快速检测猪流行性腹泻病毒的乳胶免疫层析试纸条及其制备方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，涉及快速检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）的乳胶免疫层析试纸条及其制备方法。该试纸条包括PVC底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；硝酸纤维素膜上设有质控线C和检测线T。结合垫上喷涂乳胶微球标记的PEDV N蛋白单克隆捕获抗体，检测线T线处包被PEDV N蛋白单克隆检测抗体1E1，质控线C线处包被羊抗鼠IgG。本试纸条能特异性识别PEDV，且与临床症状相似的其他猪源肠道冠状病毒不发生反应。该试纸条特异性好、灵敏性较高、操作简单、10min内判读结果，相较于传统的胶体金检测技术，稳定性和显色效果得到了明显的提升。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种快速检测猪流行性腹泻病毒乳胶免疫层析试纸条及其制备方法。

技术介绍

1、猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，ped)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,pedv)引起的高度接触性肠道传染病，临床常表现为呕吐、腹泻、脱水及肠炎。虽各个年龄的猪均易感，但对于仔猪的伤害性最大，致死率高达100％。临床上ped的防控是一个系统的策略，不但需要有效的疫苗免疫，还要配合及时准确的抗体抗原检测。但近年来随着pedv流行株和疫苗株同源性的变化导致部分疫苗失效，难以提供足够的保护。因此早期快速诊断依旧是防治该病的重点。

2、常用的病原学检测方法包括病毒的分离培养、电镜检测、免疫荧光、酶联免疫吸附试验(elisa)或聚合酶链式反应(pcr)和实时定量pcr等方法，这些方法分别有各自独特的优势，但在检测时比较耗时，且需要专业技术人员，否则易造成实验结果的差异，因此很难满足现场或者临床样品的快速、廉价、高效监测的要求。

3、侧向免疫层析技术是在抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区包括氨基酸序列为GYTFTAYV的CDR1、氨基酸序列为INPYNDRT的CDR2、氨基酸序列为ARDDDDYEEGFAY的CDR3；

2.根据权利要求1所述的抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列和轻链可变区氨基酸序列分别如SEQ ID NO:5、SEQID NO:6所示。

3.编码权利要求1所述的抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的基因。

4.根据权利要求3所述的基因，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的基因序...

【技术特征摘要】

1.猪流行性腹泻病毒n蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区包括氨基酸序列为gytftayv的cdr1、氨基酸序列为inpyndrt的cdr2、氨基酸序列为arddddyeegfay的cdr3；

2.根据权利要求1所述的抗猪流行性腹泻病毒n蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列和轻链可变区氨基酸序列分别如seq id no:5、seqid no:6所示。

3.编码权利要求1所述的抗猪流行性腹泻病毒n蛋白单克隆抗体的基因。

4.根据权利要求3所述的基因，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的基因序列分别如seq id no:7、seq id no:8所示。

5.包含权利要求3所述的基因的重组表达载体。

6.包含权利要求5所述的重组表达载体的宿主细胞。

7.权利要求1或2所述的单克隆抗体、权利要求3或4所述的基因、权利要求5所述的重组表达载体、权利要求6所述的宿主细胞在以下任一方面中的应用，其特征在于，

8.快速检测猪流行性腹泻病毒...

【专利技术属性】
技术研发人员：王琦，曹丽艳，郑海学，孔祥雨，张宇，袁聪，段月月，施磊，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心，
类型：发明
国别省市：