一种葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒、制备方法及检测方法技术

本发明专利技术属于植物病毒检测的生物技术产品领域，具体涉及一种葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒、制备方法及检测方法，其包括ELISA用微孔板，酶标抗体，缓冲液，显色液，终止液，其中微孔板上包被有GINV特异的多克隆抗体，酶标抗体为辣根过氧化物酶标记的GINV特异性多克隆抗体。本发明专利技术采用的免疫原为基因工程表达的GINV外壳蛋白抗原。本发明专利技术在血清学水平上为葡萄浆果内坏死病毒的检测提供了一种快速、灵敏、简便的方法，并且经济实用，也为葡萄生产中葡萄浆果内坏死病毒的防治及其脱毒苗的制备提供了有效方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物病毒检测的生物技术产品领域，具体涉及一种葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒、制备方法及检测方法。

技术介绍

1、葡萄浆果内坏死病毒（grapevine berryinner necrosis virus, ginv）为乙型线性病毒科（betaflexiviridae）纤毛病毒属（trichovirus）的一种rna病毒，病毒粒子大小为740 nm×12 nm，基因组全长为7229 nt，由3个开放阅读框组成，分别编码复制酶（replicase protein, rp）、移动蛋白（move protein, mp）和外壳蛋白（coat protein,cp）。ginv被认为是葡萄浆果内坏死病（最早称花叶病）的病原，该病于1984年在日本巨峰葡萄上首次被发现，在当时的日本山梨县葡萄园中造成严重危害。被侵染植株长势减弱，春季萌芽延迟，并表现茎内坏死、短节，叶片褪绿，果粒变小，果外变色，果内坏死等症状。据报道，该病毒在我国葡萄产区发生普遍，感染ginv的葡萄植株生长缓慢，枝条上表现出内部坏死、节间缩短，叶片花叶且葡萄浆果表现出外部变色本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括GINV特异性多克隆抗体，GINV特异性多克隆抗体包被于多克隆抗体包被板上，所述GINV特异性多克隆抗体的免疫原氨基酸序列为SEQ ID No.1。

2.根据权利要求1所述的葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括辣根过氧化物酶标记多克隆抗体、基因工程重组GINV外壳蛋白标准品、质控品。

3.根据权利要求1或2所述的葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括辅助试剂：提取反应液、洗涤缓冲液、酶缓冲液、显色剂及反应终...

【技术特征摘要】

1.一种葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括ginv特异性多克隆抗体，ginv特异性多克隆抗体包被于多克隆抗体包被板上，所述ginv特异性多克隆抗体的免疫原氨基酸序列为seq id no.1。

2.根据权利要求1所述的葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括辣根过氧化物酶标记多克隆抗体、基因工程重组ginv外壳蛋白标准品、质控品。

3.根据权利要求1或2所述的葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括辅助试剂：提取反应液、洗涤缓冲液、酶缓冲液、显色剂及反应终止液。

4.一种权利要求1-3任一项所述的葡萄浆果内坏死病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括基因工程重组ginv外壳蛋白标准品的制备步骤、ginv特异多克隆抗体的制备步骤、多克隆抗体包被板的制备步骤、辣根过氧化物酶标多克隆抗体的制备步骤、质控品的制备步骤以及辅助试剂的制备步骤。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述ginv...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺振，邓小龙，王智磊，秦朗，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：