【技术实现步骤摘要】
技术介绍
0、背景
1、将基因递送到成人中枢神经系统(cns)仍然是基因治疗中的主要挑战，并且具有改善的脑嗜性的工程化aav衣壳代表了一种有吸引力的解决方案。
2、腺相关病毒(aav)衍生的载体因其非致病性、低免疫原特征、低整合入宿主基因组的速率以及在非分裂细胞中长期转基因表达而成为临床基因转移的有前途的工具。但是，aav天然变体在某些器官中的转导效率对于临床应用而言太低，并且通过预先存在的中和抗体进行衣壳中和可能会阻止大部分患者的治疗。由于这些原因，已经做出了巨大的努力来获得具有增强特性的新颖衣壳变体。迄今为止，在许多测试方法中，最显著的进展来自aav衣壳的定向进化，该过程是通过使用易错pcr、各种亲本血清型改组或在特定位置插入完全随机化的短肽的衣壳序列随机化产生的体外或体内选择衣壳变体而进行的。
3、为了进行aav衣壳的定向进化，编码病毒衣壳的序列本身两侧带有反向末端重复序列(itr)，因此可以将其包装到自己的衣壳中。在衣壳的混合种群感染培养的细胞或动物后，通过pcr回收已成功归巢到目标组织中的...
【技术保护点】
1.一种产生变体AAV衣壳多肽的方法，其中相对于亲本AAV衣壳多肽，所述变体AAV衣壳多肽表现出改善的转导或增加的细胞或组织特异性中的至少一种，所述方法包括：
2.如权利要求1所述的方法，其中第一启动子是AAV2 P40，并且第二启动子是遍在启动子。
3.如权利要求1所述的方法，其中第一启动子是AAV2 P40，并且第二启动子是细胞类型特异性启动子。
4.如权利要求2或权利要求3所述的方法，其中启动子选自表3中列出的任何启动子。
5.如权利要求4所述的方法，其中遍在启动子或细胞特异性启动子允许编码衣壳多肽的RNA的表达。
6.如...
【技术特征摘要】
1.一种产生变体aav衣壳多肽的方法，其中相对于亲本aav衣壳多肽，所述变体aav衣壳多肽表现出改善的转导或增加的细胞或组织特异性中的至少一种，所述方法包括：
2.如权利要求1所述的方法，其中第一启动子是aav2 p40，并且第二启动子是遍在启动子。
3.如权利要求1所述的方法，其中第一启动子是aav2 p40，并且第二启动子是细胞类型特异性启动子。
4.如权利要求2或权利要求3所述的方法，其中启动子选自表3中列出的任何启动子。
5.如权利要求4所述的方法，其中遍在启动子或细胞特异性启动子允许编码衣壳多肽的rna的表达。
6.如权利要求5所述的方法，还包括回收编码衣壳多肽的所述rna并确定所述衣壳多肽的序列。
7.如权利要求6所述的方法，其中与亲本衣壳多肽相比，回收的衣壳多肽表现出增加的靶细胞转导或靶细胞特异性(嗜性)。
8.如权利要求7所述的方法，其中靶细胞是神经元细胞、神经干细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞、视网膜细胞、肿瘤细胞、造血干细胞、产生胰岛素的β细胞、肺上皮细胞、内皮细胞、肝细胞、骨骼肌细胞、肌肉干细胞、肌肉卫星细胞或心肌细胞。
9.如权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：M·E·农嫩马赫，侯金兆，王伟，
申请(专利权)人：沃雅戈治疗公司，
类型：发明
国别省市：
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