一种用于贴壁细胞培养的无血清培养基及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于贴壁细胞培养的无血清培养基，包括：血清替代物，所述血清替代物包括氨基酸类、脂类、维生素类、激素蛋白类；所述脂类包括：棕榈酸、花生四烯酸、胆固醇、维生素E醋酸酯、亚油酸、亚麻酸、油酸、硬脂酸、棕榈油酸、十八酸中的至少一种；所述维生素类包括：叶酸、维生素C、维生素E、维生素B1、烟酰胺、肌醇、泛酸钙中的至少一种；所述激素蛋白类包括：重组胰岛素、重组转铁蛋白、重组白蛋白、重组表皮生长因子、重组碱性成纤维细胞生长因子中的至少一种，以及重组层粘连蛋白、重组IV型胶原蛋白、重组硫酸乙酰肝素蛋白多糖中的至少一种。本发明专利技术的无血清培养基能够促进贴壁细胞增殖分化，且提高了实验的可重复性和准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及培养基，具体涉及一种用于贴壁细胞培养的无血清培养基及其应用。

技术介绍

1、细胞培养是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等)，使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。在整个生物工程
，尤其是生物克隆技术中，细胞培养都是一个必不可少的过程。通过细胞培养技术，单个细胞可以大量增殖，形成简单的单细胞群落或者极少分化的多细胞，这是克隆技术实施过程中不可或缺的一步。作为细胞生物学研究中的一项重要且常用的技术，细胞培养为研发人员提供了大量的细胞样本，使其能借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等生物学过程。

2、在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。动物细胞培养需要提供特殊的环境，包括细胞培养基、支持物和气体交换条件，细胞培养基除了为动物提供基础营养物质之外，还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他成分，其中最广泛使用的添加物是血清，例如小牛血清。血清相当于动物细胞离体培养的天然营养液，能够为动物细胞提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。>

3、虽然血清本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于贴壁细胞培养的无血清培养基，其特征在于，包括：血清替代物，所述血清替代物包括氨基酸类、脂类、维生素类、激素蛋白类；

2.根据权利要求1所述无血清培养基，其特征在于，所述激素蛋白类的各组分在血清替代物中的浓度如下：重组胰岛素8～12mg/L、重组转铁蛋白15-25mg/L、重组白蛋白8～12g/L、重组表皮生长因子0.05～0.15mg/L、重组碱性成纤维细胞生长因子0.05～0.15mg/L、重组层粘连蛋白8～12μg/L、重组IV型胶原蛋白15-25μg/L、重组硫酸乙酰肝素蛋白多糖40-60μg/L。

3.根据权利要求2所述无血清培养基，其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种用于贴壁细胞培养的无血清培养基，其特征在于，包括：血清替代物，所述血清替代物包括氨基酸类、脂类、维生素类、激素蛋白类；

2.根据权利要求1所述无血清培养基，其特征在于，所述激素蛋白类的各组分在血清替代物中的浓度如下：重组胰岛素8～12mg/l、重组转铁蛋白15-25mg/l、重组白蛋白8～12g/l、重组表皮生长因子0.05～0.15mg/l、重组碱性成纤维细胞生长因子0.05～0.15mg/l、重组层粘连蛋白8～12μg/l、重组iv型胶原蛋白15-25μg/l、重组硫酸乙酰肝素蛋白多糖40-60μg/l。

3.根据权利要求2所述无血清培养基，其特征在于，所述血清替代物还包括亚硒酸钙0.05～0.15mg/l和吐温80 5～15mg/l。

4.根据权利要求3所述无血清培养基，其特征在于，所述氨基酸类的各组分在血清替代物中的浓度如下：l-赖氨酸300～500mg/l、l-蛋氨酸8～16mg/l、l-缬氨酸400～600mg/l、l-亮氨酸80～120mg/l、l-异亮氨酸150～250mg/l、l-半胱氨酸20～40mg/l、l-苯丙氨酸120～180mg/l、l-苏氨酸80～120mg/l、l-色氨酸150～250mg/l、l-脯氨酸80～120mg/l、l-丝氨酸40～60mg/l、l-甘氨酸40～60mg/l、l-丙氨酸80～120mg/l、l-酪氨酸15～25mg/l、l-天冬氨酸150～250mg/l、l-谷氨酸150～250mg/l。

5.根据权利要求4所述无血清培养基，其特征在于，所述脂类的各组分在血清替代物中的浓度如下：...

【专利技术属性】
技术研发人员：李长路，徐海丰，刘爱香，梁木零，曾莹，
申请(专利权)人：广州蕊特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：