【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本文描述了涉及用于纠正abca4(atp结合盒亚家族a成员4)中的突变的反式剪接分子的组合物、方法和用途。
技术介绍
1、abca4的隐性遗传突变是导致渐进性失明，包括斯特格氏病(stargardt disease)和视锥-视杆细胞营养不良的原因。abca4位于感光细胞外节视盘膜的边缘区域，起到将n-亚视黄基-磷脂酰乙醇胺(n-ret-pe)从管腔转运到视盘膜细胞质小叶的转运蛋白(或“翻转酶”)的作用。abca4蛋白缺陷会导致有毒类视黄酸化合物的积累，最终导致光感受器和视网膜色素上皮细胞死亡。abca4的6882bp编码序列太大，无法通过单个aav载体完整递送。此外外，由于在整个基因中发现了数百种致病突变，所以单一的碱基编辑方法无法解决大量患者的问题。因此，本领域需要纠正abca4基因中的突变的替代策略。
技术实现思路
1、abca4相关的视网膜病变，例如斯特格氏病，是影响成人和儿童的严重罕见遗传性视网膜疾病，由abca4基因的双等位基因致病突变引起。据估计，全世界每8,000至10,00...
【技术保护点】
1.一种核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子包含：
2.一种核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子包含：
3.如权利要求2所述的核酸反式剪接分子，其中所述SEQ ID NO：55的变体包含SEQ IDNO：56-59中的任一者。
4.如权利要求3所述的核酸反式剪接分子，其中所述SEQ ID NO：55的变体包含SEQ IDNO：56。
5.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述接头结构域包含与SEQ ID NO：27具有至少85％同一性、至少86％同一性、至少87％同一性、至少88％同一性或至少89％同...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子包含：
2.一种核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子包含：
3.如权利要求2所述的核酸反式剪接分子，其中所述seq id no：55的变体包含seq idno：56-59中的任一者。
4.如权利要求3所述的核酸反式剪接分子，其中所述seq id no：55的变体包含seq idno：56。
5.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述接头结构域包含与seq id no：27具有至少85％同一性、至少86％同一性、至少87％同一性、至少88％同一性或至少89％同一性、90％同一性、91％同一性、至少92％同一性、至少93％同一性、至少94％同一性、至少95％同一性、至少96％同一性、至少97％同一性、至少98％同一性或至少99％同一性的序列。
6.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述接头结构域包含seqid no：27、基本上由其组成或由其组成。
7.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述结合结构域退火到所述内源abca4 mrna前体中的内含子。
8.如权利要求7所述的核酸反式剪接分子，其中所述内源abca4 mrna前体中的所述内含子是内含子22。
9.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述结合结构域包含seqid no：18或seq id no：20。
10.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述结合结构域基本上由seq id no：18或seq id no：20组成或由其组成。
11.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述结合结构域基本上由seq id no：20组成或由其组成。
12.如权利要求1或5-11中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述cds包含abca4外显子1-22或其变体。
13.如权利要求12所述的核酸反式剪接分子，其中所述cds包含seq id no：53-59中的任一者、基本上由其组成或由其组成。
14.一种核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子包含：
15.如权利要求14所述的核酸反式剪接分子，其中所述cds包含seq id no：53-59中的任一者、基本上由其组成或由其组成。
16.一种核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子包含：
17.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子还包含增效子，所述增效子包括包含ggtaagt或seq id no：61的至少一个序列。
18.如权利要求17所述的核酸反式剪接分子，其中所述增效子在3′可操作地连接到所述接头结构域。
19.如权利要求17或18中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述增效子包含三个串联排列并可操作地连接的序列，其中所述三个序列中的每一个包含ggtaagt或seq idno：61。
20.如权利要求17-19中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述增效子包含三个串联排列的序列，其中所述三个序列包含seq id no：62。
21.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子还包含翻译增效子，其中所述翻译增效子包含seq id no：63或与seq id no：63具有至少90％同一性的序列，其中seq id no：63或所述与seq id no：63具有至少90％同一性的序列在3′可操作地连接到所述增效子。
22.如权利要求21所述的核酸反式剪接分子，其中所述翻译增效子与seq id no：63具有至少91％同一性，与seq id no：63具有至少92％同一性，与seq id no：63具有至少93％同一性，与seq id no：63具有至少94％同一性，与seq id no：63具有至少95％同一性，与seq id no：63具有至少96％同一性，与seq id no：63具有至少97％同一性，与seq id no：63具有至少98％同一性，或与seq id no：63具有至少99％同一性。
23.如权利要求21或22中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述翻译增效子包含seq id no：63、基本上由其组成或由其组成。
24.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子还包括包含gtaagt、gtaagg、gtaagc或gtaact中任一者的剪接结构域。
25.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子还包括包含gtaagt、基本上由其组成或由其组成的剪接结构域。
26.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子还包含5′非翻译区。
27.如权利要求26所述的核酸反式剪接分子，其中所述5′非翻译区包含seq id no：13或seq id no：64、基本上由其组成或由其组成。
28.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子还包含3′转录终止子结构域。
29.如权利要求28所述的核酸反式剪接分子，其中所述3′转录终止子结构域编码形成三螺旋结构的核糖核酸，所述三螺旋结构保护所述反式剪接分子的3′端。
30.如权利要求28或权利要求29所述的核酸反式剪接分子，其中所述3′转录终止子结构域包含野生型malat1序列(seq id no：33)或与seq id no：33具有至少80％同一性的核酸序列。
31.如权利要求30所述的核酸反式剪接分子，其中所述3′转录终止子结构域包含如下核酸序列，所述核酸序列与seq id no：33具有至少80％同一性；与seq id no：33具有至少85％同一性；与seq id no：33具有至少90％同一性；与seq id no：33具有至少91％同一性；与seq id no：33具有至少92％同一性；与seq id no：33具有至少93％同一性；与seq idno：33具有至少94％同一性；与seq id no：33具有至少95％同一性；与seq id no：33具有至少96％同一性；与seq id no：33具有至少97％同一性；与seq id no：33具有至少98％同一性；与seq id no：33具有至少99％同一性；或与seq id no：33100％同一。
32.如权利要求28或权利要求29所述的核酸反式剪接分子，其中所述3′转录终止子结构域包含seq id no：33或seq id no：66、基本上由其组成或由其组成。
33.如前述权利要求中任一项所述的核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子还包含至少一个在3′操作性连接到所述剪接结构域的终止密码子。
34.如权利要求33所述的核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子在5′至3′方向上包含操作性连接的以下各者：
35.如权利要求34所述的核酸反式剪接分子，其中
36.一种核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子包含：
37.如权利要求36所述的核酸反式剪接分子，其中
38.一种核酸反式剪接分子，所述核酸反式剪接分子在5′至3′方向上包含操作性连接的以下各者：
39.如权利要求37或权利要求38所述的核酸反式剪接分子，其中所述核酸反式剪接分子包含seq id no：69、seq id no：78或seq id no：90、基本上由其组成或由其组成。
40.如权利要求1-20中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述核酸反式剪接分子包含seq id no：70或seq id no：71、基本上由其组成或由其组成。
41.如权利要求1-12中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述核酸反式剪接分子包含与seq id no：40-44、46或48-50中的任一者具有至少80％同一性的核酸序列。
42.一种核糖核酸反式剪接分子，所述核糖核酸反式剪接分子从如权利要求1-41中任一项所述的核酸反式剪接分子转录。
43.如权利要求1-41中任一项所述的核酸反式剪接分子，其中所述内源abca4 mrna前体包含至少一个与abca4相关的视网膜营养不良相关的突变。
44.如权利要求43所述的核酸反式剪接分子，其中所述abca4相关的视网膜营养不良是隐性遗传的。
45.如权利要求43或44所述的核酸反式剪接分子，其中所述abca4相关的视网膜营养不良与跨越所述abca4基因的外显子1-22的等位基因致病突变和与视锥-视杆细胞营养不良(例如，视锥-视杆细胞营养不良-3)、斯特格氏黄斑营养不良(例如，斯特格氏病-1)、眼底黄色斑点...
【专利技术属性】
技术研发人员：R·克伦巴赫，S·杜利，A·多伊，K·伯克哈特，J·格雷，彭凌涛，D·吴，A·诺码，K·戈西克，S·斯洛莫维奇，A·克莱门斯，R·贝尔，
申请(专利权)人：海鞘治疗公司，
类型：发明
国别省市：
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