一种聚丙烯酰胺凝胶及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种聚丙烯酰胺凝胶，该凝胶包含浓缩胶和分离胶，浓缩胶的胶液包括聚丙烯酰胺浓缩胶预混液和引发剂；分离胶的胶液包括聚丙烯酰胺分离胶预混液和引发剂；聚丙烯酰胺浓缩胶预混液包含4wt％聚丙烯酰胺溶液、Tris‑HCl缓冲液、0.4wt％促凝剂和染料；聚丙烯酰胺分离胶预混液包含6wt％～15wt％聚丙烯酰胺溶液、Tris‑HCl缓冲液和1.2wt％促凝剂；促凝剂包含N,N,N’,N’‑四乙基乙二胺和亚硫酸氢钠；引发剂包含过硫酸铵。本发明专利技术通过改进促凝剂的成分及配比，缩短了凝胶时间，减少了凝胶制备过程中有毒试剂挥发对人的伤害；同时，通过加入一定比例的卤代乙酸，提升了观察的便利性和实验效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质电泳，特别是涉及一种不使用四甲基乙二胺(temed)促凝剂的聚丙烯酰胺凝胶。

技术介绍

1、凝胶电泳是生物学科实验室中的一项基本技术，可用于分离大分子，如dna、rna和蛋白质。不同的分离介质和机制允许这些分子的子集通过利用其物理特性而被更有效地分离。特别是对于蛋白质，聚丙烯酰胺凝胶电泳(page)通常是首选技术。目前，一般通过添加过硫酸铵(aps)使丙烯酰胺-双丙烯酰胺混合物聚合形成聚丙烯酰胺，在促凝剂四甲基乙二胺(temed)的催化下，产生高度交联的凝胶基质。凝胶充当筛子，蛋白质在电场作用下通过这个筛子。蛋白质总体带正电或负电，这使得蛋白质分子能够朝向等电点移动，在等电点分子没有净电荷。通过使蛋白质变性并赋予它们均匀的负电荷，可以在它们向正电极迁移时基于它们的大小分离它们。

2、在实际操作中，传统的聚丙烯酰胺凝胶的制胶技术存在以下缺点：(1)temed促凝剂是一种挥发易燃、有腐蚀性及刺激性气味的神经性试剂；(2)试剂种类多，配制繁琐；(3)凝固时间长，一般需要等待30-60min；(4)传统聚丙烯酰胺凝胶无色透明，在上样本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种聚丙烯酰胺凝胶，包含浓缩胶和分离胶，其特征在于，所述浓缩胶的胶液包括聚丙烯酰胺浓缩胶预混液和引发剂；所述分离胶的胶液包括聚丙烯酰胺分离胶预混液和引发剂；所述聚丙烯酰胺浓缩胶预混液包含有4wt％聚丙烯酰胺溶液、Tris-HCl缓冲液、0.4wt％促凝剂和染料；所述聚丙烯酰胺分离胶预混液包含有6wt％～15wt％聚丙烯酰胺溶液、Tris-HCl缓冲液和1.2wt％促凝剂；所述促凝剂包含有N,N,N’,N’-四乙基乙二胺和亚硫酸氢钠；所述引发剂包含有过硫酸铵溶液。

2.根据权利要求1所述的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于，所述聚丙烯酰胺溶液为30wt％Acr-Bis溶液，由丙烯酰...

【技术特征摘要】

1.一种聚丙烯酰胺凝胶，包含浓缩胶和分离胶，其特征在于，所述浓缩胶的胶液包括聚丙烯酰胺浓缩胶预混液和引发剂；所述分离胶的胶液包括聚丙烯酰胺分离胶预混液和引发剂；所述聚丙烯酰胺浓缩胶预混液包含有4wt％聚丙烯酰胺溶液、tris-hcl缓冲液、0.4wt％促凝剂和染料；所述聚丙烯酰胺分离胶预混液包含有6wt％～15wt％聚丙烯酰胺溶液、tris-hcl缓冲液和1.2wt％促凝剂；所述促凝剂包含有n,n,n’,n’-四乙基乙二胺和亚硫酸氢钠；所述引发剂包含有过硫酸铵溶液。

2.根据权利要求1所述的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于，所述聚丙烯酰胺溶液为30wt％acr-bis溶液，由丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺按质量比29:1聚合而成。

3.根据权利要求1所述的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于，所述聚丙烯酰胺浓缩胶预混液中，tris-hcl缓冲液的浓度为0.16m，ph值为6.8；所述聚丙烯酰胺分离胶预混液中，tris-hcl缓冲液的浓度为0.39m，ph值为8.8。

4.根据权利要求1所述的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于，所述促凝剂中，n,n,n’,n’-四乙基乙二胺的重量百分比为5wt％～15wt％，亚硫酸氢钠的重量百分比为5wt％～16wt％。

5.根据权利要求1所述的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于，所述过硫酸铵溶液的重量百分比浓度为0.1wt％。

6.根据权利要求1所述的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于，所述聚丙烯酰胺分离胶预混液中还包含有10wt％以下的卤代乙酸。

7.根据权利要求6所述的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于，所述卤代...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁锦，杨程，董博然，曹陈昊，
申请(专利权)人：上海百生跃生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：