的姜黄素还原酶催化底物姜黄素所得)在生产过程中产生的工艺杂质以及可能发生的降解杂质，这一方法成功解决了在酸性条件下，四氢姜黄素及其相关杂质色谱峰峰型异常的问题，确保了检测结果的准确性；
28、(2)不仅如此，该方法还能同时鉴别并定量分析杂质中的姜黄素、二氢姜黄素、六氢姜黄素以及八氢姜黄素，实现了姜黄素相关杂质的全面且清晰的分离，这种多组分同时检测的能力，大大提高了分析效率与杂质鉴别的全面性；
29、(3)该方法展现出优异的分离度、高灵敏度响应、良好的重复性和耐用性，确保了数据结果的稳定与准确，其广泛的应用范围，为四氢姜黄素类产品的质量控制提供了一种高效、可靠的方法，对于提升产品质量和确保消费者安全具有重要意义。
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1.一种利用高效液相色谱检测四氢姜黄素及其杂质的方法，其特征在于，主要包括以下的步骤：
2.如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪的仪器参数如下：
3.如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于，所述（1）中，杂质选自姜黄素、二氢姜黄素、六氢姜黄素、八氢姜黄素中的至少一种；对照品混合标准溶液中杂质的浓度为0.5μg/mL；
4.如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于，所述（1）中有机溶剂的水溶液为乙腈和水按照体积比1：1的比例混合后的溶液。
5.如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于，所述（2）中有机溶剂的水溶液为乙腈和水按照体积比1：1的比例混合后的溶液。
6.如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于，所述（2）中产品为四氢姜黄素产品，是通过姜黄素还原酶催化姜黄素所得的。
7.如权利要求2中所述的检测方法，其特征在于，所述流动相中碱性铵盐缓冲液为碳酸氢铵缓冲液，离子对试剂为三乙胺。
8.如权利要求7中所述的检测方法，其特征在于，所述碳酸氢铵缓冲液的浓度为0.02-0.04
...【技术特征摘要】
1.一种利用高效液相色谱检测四氢姜黄素及其杂质的方法，其特征在于，主要包括以下的步骤：
2.如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱仪的仪器参数如下：
3.如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于，所述（1）中，杂质选自姜黄素、二氢姜黄素、六氢姜黄素、八氢姜黄素中的至少一种；对照品混合标准溶液中杂质的浓度为0.5μg/ml；
4.如权利要求1中所述的检测方法，其特征在于，所述（1）中有机溶剂的水溶液为乙腈和水按照体积比1：1的比例混合后的溶液。
5.如权...
【专利技术属性】
技术研发人员：王辉，陈钊，魏学立，马钦元，王玫玫，王宾，金伟，徐克，林友，刘连涛，
申请(专利权)人：山东金城生物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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