来源于西瓜银斑驳病毒的黄瓜侵染性核酸及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开来源于西瓜银斑驳病毒的黄瓜侵染性核酸及其构建方法和应用。本发明专利技术针对石家庄地区流行的西瓜银斑驳病毒，采用分段引物分别扩增并整合西瓜银斑驳病毒基因组L RNA、M RNA和S RNA，构建侵染性全长cDNA克隆，并将其应用于黄瓜抗性种质资源的筛选，相比现有技术操作简单、接种发病率高、鉴定准确性高，可以对黄瓜种质资源在苗期进行快速、准确的抗病性鉴定，提高育种效率、节约育种成本、加快育种进程。该鉴定方法可应用于黄瓜种质资源、各类亲本、杂交种等材料的抗病鉴定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程，特别是涉及来源于西瓜银斑驳病毒的黄瓜侵染性核酸及其构建方法和应用。

技术介绍

1、黄瓜(cucumissativus l)是我国重要的蔬菜作物之一，但是近年来黄瓜病害问题日益严重，成为制约黄瓜生产的一个重要的因素，严重影响黄瓜的产量和品质。

2、西瓜银斑驳病毒病是由西瓜银斑驳病毒(watermelon silver mottle virus)引起的，该病毒属于番茄斑萎病毒科(tospoviridae)正番茄斑萎病毒属(orthotospovirus)。生产上西瓜银斑驳病毒病难以控制，尚未开发出防治植物病毒病害的特效药剂，目前主要使用健康的幼苗进行移植和喷洒杀虫剂两种方法来控制。但是杀虫剂能防治蓟马但不能有效阻止病毒的侵染，而且使用化学药剂控制会污染环境、成本较高，因此西瓜银斑驳病毒的早期针对性的防控预警对于培育抗病毒优良品种尤为重要。

技术实现思路

1、本专利技术基于在河北省石家庄市发现的部分黄瓜植株叶片出现斑驳、叶片畸形等疑似病毒侵染症状，为进一步明确引起黄瓜相关症状的病本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种来源于西瓜银斑驳病毒的黄瓜侵染性核酸，其特征在于，其利用引物组以西瓜银斑驳病毒基因组为模板构建得到；

2.根据权利要求1所述的黄瓜侵染性核酸，其特征在于，所述核酸包含来自于西瓜银斑驳病毒的全基因组的单链L RNA、单链M RNA和单链SRNA，或者包含这些RNA对应的cDNA。

3.根据权利要求1所述的黄瓜侵染性核酸，其特征在于，L RNA对应的侵染性cDNA具有SEQ ID NO.15所示的核苷酸序列，M RNA对应的侵染性cDNA具有SEQ ID NO.16所示的核苷酸序列，S RNA对应的侵染性cDNA具有SEQ ID NO.17所示的核苷酸序列。<...

【技术特征摘要】

1.一种来源于西瓜银斑驳病毒的黄瓜侵染性核酸，其特征在于，其利用引物组以西瓜银斑驳病毒基因组为模板构建得到；

2.根据权利要求1所述的黄瓜侵染性核酸，其特征在于，所述核酸包含来自于西瓜银斑驳病毒的全基因组的单链l rna、单链m rna和单链srna，或者包含这些rna对应的cdna。

3.根据权利要求1所述的黄瓜侵染性核酸，其特征在于，l rna对应的侵染性cdna具有seq id no.15所示的核苷酸序列，m rna对应的侵染性cdna具有seq id no.16所示的核苷酸序列，s rna对应的侵染性cdna具有seq id no.17所示的核苷酸序列。

4.根据权利要求1-3任一项所述的侵染性核酸的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：采用pcb301-ch载体，整合西瓜银斑驳病毒完整基因组产生重组表达载体，构建重组病毒，以大肠杆菌感受态细胞进行克...

【专利技术属性】
技术研发人员：康忱，吴志明，田哲娟，李亚栋，高亢，王鹏，宋雪，吴楠，
申请(专利权)人：河北省农林科学院经济作物研究所，
类型：发明
国别省市：