生物反应器专用家蚕品种的选育方法技术

本发明专利技术公开了一种生物反应器专用家蚕品种的选育方法，是对点青期的蚕卵用Ｃｏ＃＋［６０］进行辐射诱变处理，用专用人工饲料饲养蚁蚕，筛选突变个体，形成广食性蚕育种素材，对生物反应器专用广食性蚕育种素材导入大蛹基因、ＮＰＶ易感性基因，通过多代选育、纯合，育成广食性宿主型生物反应器专用蚕品种。本发明专利技术所育成的以外源基因表达为目的的生物反应器专用家蚕品种，改变了蚕的食性，通过开发低成本人工饲料，摆脱了蚕对唯一饲料——桑叶的依赖，能以工厂化全年稳定饲养。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及动物或新动物品种的养殖方法，尤其是一种生物反应器专用家蚕品种的选育方法。
技术介绍
生物反应器是近年来国内外生物技术研究的热点，把生命体作为反应器，在常温常压下利用生命体的代谢途径生产传统产业不能生产或传统产业能够生产但造价昂贵的产品，其经济效益和社会效益是无可估量的。用昆虫作为生物反应器表达外源基因产物的优点在于表达产物得率高，能够直接在昆虫体内形成具有生物活性的表达产物，而且对外源基因的环境安全容易控制。家蚕是昆虫中表达外源基因的最理想生物反应器，其理由是(1)用作外源基因表达载体的杆状核型多角体病毒宿主范围窄，具有高度的特异性，只感染家蚕或几个近缘宿主昆虫，对人、畜和其它动物及环境无害；(2)由于家蚕成虫已失去飞翔能力，其繁殖主要由人工交配，无自然迁移能力，自然状态下，种群大小对其本身繁殖和迁移无影响；(3)经过长期的人为驯化，家蚕早已失去野外生存能力，家蚕接触的环境为人为控制的实验室或养蚕室，具有避风、避雨、易消毒等特点；(4)用作生物反应器的家蚕具有世代短、繁殖率高、容易饲养等特点。因此，家蚕作为昆虫生物反应器的研究近年来方兴未艾。家蚕虽然非常适合于昆虫生物反应器，但由于目前生产上养蚕是以获取茧丝为主要目的。即使将家蚕作为生物反应器使用，也是用桑叶饲养，处于一种开放状态。外源基因的表达水平受营养成份、饲育环境包括微生物的影响，同时还受到季节气候的影响，产品难以工厂化全年稳定生产。与此同时，由于国内外还没有以外源基因表达为目的的生物反应器专用家蚕品种，家蚕作为生物反应器的潜力得不到充分发挥。因此，采用特定手段培育专用于昆虫生物反应器的蚕品种，通过改变蚕的食性，开发低成本人工饲料，使蚕摆脱对唯一饲料——桑叶的依赖，实现全年比较经济的工厂化养蚕，是利用家蚕作为生物反应器，促进昆虫重组杆状病毒表达外源基因产业化的至为积极、重要的一步。
技术实现思路
本专利技术提供以外源基因表达为目的的研制生物反应器专用家蚕品种的选育方法，能实现全年工厂化无菌养蚕。本专利技术采用的技术方案如下1)对点青期的蚕卵用Co60进行辐射，辐射剂量为1500～3000伦琴，辐射诱变处理后，利用自行设计的廉价低成本人工饲料饲喂孵化了的蚁蚕，在大群体中筛选食性突变个体，选择能完成世代的个体继代，并逐代适当调整人工饲料配方，使之相互磨合，形成广食性蚕品种的原始育种材料和相对应的低成本人工饲料；2)对原始广食性蚕育种材料进行多代饲养，定向选育，稳定食性后作为生物反应器用蚕品种的原始素材；3)对原始生物反应器专用广食性蚕育种素材导入大蛹基因、NPV易感性状基因，通过多代定向选育、纯合，育成广食性宿主型生物反应器专用蚕品种。本专利技术具有的有益的效果是1)以外源基因表达的生物反应器专用家蚕品种，能以工厂化全年稳定生产；2)通过改变蚕的食性，开发低成本人工饲料，摆脱对唯一饲料——桑叶的依赖。附图说明附图是本专利技术的选育方法流程图。具体实施例方式如附图所示，本专利技术的选育方法1)对点青期的蚕卵用Co60进行辐射，辐射剂量为1500～3000伦琴，辐射诱变处理后，利用自行设计的廉价低成本人工饲料饲喂孵化了的蚁蚕，在大群体中筛选食性突变个体，选择能完成世代的个体继代，逐代适当调整人工饲料配方，使之相互磨合，形成广食性蚕品种的原始育种材料和相对应的低成本人工饲料；2)对原始广食性蚕育种材料进行多代饲养，定向选育，稳定食性后作为生物反应器用蚕品种的原始素材；3)对原始生物反应器专用广食性蚕育种素材导入大蛹、NPV易感性状基因，通过多代定向选育、纯合，育成广食性宿主型生物反应器专用蚕品种。广食性生物反应器专用蚕品种CBB的选育实例实施例1选择个体大的中系蚕品种蚕卵在胚胎发育到点青期用Co60进行辐射，辐射剂量为2000伦琴。用根据家蚕营养生理设计的低成本人工饲料饲喂辐射处理后孵化了的蚁蚕，在群体中筛选食性突变个体，选择能完成世代的个体进行随机交配，继代。在继代过程中适当调整饲料配方，使选育材料蚕与饲料配方相适应，完善低成本人工饲料配方。饲养四个世代后，导入大蛹基因，后代中选择蛹体大的个体进行交配，继而导入NPV易感性状基因，在所产蛾区卵中1/2卵圈的蚕在饲育中接种NPV，选择发病率高的相对应另1/2卵圈的个体进行交配继代，重复选择三个世代后，进行同蛾区和异蛾区交替连续二次高强度选择，使品种性状稳定。从而育成广食性生物反应器专用蚕品种CBB。实施例2日系品种SJ选育除以日系蚕品种蚕卵为原始材料进行Co603000伦琴进行辐射处理外，余同CBB选育方法育成。使用本方法育成的专用于生物反应器家蚕品种，通过摄食广食性低成本人工饲料能实行全年工厂化养蚕，饲以无菌的人工饲料，在无菌饲育室内作为缩主型生物反应器可稳定表达外源基因产物。本文档来自技高网...

【技术保护点】
生物反应器专用家蚕品种的选育方法，其特征在于：１）对点青期的蚕卵用Ｃｏ↑［６０］进行辐射，辐射剂量为１５００～３０００伦琴，辐射诱变处理后，利用自行设计的廉价低成本人工饲养饲喂孵化了的蚁蚕，在大群体中筛选食性突变个体，选择能完成世代的个 体继代，逐代适当调整人工饲料配方，使之相互磨合，形成广食性蚕品种的原始育种材料和相对应的低成本人工饲料；２）对原始广食性蚕育种材料进行多代定向选育，稳定食性后作为生物反应器用蚕品种的原始育种素材；３）对原始生物反应器专用广食性蚕育种 素材导入大蛹基因、ＮＰＶ易感性状基因，通过多代定向选育、纯合，育成广食性宿主型生物反应器专用蚕品种。

【技术特征摘要】
1.生物反应器专用家蚕品种的选育方法，其特征在于1)对点青期的蚕卵用Co60进行辐射，辐射剂量为1500～3000伦琴，辐射诱变处理后，利用自行设计的廉价低成本人工饲料饲喂孵化了的蚁蚕，在大群体中筛选食性突变个体，选择能完成世代的个体继代，逐代适当调整人工饲料配方，使之相互磨合，形...

【专利技术属性】
技术研发人员：计东风，孟智启，陈诗，
申请(专利权)人：浙江省农业科学院，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]