一种利用固氮酶基因鉴定沙漠固氮蓝藻的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用固氮酶基因鉴定沙漠固氮蓝藻的方法，涉及沙漠固氮蓝藻类别鉴定领域，旨在提供一种沙漠固氮蓝藻的快速鉴别方法，采用的技术方案是，对样品进行纯化培养；对培养后样品进行DNA提取和PCR扩增，数据处理和生物信息学分析。首先利用缺氮培养基对沙漠固氮蓝藻细胞进行培养观察其是否能够正常生长，再以提取的沙漠固氮蓝藻基因组DNA作为模板，以nifH基因序列作为扩增的目标区域片段进行常规PCR扩增，检验其是否能够出现nifH基因序列的单一扩增产物，能够通过层层递进的方式，以简便易操作的方法快速鉴定沙漠固氮蓝藻的种类，可操作性强，方式简便易于掌握，能够快速从沙漠蓝藻中鉴别出沙漠固氮蓝藻。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及沙漠固氮蓝藻类别鉴定领域，具体为一种利用固氮酶nif基因鉴定沙漠土壤中沙漠固氮蓝藻的方法。

技术介绍

1、固氮蓝藻(nitrogen-fixing，cyanophyta)是一种低等藻类植物，是蓝藻中具有明显固氮能力的种类。已作过研究或测定过固氮能力的约有160余种和变种。其中绝大多数属于念珠藻目中的种类。如念珠藻(nostoc)、鱼腥藻(anabae-na)、单岐藻(tolypothrix)、简孢藻(cylindros，permum)、项圈藻(anabaenopsis)、眉藻(calothrix)等。此外，色球藻目和真枝藻目的一些种类也有固氮能力。

2、固氮蓝藻通过其细胞中固氮酶的作用，将大气中游离态的分子氮还原成可供植物利用的氮素化合物，同时在其生长繁殖过程中不断分泌出氨基酸、多肽等含氮化合物和活性物质，加之固氮蓝藻死亡后释放出大量的氨态氮，因而大大增加土壤肥力。大多数固氮蓝藻的固氮酶都存在于一种称为异形胞的特殊细胞中，因而异形胞被认为是蓝藻的主要固氮场所。

3、固氮蓝藻具有极强的生态适应能力，可在许多生境中以游离态本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种沙漠蓝藻基因组扩增引物，其特征在于，所述扩增引物为基于固氮酶nif基因的扩增引物。

2.根据权利要求1所述的一种沙漠蓝藻基因组扩增引物，其特征在于：所述扩增引物为nifH-F、nifH-R中的至少一种；

3.一种利用如权利要求2所述的扩增引物鉴定沙漠固氮蓝藻的方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的一种利用固氮酶基因鉴定沙漠固氮蓝藻的方法，其特征在于：所述步骤1中使用缺氧培养基进行培养。

5.根据权利要求3所述的一种利用固氮酶基因鉴定沙漠固氮蓝藻的方法，其特征在于：所述步骤2中，所述PCR扩增以提取的样品DNA为模...

【技术特征摘要】

1.一种沙漠蓝藻基因组扩增引物，其特征在于，所述扩增引物为基于固氮酶nif基因的扩增引物。

2.根据权利要求1所述的一种沙漠蓝藻基因组扩增引物，其特征在于：所述扩增引物为nifh-f、nifh-r中的至少一种；

3.一种利用如权利要求2所述的扩增引物鉴定沙漠固氮蓝藻的方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的一种利用固氮酶基因鉴定沙漠固氮蓝藻的方法，其特征在于：所述步骤1中使用缺氧...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁成晨，布帕提玛穆·阿布都克热穆，艾萨江·图合提，
申请(专利权)人：新疆金正生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：