基于T型结构协同激活CRISPR/Cas12a系统的方法及其应用技术方案

本发明专利技术涉及生物传感技术领域，具体涉及一种基于T型结构协同激活CRISPR/Cas12a系统的方法及其应用，利用两条分裂DNA激活链与crRNA组成T型结构，即可激活CRISPR/Cas12a系统，激活的CRISPR/Cas12a系统具有反式切割活性，可使修饰有FAM荧光基团和BHQ1猝灭基团的FQ‑ssDNA探针反式裂解，荧光信号恢复，本申请通过合理设计不同的靶标对应的激活链的来源，能够将检测靶标由传统的核酸检测扩展到非核酸靶标如蛋白质和金属离子，由此实现多种目标物的生物传感应用，另外，基于T型CRISPR/Cas12a协同激活策略的设计具有极大的灵活性和通用性，可以与多种放大策略及检测平台连用，有效提高分析方法的灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物传感，尤其涉及一种基于t型结构协同激活crispr/cas12a系统的方法及其应用。

技术介绍

1、成簇规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaced shortpalindromic repeat，crispr)由crisprrna(crrna)编码，是存在于大多数原核生物中的一种获得性免疫机制。crrna可以与crispr相关蛋白(crispr associatedprotein,cas)形成复合物，引导cas蛋白释放内切酶活性，从而参与抵御噬菌体或质粒中外源遗传因子的入侵。近年来，crispr/cas系统不仅被用作转录调控和基因组编辑，而且还被广泛用作生物传感工具，在医学检验领域发挥着重要的作用。其中，crispr/cas12a系统因其具有极佳的可编程性和兼容性，被激活后可以释放高效的反式切割活性，被认为是最具影响力的crispr/cas系统之一。

2、然而，目前大多数研究都依赖于使用含有特定tttn序列(pam序列)的双链dna(dsdna)或与crrna序列互补的单链dna(本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于T型结构协同激活CRISPR/Cas12a系统的方法，其特征在于，

2.如权利要求1所述的基于T型结构协同激活CRISPR/Cas12a系统的方法，其特征在于，

3.如权利要求2所述的基于T型结构协同激活CRISPR/Cas12a系统的方法，其特征在于，

4.如权利要求1所述的基于T型结构协同激活CRISPR/Cas12a系统的方法，其特征在于，

5.如权利要求1所述的基于T型结构协同激活CRISPR/Cas12a系统的方法，其特征在于，

6.一种基于如权利要求1～5任一项所述的方法构建的生物传感器，其特征在于，...

【技术特征摘要】

1.一种基于t型结构协同激活crispr/cas12a系统的方法，其特征在于，

2.如权利要求1所述的基于t型结构协同激活crispr/cas12a系统的方法，其特征在于，

3.如权利要求2所述的基于t型结构协同激活crispr/cas12a系统的方法，其特征在于，

4.如权利要求1所述的基于t型结构协同激活crispr/cas12a系统的方法，其特征在于，

5.如权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵敏，李玉青，陈安懿，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：