【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医用材料，具体涉及一种含胍基结构的光热纳米药物及其制备方法和应用。
技术介绍
1、缺血性脑卒中是最常见的卒中类型，常继发于大脑动脉闭塞，其中血栓是导致大脑动脉闭塞的最常见的原因。缺血性脑卒中的治疗手段包括静脉溶栓和动脉机械取栓，有临床研究表明，静脉溶栓治疗可在4.5小时内显著改善缺血性卒中患者的功能结局，其疗效与时间有关，在第一个小时内接受治疗的效果最佳。因此，如何高效清除血栓、如何挽救神经元损伤成为缺血性卒中治疗领域的重大挑战。
2、铁死亡是一种铁离子催化的以脂质过氧化为特征的新型细胞死亡类型。研究表明，当发生缺血性脑卒中后，脑中铁离子水平升高，过载的铁离子引起铁死亡，而抑制铁死亡可显著减少脑梗死面积并改善神经功能。因此，铁死亡成为缺血性脑卒中治疗的重要靶点。针对铁死亡靶点的药物近年来不断得到更新，其中以铁离子螯合为机理的药物开发得到广泛关注。然而，目前针对铁离子螯合的药物仍存在以下局限：（1）难以透过血脑屏障达到病灶区域；（2）铁离子螯合效率低下，不能有效挽救缺血后神经元损伤；（3）作用单一，无法起到清除血栓的作用。
3、共价有机框架（cofs）是一类通过有机前体之间的共价键连接形成的多孔材料，以其高比表面积、均匀且可调的孔径以及易于修饰和功能化等特性在纳米药物递送系统中显示出巨大潜力。二甲双胍由于其特殊的胍基结构，表现出抗炎、抗氧化的潜能，将其胍基作为主要功能基团构建胍基共价有机框架材料在抗炎载体的开发中显示出巨大的潜力。光热疗法可以通过提高血栓部位的温度来增强溶栓药物的活性，从而
4、有鉴于此，开发一种直接将胍基cofs与光热疗法相结合并用于治疗缺血性脑卒中以及铁死亡靶点的药物很有必要。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术旨在提供一种含胍基结构的光热纳米药物及其制备方法和应用，该光热纳米药物具有共价有机框架材料平台，能够在血栓部位富集，兼具优良的光热转化性能，能有效清除病灶部位血栓，同时该纳米药物还能通过抑制铁死亡从而改善缺血性脑卒中后的神经元死亡。
2、本专利技术的第一目的是提供一种含胍基结构的光热纳米药物，所述光热纳米药物是以cofbt-tg为载体，负载光热剂（ts）后在表面修饰纤维蛋白靶向肽（ca）获得的ca-cofbt-tg@ts；所述cofbt-tg具有如式（ⅰ）所示的结构，为含胍基的载体：
3、；
4、所述光热剂具有如式（ⅱ）所示的结构：
5、；
6、所述纤维蛋白靶向肽的氨基酸排列顺序为cys-arg-glu-lys-ala，缩写为ca。
7、本专利技术的第二目的是提供一种含胍基结构的光热纳米药物的制备方法，具体包括以下步骤：
8、（1）制备cofbt-tg：先将bt（苯并[1,2-b:3,4-b':5,6-b']三噻吩-2,5,8-三醛）和tg（三氨基胍盐酸盐）溶解在邻二氯苯/正丁醇混合溶液中，加入催化剂，得到反应液，然后将超声处理5min~15min后的反应液进行三次冷冻解冻，循环脱气，真空密封，再通过微波辐射加热处理20min~40min，冷却至室温后，将产物离心、洗涤，真空干燥后将粗产物进行索氏提取后再冷冻干燥，充分研磨后得到cofbt-tg；
9、（2）制备cofbt-tg@ts：先将含ts的thf（四氢呋喃）溶液缓慢滴加到cofbt-tg的thf溶液中，得到混合溶液，然后在室温下在磁力搅拌器上反应6h~12h，将温度升高至60℃，待thf完全挥发后停止实验，冷却后将产物研磨充分后将其重新分散至ph为7.4的pbs（磷酸盐缓冲液）中，并使用3500da透析袋在pbs中透析12h~24h，每6h-8h更换一次透析液，离心收集透析产物，冷冻干燥得到产物cofbt-tg@ts；
10、（3）制备ca-cofbt-tg@ts：将纤维蛋白靶向肽和cofbt-tg@ts分别分散在含thf的塑料管和玻璃瓶中，在超声波机中超声分散10min~30min后，将装有cofbt-tg@ts的玻璃瓶置于冰盒中，放入超声细胞破碎仪的操作仓，玻璃瓶中插入φ2mm变幅杆，在超声处理的同时逐滴加入纤维蛋白靶向肽溶液，整个过程持续20min~30min，直至纤维蛋白靶向肽溶液完全加入cofbt-tg@ts溶液中，随后，参数不变对ca-cofbt-tg@ts体系继续进行超声处理20min~30min，随后收集反应液置于通风橱中自然抽干，将粉末研磨后重新分散至ph为7.4的pbs中，并装入3500da透析袋在pbs中透析12h~24h，每6h-8h更换一次透析液，离心收集透析产物，冷冻干燥得到产物ca-cofbt-tg@ts。
11、进一步地，上述技术方案步骤（1）中，所述bt和tg的摩尔比为1~3:1~4；所述反应液中bt的浓度为6.01mg/ml~14.16mg/ml，tg的浓度为2.55mg/ml~8.03mg/ml；所述催化剂为3m的乙酸；所述邻二氯苯、正丁醇、乙酸的体积比为3~5:3~5:1。
12、进一步地，上述技术方案步骤（1）中，所述微波辐射加热处理的温度为100℃~120℃；洗涤产物的方法为：先用thf离心洗涤产物，然后用丙酮离心洗涤产物，重复4遍~6遍，每次洗涤消耗20ml~25ml的thf或丙酮，再用thf结合索氏提取法洗涤产物，所消耗的thf为150ml~250ml。
13、进一步地，上述技术方案步骤（2）中，所述混合溶液中ts的浓度为0.3mg/ml~0.8mg/ml；所述混合溶液中cofbt-tg的浓度为1.0mg/ml~2.0mg/ml。
14、进一步地，上述技术方案步骤（3）中，超声细胞破碎仪的功率为150 w；所述纤维蛋白靶向肽和cofbt-tg@ts的质量比为1:2~4。
15、进一步地，上述技术方案中，各个步骤中，离心的转速均为6000rpm~10000rpm，时间均为3min~5min。
16、本专利技术的第三目的是提供一种上述含胍基结构的光热纳米药物在制备改善抑制铁死亡、改善缺血性脑卒中后的神经元死亡制剂中的应用。
17、相对于现有技术的有益效果：
18、本专利技术设计了一种胍基光热纳米药物ca-cofbt-tg@ts，其中胍基cofs本身具有一定的抗炎和抗氧化作用，可以减轻缺血性脑卒中引起的炎症反应和氧化应激，为溶栓药物发挥效果创造更有利的微环境；ts作为一种新型光热剂，进入到cofbt-tg后不仅光热性能显著提高，性能稳定，还可以破坏血栓的结构，使其变得更加松散，进一步促进溶栓药物的作用；表面修饰ca后使得光热纳米药物具有优异的血栓靶向能力，能直达病灶，效率高。本专利技术获得的光热纳米药物可通过光热效应、靶向递送、促进渗透扩散以及协同作用等多重机制，显著提高溶栓效率，为缺血性脑卒中的治疗，特别是铁死亡靶点药物的开发提供新的思路和方法。
19、从本专利技术试验结构可以看出，接受本专利技术设计的ca-cofbt-tg@本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种含胍基结构的光热纳米药物，其特征在于，所述光热纳米药物是以COFBT-TG为载体，负载光热剂后在表面修饰纤维蛋白靶向肽获得的CA-COFBT-TG@TS；所述COFBT-TG具有如式（Ⅰ）所示的结构：
2.根据权利要求1所述的一种含胍基结构的光热纳米药物的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述BT和TG的摩尔比为1~3:1~4；所述反应液中BT的浓度为6.01mg/mL~14.16mg/mL，TG的浓度为2.55mg/mL~8.03mg/mL；所述催化剂为3M的乙酸；所述邻二氯苯、正丁醇、乙酸的体积比为3~5:3~5:1。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述微波辐射加热处理的温度为100℃~120℃；洗涤产物的方法为：先用THF离心洗涤产物，然后用丙酮离心洗涤产物，重复4遍~6遍，每次洗涤消耗20mL~25mL的THF或丙酮，再用THF结合索氏提取法洗涤产物，所消耗的THF为150mL~250mL。
5.根据权利要求2所述的制备
6. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（3）中，超声细胞破碎仪的功率为150 W；所述纤维蛋白靶向肽和COFBT-TG@TS的质量比为1:2~4。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，各个步骤中，离心的转速均为6000rpm~10000rpm，时间均为3min~5min。
8.一种如权利要求1所述的含胍基结构的光热纳米药物或由权利要求2~7任一项所述的制备方法制得的含胍基结构的光热纳米药物在制备改善抑制铁死亡、改善缺血性脑卒中后的神经元死亡制剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种含胍基结构的光热纳米药物，其特征在于，所述光热纳米药物是以cofbt-tg为载体，负载光热剂后在表面修饰纤维蛋白靶向肽获得的ca-cofbt-tg@ts；所述cofbt-tg具有如式（ⅰ）所示的结构：
2.根据权利要求1所述的一种含胍基结构的光热纳米药物的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述bt和tg的摩尔比为1~3:1~4；所述反应液中bt的浓度为6.01mg/ml~14.16mg/ml，tg的浓度为2.55mg/ml~8.03mg/ml；所述催化剂为3m的乙酸；所述邻二氯苯、正丁醇、乙酸的体积比为3~5:3~5:1。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述微波辐射加热处理的温度为100℃~120℃；洗涤产物的方法为：先用thf离心洗涤产物，然后用丙酮离心洗涤产物，重复4遍~6遍，每次洗涤消...
【专利技术属性】
技术研发人员：阳丽，鄢腾峰，祝新根，舒宏新，朱温平，罗青华，朱子敬，张思，朱馨艺，吕世刚，叶敏华，肖兵，罗敏，
申请(专利权)人：南昌大学第二附属医院，
类型：发明
国别省市：
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