【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于领域,尤其涉及一种基于点击化学反应和表面增强拉曼光谱的单细胞酶活成像检测系统及其应用。
技术介绍
1、细胞内的酶促过程在调控多种生化途径和细胞功能中起着至关重要的作用。准确监测酶活性对于研究细胞代谢、信号传导以及疾病进展具有重要意义。目前,常用的酶活性监测方法包括酶联免疫吸附试验(elisa)、生物发光和荧光成像技术。荧光成像因其高灵敏度和活体内可视化能力而被广泛应用。然而,荧光成像存在一些局限性,如光漂白、自发荧光和发射光谱重叠,导致其多重检测能力有限。此外,荧光团的尺寸与酶相当,可能会干扰酶的正常功能。这些问题表明有必要开发新的成像方法,能够在保持高特异性和高灵敏度的同时,不影响空间和时间分辨率。
2、拉曼成像作为荧光成像的有效替代方案,具有光漂白小、背景噪声低和无光谱重叠等优点。此外,拉曼成像中的成像基团通常是特定的化学键(即拉曼标签),它们比传统荧光团小得多,能最大限度减少对酶活性的干扰。尽管如此,拉曼成像在酶活性检测中的应用仍然有限。目前的方法主要检测酶促反应的总体产物,而不是特定的酶-底物反应,说明
...【技术保护点】
1.一种单细胞酶活成像检测系统,其特征在于,所述检测系统包括微流控细胞培养装置、多肽探针和壳层隔绝金属纳米颗粒,所述微流控细胞培养装置形成封闭的微流控通道控制溶液流速和引导多肽探针、壳层隔绝金属纳米颗粒的引入。
2.根据权利要求1所述单细胞酶活成像检测系统,其特征在于,所述多肽探针序列为Val-Cit-Cys(StBu)-Pra-Gly-CBT、Cit-Val-Gly-Cys(StBu)-Pra-CBT或Val-Cys(StBu)-Pra-Gly-Cit-CBT中的任意一种或几种。
3.根据权利要求2所述单细胞酶活成像检测系统,其特征在于,所述
...【技术特征摘要】
1.一种单细胞酶活成像检测系统,其特征在于,所述检测系统包括微流控细胞培养装置、多肽探针和壳层隔绝金属纳米颗粒,所述微流控细胞培养装置形成封闭的微流控通道控制溶液流速和引导多肽探针、壳层隔绝金属纳米颗粒的引入。
2.根据权利要求1所述单细胞酶活成像检测系统,其特征在于,所述多肽探针序列为val-cit-cys(stbu)-pra-gly-cbt、cit-val-gly-cys(stbu)-pra-cbt或val-cys(stbu)-pra-gly-cit-cbt中的任意一种或几种。
3.根据权利要求2所述单细胞酶活成像检测系统,其特征在于,所述pra的侧链接枝有炔基,cbt的末端含有氰基。
4.根据权利要求1所述单细胞酶活成像检测系统,其特征在于,所述壳层隔绝金属纳米颗粒中金属纳米颗粒为金、银或铜中的任意一种,壳层为二氧化硅或氧化铝中的任意一种。
5.根据权利要求1所述单细胞酶活成像检测系统,其特征在于,所述微流控细胞培养装置包括微流控软管(1)、带孔的pdms块(2)和打孔玻璃片(3),将所述pdms块(2)上的孔与打孔玻璃片(3)上的孔对齐,并将pdms块(2)贴合在打孔玻璃片(3)两端形成玻璃流道盖,再...
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