一种定量检测核酸样品的特异性探针、引物、试剂盒和方法技术

本发明专利技术提供了一种探针和引物组合、标准品、检测试剂盒、Real‑time PCR检测方法及其在检测核酸样品中的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物，具体涉及一种用于检测核酸样品的探针和引物组合、标准品、real-time pcr检测试剂盒和检测方法。

技术介绍

1、玉米转化体mn85n-e1是一种抗虫耐草铵膦除草剂的玉米转基因材料（中国专利申请号为2024118864948），它对草地贪夜蛾和玉米螟等鳞翅目害虫具有优异的抗性，对草铵膦具有良好的耐受性，利用该转化体能培育抗虫抗除草剂玉米品种。建立转化体特异性检测方法能为转基因生物的鉴定和监管提供有效的检测手段，为农业转基因生物安全管理提供技术支撑。

2、转化体特异性的检测主要利用普通pcr方法，但其缺点是灵敏度不高，且无法实时监控pcr过程，不能定量。随着分子生物学技术的发展，real-time pcr（实时荧光定量pcr）已广泛应用于转基因检测，与常规pcr技术相比，其具有耗时短、操作简便、特异性好、灵敏度高的特点，过程可实时监控，结果可直接观察，可以进行定量检测。

3、real-time pcr方法可分为染料法和探针法两种。染料法real-time pcr中的荧光染料能与双链dna结合发出荧光，其结合本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.探针和引物组合，其特征在于，所述探针的核苷酸序列为5'-CCCCTACTGCAAGCGCACCCG-3'，所述引物的核苷酸序列为5'-CCCGTGTGGACGCTTGTAA-3'和5'-CCAGATAAGGGAATTAGGGTTCCT-3'。

2.根据权利要求1所述的探针和引物组合，其特征在于，所述探针5’端标记有荧光基团FAM，3’端标记有淬灭基团BHQ1。

3.检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒包括权利要求1-2任一项所述的探针和引物组合以及标准品；

4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于：所述标准品为5个浓度分别为40000拷贝/...

【技术特征摘要】

1.探针和引物组合，其特征在于，所述探针的核苷酸序列为5'-cccctactgcaagcgcacccg-3'，所述引物的核苷酸序列为5'-cccgtgtggacgcttgtaa-3'和5'-ccagataagggaattagggttcct-3'。

2.根据权利要求1所述的探针和引物组合，其特征在于，所述探针5’端标记有荧光基团fam，3’端标记有淬灭基团bhq1。

3.检测试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒包括权利要求1-2任一项所述的探针和引物组合以及标准品；

4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：郦娟，旷乐，高家昊，付诗慧，李弘婧，
申请(专利权)人：莱肯生物科技海南有限公司，
类型：发明
国别省市：