【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开涉及岩藻糖基化人乳寡糖(hmo)的生产。特别地,涉及用于生产乳-n-岩藻五糖iii(lnfp-iii)的α-1,3-岩藻糖基转移酶,以及遗传工程细胞,及它们在所述生产中的用途。优选地,本文所述的α-1,3-岩藻糖基转移酶不对用作α-1,3-岩藻糖基转移酶底物的受体寡糖的还原末端进行岩藻糖基化。
技术介绍
1、设计和构建细菌细胞工厂以产生岩藻糖基化人乳寡糖(hmo),特别是更复杂的岩藻糖基化hmo,对于为明天更复杂的产物提供创新和可扩展的解决方案至关重要。
2、复杂的岩藻糖基化hmo的生产已经例如在wo2016/040531中描述,表明α-1,3-岩藻糖基转移酶cafd可以产生lnfp-iii,并且在wo2019/008133中,描述了α-1,3-岩藻糖基转移酶fuct109,其似乎对乳-n-新四糖(lnnt)的葡萄糖(glc)和n-乙酰基葡糖胺(glcnac)部分进行岩藻糖基化,从而潜在地生成含有lnnt、lnfp-iii和lnfp-vi中所有三种的混合物。
3、dumon等人,2004(biotechno
...【技术保护点】
1.一种能够产生一种或多种岩藻糖基化HMO的遗传工程细胞,其包含编码具有α-1,3-岩藻糖基转移酶活性的岩藻糖基转移酶的重组核酸序列,其中所述糖基转移酶选自:
2.根据权利要求1所述的遗传工程细胞,其中所述岩藻糖基转移酶对用于产生一种或多种岩藻糖基化HMO的受体分子的还原末端中的葡萄糖部分具有低活性或无活性。
3.根据权利要求1或2所述的遗传工程细胞,其中由所述细胞产生的一种或多种岩藻糖基化HMO是LNFP-III。
4.根据前述权利要求中任一项所述的遗传工程细胞,其中所述遗传工程细胞包含编码β-1,4-半乳糖基转移酶的重组核酸序列
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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种能够产生一种或多种岩藻糖基化hmo的遗传工程细胞,其包含编码具有α-1,3-岩藻糖基转移酶活性的岩藻糖基转移酶的重组核酸序列,其中所述糖基转移酶选自:
2.根据权利要求1所述的遗传工程细胞,其中所述岩藻糖基转移酶对用于产生一种或多种岩藻糖基化hmo的受体分子的还原末端中的葡萄糖部分具有低活性或无活性。
3.根据权利要求1或2所述的遗传工程细胞,其中由所述细胞产生的一种或多种岩藻糖基化hmo是lnfp-iii。
4.根据前述权利要求中任一项所述的遗传工程细胞,其中所述遗传工程细胞包含编码β-1,4-半乳糖基转移酶的重组核酸序列。
5.根据前述权利要求中任一项所述的遗传工程细胞,其中所述遗传工程细胞还包含编码β-1,3-n-乙酰基葡糖胺基转移酶的重组核酸序列。
6.根据权利要求5所述的遗传工程细胞,其中所述β-1,3-n-乙酰基葡糖胺基转移酶来自脑膜炎奈瑟氏菌(neisseria meningitidis),并且所述β-1,4-半乳糖基转移酶来自幽门螺杆菌(helicobacter pylori)。
7.根据前述权利要求中任一项所述的遗传工程细胞,其中所述细胞包含编码糖基转移酶的重组核酸序列的两个、三个或更多个基因组拷贝和/或质粒携带拷贝,所述糖基转移酶选自具有根据seq id no:1、2或3的氨基酸序列的camp1、parm1和hpull1,或其功能同源物,所述功能同源物的氨基酸序列与seq id no:1、2或3具有至少80%同一性。
8.根据前述权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员:M·帕帕扎基斯,
申请(专利权)人:帝斯曼知识产权资产管理有限公司,
类型:发明
国别省市:
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