一种芹菜单粒干种子基因组DNA的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种采用特异性引物对芹菜单粒干种子基因组DNA的提取方法。包括基因组DNA的提取、PCR扩增及检测、以及利用琼脂糖凝胶电泳及荧光成像仪检测PCR扩增产物等步骤。实验结果显示：本发明专利技术建立的利用碱裂解法从芹菜单粒干种子中提取基因组DNA的方法，提取48粒种子的基因组DNA只需要30min，所得的基因组能够满足PCR扩增需要，在4℃下能存放17天以上，具有较高稳定性，可用于后期芹菜商品种子纯度的分子鉴定工作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蔬菜种植，涉及一种芹菜单粒干种子基因组dna的提取方法及应用。

技术介绍

1、芹菜（apiumgraveolens l.）属伞形科旱芹属二年生草本植物，是世界范围内广泛种植的重要叶菜类蔬菜，也是我国最重要的十大蔬菜之一。芹菜的叶柄及叶子不仅富含维生素、纤维素及类胡萝卜素等营养成分，而且其种子还含有丰富挥发性生理活性物质，国内外多项研究表明，芹菜含有芹菜甙、佛手甙内酯等多种药用价值成分，被认为具有潜在药食同源功效的食物。

2、作物基因组dna的提取是分子标记鉴定的前提条件，直接利用种子提取基因组dna，省略了种子的萌发、生长等过程，大大提高了分子标记鉴定的时效性。玉米等大田作物的种子基因组dna提取从裂解液的配方、裂解时间与温度、磁珠等用量等，都具有相对成熟的方法并已大规模应用于实际育种等过程。在蔬菜等作物中，多位研究者对直接利用种子进行基因组dna的快速提取进行了研究。杨帆等利用磁珠法对形状大小不同的7种蔬菜（黄瓜、白菜、甘蓝、芥菜、番茄、辣椒和洋葱等）单粒种子进行基因组dna提取及检测，建立了多种蔬菜作物单粒种子的基因组dna提本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于提取芹菜单粒干种子基因的特异性引物，具有SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示核苷酸序列基因。

2.采用权利要求1所述核苷酸序列基因对芹菜单粒干种子基因组DNA的提取方法，其特征在于按如下的步骤进行：

3.权利要求2所述芹菜单粒干种子基因组DNA提取方法在用于芹菜种子纯度快速鉴定中的应用；所述的应用指的是：提高芹菜种子的稳定性及有利于芹菜种子分子标记的鉴定。

【技术特征摘要】

1.一种用于提取芹菜单粒干种子基因的特异性引物，具有seq id no.1、seq id no.2所示核苷酸序列基因。

2.采用权利要求1所述核苷酸序列基因对芹菜单粒干种子基因组dna的提取方...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴锋，华德平，王武台，运洁，李可心，高国训，
申请(专利权)人：天津市农业科学院，
类型：发明
国别省市：