靶向CD33和mesothelin双靶点的嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了靶向CD33和mesothelin双靶点的嵌合抗原受体及其应用。本发明专利技术基于双靶点CAR设计原理，首次利用CD33和MSLN两个scFv构建成双靶点CAR，这种双靶点CAR除了能够靶向只表达CD33或MSLN的肿瘤细胞外，还可以更有效的杀伤表达MSLN和CD33的肿瘤细胞。同时，在免疫细胞中表达MSLN‑CD33‑CAR制备成的CAR‑T，CAR‑NK，CAR‑Macrophage等可靶向杀伤表达CD33或/和MSLN的细胞。具体而言，本发明专利技术利用脐血NK细胞和ESC表达设计的CD33‑MSLN‑CAR，首次验证了制备的CD33‑MSLN‑CAR UCB‑NK细胞具有靶向杀伤表达CD33和/或MSLN的肿瘤细胞的优势；验证了制备的CD33‑MSLN‑CAR‑ESC能够定向分化为CD33‑MSLN‑CAR iNK细胞，并且同样具有靶向杀伤表达CD33和/或MSLN的肿瘤细胞的优势。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫细胞治疗领域，涉及一种双靶向嵌合抗原受体，具体涉及靶向cd33和mesothelin双靶点的嵌合抗原受体及其应用。

技术介绍

1、嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,car)技术的运用极大提高了免疫细胞治疗肿瘤的精准性及有效性，代表性的案例是在t细胞中表达car元件，表达car的t细胞称为chimeric antigen receptor t(car-t)，能够靶向杀伤表达目标抗原的细胞。同样，car元件还可以在nk细胞中表达，制备成car-nk细胞，也能够靶向表达目标抗原的细胞。这种技术在治疗肿瘤，自身免疫性疾病等方面起到了积极作用。

2、car元件主要由抗体的先导肽(signal peptide，sp)单链抗体(single chainfragment variable，scfv)，铰链(hinge)，跨膜结域(transmembrane region)，胞内域(intracellular region)构成。其中scfv来源于抗体的抗体的轻链可变区(variableregions of th本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种靶向CD33和mesothelin双靶点的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括依次连接的先导肽、抗原结合区、铰链区、跨膜区、胞内区，所述抗原结合区包括靶向CD33的第一抗原结合区和靶向mesothelin的第二抗原结合区；

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗原结合区具有如下具体结构：

3.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体还包括共刺激区和/或利于T细胞或NK细胞存活激活的细胞因子或蛋白配体；

4.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID ...

【技术特征摘要】

1.一种靶向cd33和mesothelin双靶点的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包括依次连接的先导肽、抗原结合区、铰链区、跨膜区、胞内区，所述抗原结合区包括靶向cd33的第一抗原结合区和靶向mesothelin的第二抗原结合区；

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗原结合区具有如下具体结构：

3.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体还包括共刺激区和/或利于t细胞或nk细胞存活激活的细胞因子或蛋白配体；

4.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如seq id no.27-30所示。

5.一种核酸，其特征在于，所述核酸编码权利要求1-4任一项所述的嵌合抗原受体。

6.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求5所述的核酸。

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【专利技术属性】
技术研发人员：胡房晓，王瑶，黄德浩，夏成祥，刘艳红，郑秀娟，翁启童，祁翰蒙，沈义媛，陈逸，
申请(专利权)人：北京干细胞与再生医学研究院，
类型：发明
国别省市：