【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
技术实现思路
【技术保护点】
1.一种核苷酸或核苷，其包含：
2.权利要求1所述的核苷酸，其中所述可裂解标记连接至所述含氮碱基、所述3’O或所述5’磷酸基团。
3.权利要求1所述的核苷酸，其具有根据式I的结构：
4.权利要求1所述的核苷酸，其具有根据式II的结构
5.权利要求1所述的核苷酸，其具有根据式III的结构：
6.权利要求1、2、4或5所述的核苷酸，其中所述标记选自由以下各项组成的组：
7.权利要求1-4中任一项所述的核苷酸，其中所述可裂解保护基团选自烯丙基、二甲基二硫基、硝基苄基和叠氮基保护基团。
8.权...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种核苷酸或核苷，其包含：
2.权利要求1所述的核苷酸，其中所述可裂解标记连接至所述含氮碱基、所述3’o或所述5’磷酸基团。
3.权利要求1所述的核苷酸，其具有根据式i的结构：
4.权利要求1所述的核苷酸，其具有根据式ii的结构
5.权利要求1所述的核苷酸，其具有根据式iii的结构：
6.权利要求1、2、4或5所述的核苷酸，其中所述标记选自由以下各项组成的组：
7.权利要求1-4中任一项所述的核苷酸，其中所述可裂解保护基团选自烯丙基、二甲基二硫基、硝基苄基和叠氮基保护基团。
8.权利要求7所述的核苷酸，其中所述可裂解保护基团选自：
9.权利要求1、2、4或5所述的核苷酸，其中所述可裂解连接体是可光裂解的、通过与水溶性膦接触而裂解或被水溶性含过渡金属的催化剂裂解。
10.权利要求9所述的核苷酸，其中所述可裂解连接体包含烯丙基或叠氮基。
11.权利要求[0124]所述的核苷酸，其中所述可裂解连接体包含：
12.权利要求3所述的核苷酸，其选自：
13.权利要求4所述的核苷酸，其选自：
14.权利要求5所述的核苷酸，其选自：
15.权利要求4所述的核苷酸，其选自：
16.权利要求5所述的核苷酸，其选自：
17.一种镜像核酸聚合酶，其包含与seq id no:1具有至少90％序列同一性的序列，其中所述聚合酶包含d-型氨基酸。
18.权利要求17所述的聚合酶，其中所述聚合酶由d-型氨基酸组成。
19.权利要求17或18所述的聚合酶，其包含与seq id no:1具有至少95％序列同一性的序列。
20.权利要求19所述的聚合酶，其包含与seq id no:1具有至少96％、97％、98％或99％序列同一性的序列。
21.权利要求17-20中任一项所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比在一个或多个选自e276、k317、n424和s651的氨基酸位点处的一个或多个修饰。
22.权利要求21所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比一个或多个选自e276a、k317g、n424a和s651a的替换。
23.权利要求22所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比e276a、k317g、n424a和s651a替换。
24.权利要求17-23中任一项所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比在一个或多个选自i80、i127、i171、i176、i191、i228、i256、i264、i268、i400、i597、i610、i618、i630、i642、i715、i733和i744的氨基酸位点处的一个或多个修饰。
25.权利要求24所述的聚合酶，其中其包含与seq id no:1相比在一个或多个选自i80、i127、i171、i176、i191、i228、i256、i264、i268、i400、i597、i610、i618、i630、i642、i715、i733和i744的氨基酸位点处的一个或多个从ile替换为ala、val、leu或tyr的替换。
26.权利要求25所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比一个或多个选自i80v、i127v、i171a、i176v、i191v、i228v、i256v、i264a、i268l、i400v、i597v、i610v、i618a、i630l、i642v、i715y、i733v和i744v的替换。
27.权利要求26所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比i80v、i127v、i171a、i176v、i191v、i228v、i256v、i264a、i268l、i400v、i597v、i610v、i618a、i630l、i642v、i715y、i733v和i744v的替换。
28.权利要求17-27中任一项所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比在一个或多个选自m129、i130、g131、d141、e143、l408、y409、p410、a485、t514和i521的氨基酸位点处的一个或多个修饰。
29.权利要求28所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比在一个或多个选自d141、e143、y409和a485的氨基酸位点处的一个或多个修饰。
30.权利要求29所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比一个或多个选自d141a、e143a、y409v和a485l的替换。
31.权利要求30所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比d141a、e143a、y409v和a485l的替换。
32.权利要求28所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比在一个或多个选自d141、e143、l408、y409、p410、a485、t514和i521的氨基酸位点处的一个或多个修饰。
33.权利要求32所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比一个或多个选自d141a、e143a、l408a、y409a、p410i、a485v、t514s和i521l的替换。
34.权利要求33所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比d141a、e143a、l408a、y409a、p410i、a485v、t514s和i521l的替换。
35.权利要求28所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比一个或多个选自m129l、d141a、e143a、l408a、y409a、p410i、a485v、t514s、i521l的替换或在i130与g131之间d的增添的修饰。
36.权利要求35所述的聚合酶，其包含与seq id no:1相比m129l、d141a、e143a、l408a、y409a、p410i、a485v、t514s和i521l的替换和在i130与g131之间d的增添。
37.权利要求17-36中任一项所述的聚合酶，其包含选自seq id nos:2-7的序列。
38.权利要求37所述的聚合酶，其由选自seq id nos:2-7的序列组成。
39.一种复制l-多核苷酸的方法，其包括以下步骤：将包含(i)所述l-多核苷酸、(ii)l-引物、(iii)l-dntp、(iv)权利要求1-38中任一项所述的聚合酶和(v)缓冲液的混合物温育，从而诱导所述l-聚合酶的复制。
40.权利要求39所述的方法，其中所述l-多核苷酸是dna或rna。
41.权利要求39-40中任一项所述的方法，其中所述混合物包含l-datp、l-dgtp、l-dctp和l-dttp。
42.权利要求39-41中任一项所述的方法，其中所述缓冲液包含50mm tris-hcl，ph7.5，20mm mgcl2，1mm dtt和50mm kcl。
43.权利要求39-42中任一项所述的方法，其中所述温育步骤包括pcr。
44.一种测序l-多核苷酸的方法，其包括以下的循环：
45.权利要求44所述的方法，其中所述循环重复至少3、...
【专利技术属性】
技术研发人员：D·H·金，J·H·钟，B·S·黄，
申请(专利权)人：得克斯奥梅有限公司，
类型：发明
国别省市：
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