通过基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法及应用技术

技术编号:44656810 阅读:19 留言:0更新日期:2025-03-17 18:49
本发明专利技术提出一种通过基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法,其包括以下步骤:第一步,细胞培养增殖:选择乳腺上皮细胞,在基础培养基中添加10%胎牛血清(FBS)和1%抗生素,培养至80%汇合度;第二步,特定的外源物质及缬氨酸添加:在培养基中进一步加入特定的外源物质和缬氨酸,继续培养48小时,确保基因充分表达,所述特定外源物质具体包括CSN1S1干扰剂、mTOR信号通路促进剂、二烯丙基二硫化物;第三步,细胞处理及样本收集。该方法可以提高乳腺上皮细胞合成酪蛋白的速率;提高乳腺上皮细胞合成酪蛋白的总量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程,具体涉及一种通过基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法。


技术介绍

1、酪蛋白作为乳腺上皮细胞分泌的重要蛋白质之一,在食品、医药及化妆品等多个领域具有重要的应用价值。然而,在乳腺上皮细胞的体外培养过程中,酪蛋白的合成速率普遍较低,导致其合成量往往仅达到微克每毫升(μg/ml)或纳克每毫升(ng/ml)的水平,甚至低于常规检测技术的灵敏度阈值。这种低产量和低速率的限制,严重影响了实验分析的准确性,并对后续应用造成了制约。

2、目前,为了提高乳腺上皮细胞的酪蛋白合成水平,主要采用以下几种方法:

3、延长培养周期:通过拉长培养时间增加乳腺上皮细胞的合成总量。这种方法虽然简单,但效率较低,且培养周期的延长会显著增加经济成本与时间成本。同时,长时间的细胞培养可能带来不可控的试验变量,增加实验结果的不确定性,影响数据的可靠性。

4、扩大细胞培养规模:通过增加培养基体积和细胞数量提高酪蛋白的总产量。然而,这种方法需要更大的培养设备和更多的资源投入,在实验室条件下难以实现高效扩展。此外,由于乳腺上皮细胞的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种通过基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法,其特征在于:包括以下步骤:

2.如权利要求1所述基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法,其特征在于:所述特定外源物质的添加量为CSN1S1干扰剂浓度为25-50μg/mL,mTOR信号通路促进剂浓度为5-10μg/mL,二烯丙基二硫化物浓度为5-10μg/mL。

3.如权利要求1所述基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法,其特征在于:所述特定外源物质的添加量为CSN1S1干扰剂浓度为50μg/mL,mTOR信号通路促进剂浓度为10μg/mL,二烯丙基二硫化物浓度为10μg/mL。

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【技术特征摘要】

1.一种通过基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法,其特征在于:包括以下步骤:

2.如权利要求1所述基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法,其特征在于:所述特定外源物质的添加量为csn1s1干扰剂浓度为25-50μg/ml,mtor信号通路促进剂浓度为5-10μg/ml,二烯丙基二硫化物浓度为5-10μg/ml。

3.如权利要求1所述基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法,其特征在于:所述特定外源物质的添加量为csn1s1干扰剂浓度为50μg/ml,mtor信号通路促进剂浓度为10μg/ml,二烯丙基二硫化物浓度为10μg/ml。

4.如权利要求1所述基因和信号通路调控的乳腺上皮细胞酪蛋白合成方法,其特征在于:所述缬氨酸的添加量为6.4mmol/l-12.8mmol/l。

5.如权利要求1所述提升乳腺上皮细胞酪蛋白表达量的方法,其特征在于:第一步中,设置培养环境中的氧气体积浓度为21%,第二步中调整氧气体积浓度至18%。

【专利技术属性】
技术研发人员:邵伟杨敏张欣雨
申请(专利权)人:新疆农业大学
类型:发明
国别省市:

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