【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物降解，具体涉及一种酵母菌g-1及其在降解赤霉素ga3中的应用。
技术介绍
1、赤霉素(gibberellin，ga)是一类重要的植物生长调节剂，具有促进种子萌发、花芽形成、提高作物产量的作用，在农业生产中被广泛使用。赤霉素类化合物种类繁多，其中在植物中发挥主要作用的为ga3，是目前市场上流通最多的赤霉素类产品，也就是俗称的赤霉酸，属于一种微毒农药。目前工业上获取赤霉素主要通过微生物发酵法，发酵菌液用于提取赤霉素，残渣过滤后产生的固体废弃物就是发酵滤渣。发酵滤渣成分复杂，其中包括粗蛋白、有机质等营养物质以及大量残留的赤霉素，未经处理直接排放会造成严重的环境污染，威胁食品安全与人类健康。堆肥是固体废弃物无害化高值化处理的常用方法之一。通过堆酵，物料中的微生物对有机固体废物进行利用和降解，最终使其转化为可利用的有机肥。堆肥过程中为加快堆肥进程，改善堆肥质量，添加微生物菌剂是一种常用的方法，菌剂不仅可以改变堆肥微生物群落组成，同时促进堆肥中植物激素等物质的降解，充分分解有机质，进一步提高堆肥品质。
2、赤霉酸发酵滤渣的无害化处理关键一步就是赤霉素ga3的降解。生物降解是治理土壤污染、消除农药残留物等的有效途径之一，其降解方式可直接利用某些微生物的代谢作用，因此本试验以赤霉酸发酵滤渣有机肥为原料筛选可降解赤霉素的菌株，并考察菌株制成生物菌剂后对发酵滤渣堆肥效果的影响，旨在为深入探讨赤霉素的生物降解途径提供参考，为赤霉酸发酵滤渣无害化、资源化处理提供切实可行的方法。
技术实现思路<
1、针对现有技术存在的上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种酵母菌g-1及其在降解赤霉素ga3中的应用，本申请的
技术实现思路
包括菌株的筛选及其在降解赤霉素ga3方面的应用，并且将菌株制备为发酵菌剂探究其对农业环境中的赤霉素残留物的降解与无害化的影响。
2、本专利技术采用的技术方案如下：
3、一种酵母菌g-1，该菌种为解脂耶罗维亚酵母yarrowia lipolytica，于2024年11月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.32800，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。
4、酵母菌g-1的分离方法如下：对发酵滤渣有机肥样品中的微生物进行初筛，得到能在以赤霉素为唯一碳源的环境下生长的菌株；对菌株不断划线纯化，平板上得到的菌落为圆形乳白色，不透明，微凸起，菌落边缘整齐，菌丝为致密短绒毛状；经分子鉴定，菌株为亚罗酵母属(yarrowia)，命名为酵母菌g-1，其dna序列如seq id no：1所示。
5、进一步地，将酵母菌g-1接种于灭菌后的无机盐液体培养基中，同时设置不接种微生物的处理为空白对照。将两组培养基放置在摇床中28℃环境下培养，48h后对比对照组的赤霉素含量保持初始浓度，接种酵母菌处理的无机盐溶液中赤霉素降解效率达到24％。
6、本专利技术另一目的是提供一种酵母菌g-1在降解赤霉素ga3中的应用。
7、进一步地，所述酵母菌g-1制成生物降解菌剂，并应用于农业环境中的赤霉素残留物的降解，降解方法为好氧堆肥，具体应用方法为：将酵母菌g-1制成生物降解菌剂，与木屑混合，并将木屑作为辅料与赤霉酸发酵滤渣翻拌均匀，得到堆肥混合物，进行好氧堆肥自然堆酵。
8、进一步地，应用于农业环境中赤霉素残留物的降解方法，具体包括以下步骤：
9、步骤一、将酵母菌g-1接种在lb液体培养基中，在摇瓶或摇床中震荡培养，在28℃，转速180r/min的条件下震荡培养，即得所述生物降解菌剂。
10、步骤二、以木屑作为发酵滤渣好氧堆肥的辅料，利用木屑的吸湿性，先将生物降解菌剂均匀喷洒在木屑中，然后将赤霉酸发酵滤渣与木屑混合并翻拌均匀，得到堆肥混合物。
11、步骤三、对步骤二的堆肥混合物进行好氧堆肥自然堆酵，另外设置不添加生物降解菌剂处理，仅以赤霉酸发酵滤渣辅以木屑为堆肥原料，进行好氧堆肥自然堆酵，作为试验空白对照组。
12、步骤四、通过定时测温、翻堆、取样，并对堆肥不同阶段的样品进行理化性质检测，观察生物降解菌剂对残留赤霉素的降解情况，并评价堆肥过程。
13、进一步地，步骤二中赤霉酸发酵滤渣与木屑的质量比是3.5-4.5:1，所述堆肥混合物中生物降解菌剂的添加质量分数为1-5％，生物降解菌剂添加时其中的微生物浓度的od600为0.8-1.0。
14、与现有技术相比，本专利技术取得的有益效果是：
15、(1)本专利技术从赤霉酸发酵滤渣有机肥中分离获得一种耶罗威亚解脂酵母菌，将其命名为酵母菌g-1。该菌株可以在以赤霉素为唯一碳源的环境下生长，且对赤霉素具有较好的降解效果。将酵母菌g-1接种在无机盐培养基中培养，48h赤霉素降解效率达到24％。
16、(2)本专利技术提供的酵母菌g-1可以应用于农业环境中的赤霉素残留物的降解中。以酵母菌g-1制备得到的微生物菌剂添加到发酵滤渣好氧堆肥过程中，可以丰富堆肥物料中微生物组成，降解菌与堆肥微生物协同降解，促进堆肥温度的升高，充分分解堆肥中有机质，提高了堆肥对残留赤霉素的降解速率，加快堆肥进程，进一步提高堆肥品质。
17、(3)本专利技术提供的酵母菌g-1在发酵滤渣无害化资源化方面具有较大的应用潜力，为去除环境中赤霉素的残留提供了新的途径，丰富了植物激素降解菌的种质资源库，具有较好的应用前景。
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1.一种酵母菌G-1，其特征在于该菌种为耶罗威亚解脂酵母菌Yarrowia lipolytica，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 32800。
2.如权利要求1所述的一种酵母菌G-1，其特征在于所述酵母菌G-1菌落的外观为圆形乳白色，不透明，微凸起，菌落边缘整齐，菌丝为致密短绒毛状；酵母菌G-1的DNA序列如SEQID NO：1所示。
3.如权利要求1所述的一种酵母菌G-1在降解赤霉素GA3中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述酵母菌G-1制成生物降解菌剂，并应用于农业环境中的赤霉素残留物的降解。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于应用于农业环境中赤霉素残留物的降解方法为好氧堆肥，具体应用方法为：将酵母菌G-1制成生物降解菌剂，与木屑混合，并将木屑作为辅料与赤霉酸发酵滤渣翻拌均匀，得到堆肥混合物，进行好氧堆肥自然堆酵。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于赤霉酸发酵滤渣与木屑的质量比是3.5-4.5:1，所述堆肥混合物中生物降解菌剂的添加质量分数为1-
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述生物降解菌剂的制备过程是：将酵母菌G-1接种在LB液体培养基中，在摇瓶或摇床中震荡培养，使液体中微生物浓度的OD600达到0.8-1.0，即得所述生物降解菌剂。
...【技术特征摘要】
1.一种酵母菌g-1，其特征在于该菌种为耶罗威亚解脂酵母菌yarrowia lipolytica，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 32800。
2.如权利要求1所述的一种酵母菌g-1，其特征在于所述酵母菌g-1菌落的外观为圆形乳白色，不透明，微凸起，菌落边缘整齐，菌丝为致密短绒毛状；酵母菌g-1的dna序列如seqid no：1所示。
3.如权利要求1所述的一种酵母菌g-1在降解赤霉素ga3中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述酵母菌g-1制成生物降解菌剂，并应用于农业环境中的赤霉素残留物的降解。
5.如权利要求4所述的应...
【专利技术属性】
技术研发人员：周瑛，赵婷蕾，朱凤香，姚燕来，洪春来，朱为静，洪磊东，张涛，郭瑞，陆南洋，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：
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