从组织样品中分离细胞的方法技术

技术编号:44745198 阅读:29 留言:0更新日期:2025-03-26 12:34
本发明专利技术尤其提供了一种酶消化组织样品中胞外基质蛋白的方法,包括以下步骤:‑提供一种水性介质,其包含(i)基质金属蛋白酶和(ii)浓度至少为2mmol/L的Ca<supgt;2+</supgt;阳离子;‑在允许酶消化胞外基质蛋白的条件下,使所述水性介质与包含所述胞外基质蛋白的组织样品接触;其中所述组织样品是软骨组织样品。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及胞外基质(ecm)蛋白的酶消化方法。本文所述的体外或离体方法允许组织解离并从所述组织中释放细胞,随后可以分离和配制这些细胞用于医疗方法。本专利技术的体外或离体酶消化方法改进了每单位组织质量的分离细胞产率。本专利技术还涉及包含基质金属蛋白酶的水性介质,其可用于其中胞外基质分解是有益的应用,例如治疗与胞外基质病理性积聚相关的疾病,优选胞外基质在皮肤内或皮肤上或在身体孔口及其相关腔中的病理性积聚。如本文所公开的,受益于使用水性介质进行胞外基质降解的其他应用是例如肉类嫩化和鱼类去骨。


技术介绍

1、在过去的几十年里,基于细胞的医学的使用有所增加。基于细胞的医学涵盖了细胞移植、再生医学和组织工程等不同领域。基于细胞的医学的例子包括修复心脏病变的心脏细胞贴片、恢复肾功能的肾类器官、恢复胰腺功能的胰腺类器官、病灶内注射来自脂肪或骨髓的基质细胞以启动或实现修复反应等。这些基于细胞的治疗策略的共性是,它们需要存在足够数量的组织分离细胞。自体细胞经常用于基于细胞的医疗方法,从患者自身组织中采集细胞以避免免疫排斥反应。细胞的分离可以通过多种方式进行,但可能涉及通过本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于酶消化组织样品中的胞外基质蛋白的方法,其包括以下步骤:

2.如权利要求1所述的方法,其中所述水性介质通过包括以下步骤的方法制备:

3.如权利要求1或2所述的方法,其中所述使所述水性介质与所述组织样品接触的步骤提供所述组织样品的至少部分解离,从而在所述水性介质中从所述组织样品中释放细胞。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述方法是从组织样品中分离细胞的方法,所述细胞具有或不具有其细胞周基质。

5.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述方法还包括以下步骤:

6.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述基质...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于酶消化组织样品中的胞外基质蛋白的方法,其包括以下步骤:

2.如权利要求1所述的方法,其中所述水性介质通过包括以下步骤的方法制备:

3.如权利要求1或2所述的方法,其中所述使所述水性介质与所述组织样品接触的步骤提供所述组织样品的至少部分解离,从而在所述水性介质中从所述组织样品中释放细胞。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述方法是从组织样品中分离细胞的方法,所述细胞具有或不具有其细胞周基质。

5.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述方法还包括以下步骤:

6.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述基质金属蛋白酶选自下组:胶原酶、明胶酶、溶基质素、基质裂解蛋白、金属弹性蛋白酶、釉质溶解素、内膜基质酶和表皮水解素。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述基质金属蛋白酶是胶原酶,优选其中所述基质金属蛋白酶仅限于胶原酶,更优选其中胶原酶是水性介质中唯一存在的蛋白酶。

8.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述水性介质包括溶解的cacl2。

9.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述组织样品是收采的或活检的组织样品,任选地是在所述使所述水性介质与所述组织样品接触的步骤之前切碎的收采的或活检的组织样品。

10.如权利要求3-9中任一项所述的方法,其中所述细胞是软骨细胞,具有或不具有其细胞周基质,并且优选地所述组织样品是关节软骨组织样品。

11.一种水性介质,其包含(i)基质金属蛋白酶和(ii)浓...

【专利技术属性】
技术研发人员:克莱顿·艾利斯·威尔森威廉·科内利斯·德容
申请(专利权)人:卡提利健有限公司
类型:发明
国别省市:

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