一种具有高冻融耐受性的酿酒酵母菌及其筛选方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种具有高冻融耐受性的酿酒酵母菌及其筛选方法和应用，涉及微生物育种技术领域。本发明专利技术选择两种野生型酿酒酵母菌以及一种遗传背景清晰的实验室酿酒酵母菌作为亲本菌株，将亲本菌株重复进行“产孢、随机交配、反复冻融”等步骤，得到了本发明专利技术的高冻融耐受性的酿酒酵母菌。本发明专利技术的酿酒酵母菌具有高冻融耐受性，相交于亲本菌株，其冻融耐受性提高了7.5倍，且具有乙醇耐受性和高温耐受性。本发明专利技术通过不同菌株孢子之间的随机交配，增加了二倍体的遗传多样性，使得二倍体在定向筛选过程中发生突变的概率增加，因此得到的菌株相较于亲本菌株其冻融耐受性提高了7.5倍，且能够耐受浓度为30％的乙醇和50℃的高温环境。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物育种，尤其是指一种具有高冻融耐受性的酿酒酵母菌及其筛选方法和应用。

技术介绍

1、酿酒酵母，通常被称为面包酵母，是工业发酵过程的基石。在工业发酵过程中，需要先将面团进行冷冻，使面团内的酿酒酵母停止发酵作用，进而提高面团的保藏时间；当需要对面团进行发酵时，再将冷冻面团进行解冻，使面团内酿酒酵母继续发挥作用。在这一过程中，酿酒酵母冻融耐受性的高低对于面团的发酵质量至关重要，酿酒酵母在冷冻以及解冻后的存活率直接影响面团膨胀和保持所需风味以及质地特征的能力。然而，在冷冻和解冻过程中，酿酒酵母细胞内会产生冰晶以及发生氧化应激，冰晶的产生和氧化应激反应会严重损伤酿酒酵母细胞，使得酿酒酵母活性降低甚至失活。具体而言，冷冻过程中会导致细胞内产生高渗透压以及冰晶，从而破坏细胞膜；而解冻过程中会产生对细胞有害的活性氧，进而影响酿酒酵母菌的存活。因此，亟需一种能够耐受反复冻融的酿酒酵母菌。

2、目前提高酿酒酵母冻融耐受性的策略主要依赖于在对工业菌株中进行基因改造来增加甘油积累或增强水通道蛋白表达，进而提高酿酒酵母的冻融耐受性。甘油在低温下通过稳定本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高冻融耐受性的酿酒酵母菌，其特征在于，所述酿酒酵母菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.32515。

2.权利要求1所述的酿酒酵母菌在制备发酵食品中的应用。

3.一种高冻融耐受性的酿酒酵母菌的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，步骤S2中所述冻融循环的次数为8-15次。

5.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，步骤S1中所述若干种酿酒酵母菌包括酿酒酵母CSM WT、酿酒酵母YPS1000 WT、酿...

【技术特征摘要】

1.一种高冻融耐受性的酿酒酵母菌，其特征在于，所述酿酒酵母菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.32515。

2.权利要求1所述的酿酒酵母菌在制备发酵食品中的应用。

3.一种高冻融耐受性的酿酒酵母菌的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，步骤s2中所述冻融循环的次数为8-15次。

5.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，步骤s1中所述若干种酿酒酵母菌包括酿酒酵母csm wt、酿酒酵母yps1000 wt、酿酒酵母dby12007。

6.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，所述筛选获得孢子体的步骤为将产孢培养基上收集到的菌落制备为悬浮液，将悬浮液离心，收集离心管中的沉淀并加入裂解液，加热至60-70℃，再次离心获得孢子体。

7.根据权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，所述配型鉴定为挑取培养基上的菌落，使用引物进行菌落pcr，同时扩增出两条条带的菌株为二倍体，其中，所述引物的基因序列如seq i...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈安琪，曲天直，司齐齐，李江华，堵国成，陈坚，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：