一种膀胱肿瘤类器官及其培养方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种膀胱肿瘤类器官及其培养方法和应用，属于类器官培养技术领域。本发明专利技术将膀胱肿瘤组织与人源膀胱肿瘤类器官培养基混合得细胞悬液，将细胞悬液铺于超低吸附细胞培养板中培养，得膀胱肿瘤类器官。该培养方法使用超低吸附细胞培养板，实现膀胱肿瘤类器官在液态培养基中悬浮培养。利用本发明专利技术所述培养方法实现了对人源膀胱肿瘤类器官的快速培养，提高了培养成功率，同时获得的人源膀胱肿瘤类器官可进行消化并稳定传代。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于类器官培养，尤其涉及一种膀胱肿瘤类器官及其培养方法和应用。

技术介绍

1、膀胱癌一般是指发生在膀胱的尿路上皮癌，是最常见的泌尿系统癌症，其是一种高度异质性的恶性肿瘤，在病理学上可分为两大类型：非肌层浸润性膀胱癌和肌层浸润性膀胱癌。大约70％以上的膀胱癌患者表现为非肌层浸润性膀胱癌；在年轻患者(<40岁)中，非肌层浸润性膀胱癌的比例甚至更高。至于肌层浸润性膀胱癌，虽然吸烟是膀胱癌最明确的危险因素，但越来越多的证据表明，遗传易感性和家族遗传可能会导致膀胱癌的发生。在治疗上，非肌层浸润性肿瘤在手术后需进行膀胱内灌注化疗，而相当一部分患者会在治疗过程中面临肿瘤复发。对于患有肌层浸润性肿瘤的患者则需在根治性膀胱切除术前进行一定周期的新辅助化疗，但一部分患者并不能在新辅助化疗中获益。

2、类器官是指由分化细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞或肿瘤细胞能够在体外生成的器官的微型化和简化版本，它们可以在三维结构中自我组织，并能自我更新和复制。类器官细胞发展史上的一个里程碑是clevers和他的小组在2009年发现了lgr5(+)干细胞可以自我分本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种膀胱肿瘤类器官的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述膀胱肿瘤组织的预处理方法包括如下步骤：将膀胱肿瘤组织用含双抗的PBS清洗，切碎；将切碎的膀胱肿瘤组织在含有Y-27632的Advanced DMEM/F-12培养基中清洗重悬，过滤，离心，保留细胞沉淀；将细胞沉淀加入红细胞裂解液去除红细胞，得预处理的膀胱肿瘤组织。

3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述膀胱肿瘤类器官培养基以Advanced DMEM/F-12为基础培养基，还包括0.5-2％HEPES缓冲液、0.5-2％青霉素链霉素溶液、0....

【技术特征摘要】

1.一种膀胱肿瘤类器官的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述膀胱肿瘤组织的预处理方法包括如下步骤：将膀胱肿瘤组织用含双抗的pbs清洗，切碎；将切碎的膀胱肿瘤组织在含有y-27632的advanced dmem/f-12培养基中清洗重悬，过滤，离心，保留细胞沉淀；将细胞沉淀加入红细胞裂解液去除红细胞，得预处理的膀胱肿瘤组织。

3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述膀胱肿瘤类器官培养基以advanced dmem/f-12为基础培养基，还包括0.5-2％hepes缓冲液、0.5-2％青霉素链霉素溶液、0.5-2％glutamax、1-3％b-27添加剂、0.5-2mm n-乙酰半胱氨酸、8-12mm烟酰胺、8-12μmsb202190、0.5-2μma83-01、8-12μmy-27632、450-550ng/ml重组人rspo1蛋白、80-120ng/ml重组人头蛋白、15-25ng/ml重组人成纤维生长因子-10、2-8ng/ml重组人成纤维生长因子-2、45-5...

【专利技术属性】
技术研发人员：张勇，刘泽华，贾博林，翟钊，吴凡，贾彬，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：