一种B族链球菌的快速检测方法、试剂盒和系统技术方案

本发明专利技术公开了一种B族链球菌的快速检测方法、试剂盒和系统。族链球菌快速检测试剂盒，包括：检测B族链球菌cfb基因的LAMP混合液和CRISPR/Cas12b混合液。本发明专利技术具有免提取检测，高灵敏度，快速的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医疗器械领域，更具体的说，它涉及一种用于病原体体外诊断的poct检测设备。

技术介绍

1、b族链球菌(group b streptococcus，gbs)是导致新生儿感染的主要病原体。孕妇消化道和泌尿生殖道gbs定植是新生儿早发型gbs病(gbs early-onset disease，gbs-eod)的主要危险因素。约50％gbs定植的孕妇会将细菌传播给新生儿。若产时未预防性静脉应用抗生素，1％～2％的新生儿会发生gbs-eod。目前“预防围产期b族链球菌病(中国)专家共识”建议对所有孕35～37周的孕妇进行gbs筛查。

2、单行naat耗时短(1～2h)，可用于未行gbs筛查孕妇在产程中即时检测。然而，以荧光定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction，qpcr)为代表的常规naat方法的灵敏度仍不足，在缺少增菌培养的情况下，检出失败率为7％～10％。更重要的是，qpcr通常需要进行1h的核酸提取和1.5-2h的热循环核酸扩增，在临床上尤其是早产时存在急产的情况，检测时间仍不本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种B族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的B族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包含DNA快速释放液体系；所述的DNA快速释放液体系组成为氢氧化钠0.8％～1.2％(g/ml)，SDS1％～1.2％(W/V)，Tween 201％～1.2％(V/V)和无酶无菌水。

3.根据权利要求1所述的B族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述的LAMP混合液中含有如下6条六条特异性引物：

4.根据权利要求3所述的B族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述的LAMP混合液组成为：1×等温扩增缓冲液，7～10mM Mg...

【技术特征摘要】

1.一种b族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的b族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包含dna快速释放液体系；所述的dna快速释放液体系组成为氢氧化钠0.8％～1.2％(g/ml)，sds1％～1.2％(w/v)，tween 201％～1.2％(v/v)和无酶无菌水。

3.根据权利要求1所述的b族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述的lamp混合液中含有如下6条六条特异性引物：

4.根据权利要求3所述的b族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述的lamp混合液组成为：1×等温扩增缓冲液，7～10mm mgso4，每个dntp各1～1.5mm，4～5u bstdnapolymerase，其中，各引物的摩尔浓度如下：f3和b3的摩尔浓度均为0.1～0.3μm，fip和bip的摩尔浓度均为1.5～1.8μm，lf和lb的摩尔浓度均为0.3～0.5μm。

5.根据权利要求3所述的b族链球菌快速检测试剂盒，其特征在于，所述的2×crispr/cas12b混合液组成为180～200nm aapcas12b，350～420nm crrna，900～1100nm ssdna荧光报告分子和1×nebr3.1缓冲液。

6.一种快速检测b族链球菌的系统，其特征在于，包含权利要求1～5...

【专利技术属性】
技术研发人员：季明辉，贾书仪，赵文武，庄添驰，高畅，梅浩坤，周子涵，杨英淇，孙涛，刘云，李宁，丁竞竞，杨沐怿，沈洁淼，刁红婷，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：