胰岛素抵抗状态的治疗和诊断制造技术

本发明专利技术涉及给药有效量的Ｄｉｃｋｋｏｐｆ－５（Ｄｋｋ－５）蛋白治疗涉及胰岛素抵抗的病症，如非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）或肥胖症。本发明专利技术还提供了一种以Ｄｋｋ－５作为检测指标诊断胰岛素抵抗及相关病症的方法，诊断和治疗用试剂盒，以及生产抗Ｄｋｋ－５抗体的杂交瘤和包含Ｄｋｋ－５的制剂。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术提供了一种诊断和治疗疾病的方法，所述疾病涉及胰岛素抵抗，如非胰岛素依赖型或II型糖尿病和其它胰岛素抵抗状态，例如与肥胖症(obesity)和老化相关的胰岛素抵抗状态。本专利技术尤其涉及应用Dkk-5治疗胰岛素抵抗病症。本专利技术还特别涉及到用Dkk-5的水平诊断胰岛素抵抗病症在怀疑患有胰岛素抵抗或相关病症，尤其是非胰岛素依赖型糖尿病的个体中的存在。相关领域的描述胰岛素抵抗定义为对给定剂量胰岛素的生物应答低于预期的生物应答。其与肥胖症普遍相关。确实，肥胖症的病理后果中多数被认为涉及胰岛素抵抗，包括高血压、高血脂和，最显著的，非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)。大多数NIDDM患者是肥胖的，而在NIDDM的发展进程中胰岛素抵抗是非常核心和早期的组成部分(Moller等，New Eng.J.Med.，325938(1991))。研究证明，在胰岛素抵抗病程中产生了受体后(post-receptor)异常，另外在该病的最初阶段胰岛素受体是下调的(Olefsky等，in Diabetes Mellitus，Rifkin andPorte，Jr.，Eds.(Elsevier Science Publishing Co.，Inc.，New York，ed.4，1990)，pp.121-153)。关于作为受体缺陷可能位点的葡萄糖转运系统的数个研究表明，在啮齿类动物和人的胰岛素抵抗状态下，胰岛素敏感的葡萄糖转运体(Glut4)的数量和功能都是不足的(Garvey等，Science，24560(1989)；Sivitz等，Nature，34072(1989)；Berger等，Nature，34070(1989)；Kahn et al.，J.Clin.Invest.，84404(1989)；Charron等，J.Biol.Chem.，2657994(1990)；Dohm等，Am.J.Physio.，260E459(1991)；Sinha等，Diabetes，40472(1991)；Friedman等，J.Clin.Invest.，89701(1992))。胰岛素敏感的葡萄糖转运体的正常集合体(normal pool)的缺陷理论上可以致使个体胰岛素抵抗(Olefsky等，in Diabetes Mellitus，同上)。但是，也有一些研究在人NIDDM中没有显示Glut4的下调，特别是在葡萄糖处理的主要部位肌肉中(Bell，Diabetes，40413(1990)；Pederson等，Diabetes，39865(1990)；Handberget ai.，Diabetologia，33625(1990)；Garvey等，Diabetes，41465(1992))。来自动物模型的体内研究和临床研究的证据提示，胰岛素信号传导通路中的中间物(intermediate)的表达和活性改变、胰岛素刺激葡萄糖转运率的改变、或GLUT4易位(translocation)到质膜的改变都可导致II型糖尿病的胰岛素抵抗(Zierath等，Diabetologia，43821-835(2000))。动物实验的结果表明，肌肉胰岛素信号缺陷改变了整个机体葡萄糖稳态(Saad等，J.Clin.Invest.，901839-1849(1992)；Folli等，J.Clin.Invest.，921787-1794(1993)；Heydrick等，J.Clin.Invest.，911358-1366(1993)；Saad等，J.Clin.Invest.，922065-2072(1993)；Heydrick等，Am.J.Physio.，268E604-612(1995))，胰岛素信号通路级联反应(cascade)中的中间物，包括IR、IRS-1和PI3-激酶的缺陷可导致胰岛素抵抗及II型糖尿病患者骨骼肌葡萄糖转运下降和胰岛素刺激的GLUT4易位减少。在一些研究中观察到IRS-1(Saad等，1992，同上；Saad等，1993，同上；Goodyear等，J.Clin.Invest.，952195-2204(1995))、PI3-激酶(Anai等，Diabetes，4713-23(1998))或GSK-3(Nikoulina等，Diabetes，49263-271(2000))的表达改变，或PKCθ(Chalfant等，Endocrinolog，1412773-2778(2000))，或PTP1B(Dadke等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，274583-589(2000))下降。人们在一些II型糖尿病患者骨骼肌中也发现IR(Arner等，Diabetologi，30437-440(1987)；Maegawa等，Diabetes，44815-819(1991)；Saad等，1992，同上，Saad等，1993，同上，Goodyear等，同上)、IRS-1(Saad等，1992，同上；Saad等，1993，同上；Goodyear等，同上)和Akt(Krook等，Diabetes，471281-1286(1998))的磷酸化作用降低。另外，资料显示PI-3激酶活性降低(Saad等，1992，同上；Heydrick等，1995，同上；Saad等，1993，同上；Goodyear等，同上；Heydrick等，1993，同上；Folli等，Acta Diabetol.，33185-192(1996)；Bjornholm等，Diabetes，46524-527(1997)；Andreelli等，Diabetologia，42358-364(1999)；Kim等，JClin.Invest.，104733-741(1999)；Andreelli F，等，Diabetologia，43356-363(2000)；Krook等，Diabetes，49284-292(2000))和GSK-3(Eldar-Finkelman等，Diabetes，481662-1666(1999))、PKC(Avignon等，Diabetes，451396-1404(1996))和PTP1B(Dadke等，同上)活性增高与II型糖尿病相关。此外，糖尿病动物的骨骼肌中PKC亚型的分布发生变化(Schmitz-Peiffer等，Diabetes，46169-178(1997))，非肥胖型Goto-Kakizaki(GK)糖尿病大鼠的PKCα，PKCβ，PKCε，和PKCδ含量在比目鱼肌的胞膜部分增高，在胞质部分下降(Avignon等，同上)。在有或没有II型糖尿病的胰岛素抵抗患者的骨骼肌中观察到GLUT4异常亚细胞定位(Vogt等，Diabetologia，35456-463(1992)；Garvey等，J.Clin.Invest.，1012377-2386(1998))，提示骨骼肌GLUT4的运输和易位缺陷可能引起胰岛素抵抗。体内和体外研究显示，在一些II型糖尿病患者的骨骼肌中胰岛素刺激的葡萄糖转运率下降(Andreasson等，Acta Physiol.Scand.，142255-260(1991)；Zierath等，DiabetoloQia，37270-277(19本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗哺乳类动物胰岛素抵抗病症的方法，包括给药有此需要的哺乳动物有效量的Ｄｉｃｋｋｏｐｆ－５（Ｄｋｋ－５）。

【技术特征摘要】
US 2001-10-15 60/329,9471.一种治疗哺乳类动物胰岛素抵抗病症的方法，包括给药有此需要的哺乳动物有效量的Dickkopf-5(Dkk-5)。2.权利要求1的方法，其中所述病症为非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)或肥胖症。3.权利要求1或2的方法，其中Dkk-5与图2的SEQ ID NO5有至少约85％的氨基酸序列同一性，或Dkk-5与SEQ ID NO5的第20个残基至第30个残基和第347个残基之间的序列有至少约85％的氨基酸序列同一性。4.权利要求1-3之一的方法，其中Dkk-5包含图2的SEQ ID NO5或包含SEQ ID NO5的第20个残基至第30个残基和第347个残基之间的序列。5.权利要求1-6，8，9或11之一的方法，其中所述Dkk-5包含SEQ IDNO5第25个残基和第347个残基之间的序列。6.权利要求1或2的方法，其中所述Dkk-5是SEQ ID NO5的内部裂解蛋白片段，具有N-末端序列MALFDWTDYEDLK(SEQ ID NO8)，分子量约16kDa；或者是含SEQ ID NO5的Dkk-5和所述内部裂解蛋白片段的混合物；或者是含SEQ ID NO5第20个残基至第30个残基和第347个残基之间的序列的Dkk-5和该内部裂解蛋白片段的混合物。7.权利要求1-6之一的方法，进一步包含给药有效量的胰岛素抵抗治疗制剂。8.权利要求7的方法，其中所述制剂为胰岛素、IGF-1或磺酰脲。9.一种检测哺乳动物胰岛素抵抗病症存在或发作的方法，包括以下步骤(a)检测该哺乳动物的样品中Dickkopf-5(Dkk-5)的量；(b)比较步骤(a)检测到的Dkk-5量和标准品中Dkk-5的量，步骤(a)中检测到的Dkk-5的量下降提示胰岛素抵抗病症。10.权利要求9的方法，其中所述检测用抗Dkk-5抗体进行免疫测定来完成。11.权利要求10的方法，其中所述抗Dkk-5抗体包含标记物。12.权利要求11的方法，其中所述标记物选自荧光标记物、放射性标记物或酶标记物。13.权利要求9-12之一的方法，其中所述胰岛素抵抗病症为非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)或肥胖症。14.权利要求9-13之一的方法，其中所述Dkk-5是包含SEQ ID NO5的Dkk-5；或是包含SEQ ID NO5第20个残基至第30个残基和第347个残基之间的序列的Dkk-5；或是SEQ ID NO5的内部裂解蛋白片段，其具有N-末端序列MALFDWTDYEDLK(SEQ ID NO8)，分子量约16kDa；或是含SEQ ID NO5的Dkk-5和含SEQ ID NO5第20个残基至第30个残基和第347个残基之间的序列的Dkk-5，它们两者的其中之一或它们两者与该裂解产物的混合物。15.一种用于检测胰岛素抵抗病症的存在或发作的诊断试剂盒，该试剂盒包括(a)包含与Dickkopf-5(Dkk-...

【专利技术属性】
技术研发人员：维尼塔I迪尔迈达，蒂莫西A斯图尔特，
申请(专利权)人：杰南技术公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]