一种双氢黄酮类化合物柚皮苷在促进猪肌肉干细胞增殖及分化的应用制造技术

本发明专利技术提供了双氢黄酮类化合物柚皮苷在促进猪肌肉干细胞增殖及分化形成肌管中的应用，其是将柚皮苷添加至含15％胎牛血清、1％双抗的DMEM/F12培养基及含2％马血清、1％双抗的DMEM分化培养基至终浓度70μM，分别在增殖及分化阶段处理猪肌肉干细胞，使用Hoechst 33342染色及免疫荧光染色法分别对增殖阶段细胞数量及分化阶段形成肌管中Myosin的荧光面积、荧光强度及核融合率进行判定。加入柚皮苷处理后的肌肉干细胞的相对增殖倍数及肌管中Myosin荧光面积、荧光强度及核融合率均显著高于空白对照组。采用本方法可以促进猪肌肉干细胞的增殖及分化，为维持细胞干性及培养肉的规模化生产提供新思路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞培养肉领域，具体涉及双氢黄酮类化合物柚皮苷在促进猪肌肉干细胞增殖及分化的应用。

技术介绍

1、肉类一直被视为卓越的蛋白质供应源，备受消费者青睐。然而，随着经济的发展，全球人口高速增长，对蛋白质的需求急剧攀升。传统的畜牧业虽能满足部分需求，但其带来的环境问题如生态破坏和水资源浪费，已使其难以维持可持续性，由此引发了蛋白质供应的巨大缺口。培养肉，作为一项革命性的未来食品生产技术，不仅有望填补这一缺口，还能大幅减少传统畜牧业造成的危害，为未来的食品生产带来更为绿色和可持续的解决方案。

2、肌肉干细胞作为最有潜力的培养肉种子细胞具有修复受损肌肉组织的作用，并能有效分化形成肌管，最后生成肌纤维，表达肌肉特有的肌球蛋白重链。但肌肉干细胞在体外培养过程中面临着增殖和分化能力下降的问题。有研究表明，肌肉干细胞从刚分离到传代3次以后，肌肉干细胞的重要标记物pax7阳性的比例会从100％下降30％～50％，说明在体外密集的大规模扩张条件下维持肌肉干细胞的增殖和分化能力十分困难，这对细胞的体外连续培养非常不利。

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【技术保护点】

1.柚皮苷在体外培养中促进肌肉干细胞增殖和/或促进肌肉干细胞成肌分化中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肌肉干细胞为猪肌肉干细胞。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肌肉干细胞为不晚于P5代的猪肌肉干细胞。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，在肌肉干细胞的体外增殖培养和体外诱导分化阶段分别向增殖培养基和分化培养基中加入柚皮苷。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述增殖培养基为添加重组人成纤维细胞生长因子(bFGF)的基础培养基，所述重组人成纤维细胞生长因子与基础培养基的体积比为1：2000...

【技术特征摘要】

1.柚皮苷在体外培养中促进肌肉干细胞增殖和/或促进肌肉干细胞成肌分化中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肌肉干细胞为猪肌肉干细胞。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肌肉干细胞为不晚于p5代的猪肌肉干细胞。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，在肌肉干细胞的体外增殖培养和体外诱导分化阶段分别向增殖培养基和分化培养基中加入柚皮苷。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述增殖培养基为添加重组人成纤维细胞生长因子(bfgf)的基础培养基，所述重组人成纤维细胞生长因子与基础培养基的体积比为1：2000；所述基础培养基为加入血清以及100x青霉素链霉素双抗的dmem/f12培养基，dmem/f12与血清以及双抗的体积比例为84％：15％：1％。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述分化培养基为向dmem高糖溶液中加入马血清以及双抗，dmem高糖溶液与...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐长波，邓沫儒，周光宏，潘舒羽，李薇，达春妍，梁芯月，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：