一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域。本发明专利技术公开了一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.种子活化；S2.种子扩增；S3.发酵罐扩大生产：将步骤S2制备的宿主菌菌液接种到发酵培养基中，温度为40‑45℃，转速为10‑30rpm，厌氧培养0‑3h，然后再接种步骤S2制备的噬菌体增殖液，温度为35‑40℃，转速为40‑60rpm，厌氧条件培养0.5‑2h，紧接着将温度提高到40‑45℃，转速为10‑20rpm，罐压维持0.5‑1.0MPa，厌氧培养4‑6h结束发酵，在线调控pH。本发明专利技术还提供了一种噬菌体产品。本发明专利技术提供的一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，通过改善生产过程中pH下降的问题，提高了生产效率，提高了成品发酵液中产气荚膜梭菌噬菌体的稳定性，延长了产气荚膜梭菌噬菌体产品在常温环境下的储存期。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法。

技术介绍

1、产气荚膜梭菌噬菌体治疗产气荚膜梭菌感染引起的疾病被公众广泛认可，该方法起效快，无抗生素残留，不会引起细菌耐药性。由于产气荚膜梭菌为厌氧菌，因此在培养的过程中会进行无氧呼吸利用葡萄糖产酸使发酵液ph降低，较低的ph值将影响发酵液噬菌体效价，并且对噬菌体的稳定性产生很大的影响。目前，产气荚膜梭菌噬菌体的制备多采用成品的培养基例如脑心浸出液培养基、tsb培养基、强化梭菌培养基、厌氧肉肝汤培养基等，这些培养基虽然发酵液效价相对稳定，但是工业化生产时成本较高。针对上述中的相关技术，专利技术人发现，为了解决发酵液效价低和不稳定的问题，具体的解决方案有：筛选高效价的噬菌体，此种方法虽然简单，但是对于部分性能优良但效价低的噬菌体不友好；培养基及发酵工艺进行优化，例如，cn117431219a中针对噬菌体rdp-cp-21008中的培养基及发酵工艺，但技术方案仍存在发酵液ph值偏低的问题，导致最终发酵液噬菌体效价低且不稳定的问题；cn117925441a专利中的培养基成分复杂，存在生产成本较高本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，所述步骤S3中的发酵培养基为工业化发酵培养基、TSB肉汤、厌氧肉肝汤、FTG肉汤中的任意一种。

3.根据权利要求2所述的一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，所述步骤S3中的发酵培养基为工业化发酵培养基，所述工业化生产发酵培养基，包括以下成分：以质量百分比计，1-2％厌氧肉肝汤、1-5％酵母浸粉、0.2-1.5％蛋白胨、1-3％碳源、0.5-0.9％氯化钠、0.002-0.01％氯化镁、0.002-0.01％氯...

【技术特征摘要】

1.一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，所述步骤s3中的发酵培养基为工业化发酵培养基、tsb肉汤、厌氧肉肝汤、ftg肉汤中的任意一种。

3.根据权利要求2所述的一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，所述步骤s3中的发酵培养基为工业化发酵培养基，所述工业化生产发酵培养基，包括以下成分：以质量百分比计，1-2％厌氧肉肝汤、1-5％酵母浸粉、0.2-1.5％蛋白胨、1-3％碳源、0.5-0.9％氯化钠、0.002-0.01％氯化镁、0.002-0.01％氯化钙、0.001-0.01％碳酸钙，初始ph为8.0-8.5。

4.根据权利要求3所述的一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，所述工业化生产发酵培养基中的碳源为葡萄糖、蔗糖或者可溶性淀粉中的任意一种。

5.根据权利要求2所述的一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，所述步骤s3中的发酵培养基的初始ph为6.0-10.0。

6.根据权利要求3所述的一种提升产气荚膜梭菌噬菌体效价的方法，其特征在于，所述步骤s3中的在线调控ph具体包括以下步骤：在接种步骤s2制备的噬菌体增殖液后的培养的过程中时刻监测ph变化情况，当ph降低到7.0以下时及时补加ph发酵调节剂调节ph，将整个发酵过程中ph值维持在6.5-7.5。

7.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜新永，刘长太，马如霞，白静，侯连娜，
申请(专利权)人：青岛润达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：