【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种具有耐酸性的内切葡聚糖酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程。
技术介绍
1、内切葡聚糖酶是一类可催化粗纤维的糖苷水解酶，在肥料腐熟、稻壳降解、秸秆循环等领域都有广泛的应用。在酿造业中，白酒生产会产生大量酒糟，作为一种固体废弃物会对环境造成严重的污染。内切葡聚糖酶可以水解酒糟中的粗纤维，帮助酒糟降解与腐熟，从而加速酒糟的循环利用，促进环境保护。然而，酒糟高水分、强酸性的特点会限制内切葡聚糖酶催化活性的发挥，从而影响其催化活性与降解效果。
2、现有报道中已有对内切葡聚糖酶表达量的改造，如苏少峰等通过密码子优化和红霉素筛选的方法得到高拷贝重组菌株(参考文献：苏少锋,萨初拉,刘红葵,等.葡聚糖外切酶和葡聚糖内切酶基因密码子的优化及表达[j].畜牧与饲料科)；廖俊华通过生物信息学分析对内切葡聚糖酶基因ends进行优化，在保留相同酶学性质的同时表达量提高了1.2倍(参考文献：廖俊华.优化设计的内切葡聚糖酶基因ends在毕赤巴斯德酵母中的表达研究[d].四川农业大学,2010.)。但是结合酒糟环境应用需要，目前缺乏对酸...
【技术保护点】
1.一种内切葡聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体为将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的内切葡聚糖酶亲本进行如下任一种突变：
2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述内切葡聚糖酶突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的内切葡聚糖酶亲本的第45位丝氨酸S、第55位苏氨酸T和第59位苏氨酸T均突变为天冬氨酸D得到的，或将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的内切葡聚糖酶亲本的第88位苏氨酸T和第255位色氨酸W突变为组氨酸H得到的。
3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。
4.携带权利要求3所述基因的重组载体
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【技术特征摘要】
1.一种内切葡聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体为将氨基酸序列如seq id no.1所示的内切葡聚糖酶亲本进行如下任一种突变：
2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，所述内切葡聚糖酶突变体是将氨基酸序列如seq id no.1所示的内切葡聚糖酶亲本的第45位丝氨酸s、第55位苏氨酸t和第59位苏氨酸t均突变为天冬氨酸d得到的，或将氨基酸序列如seq id no.1所示的内切葡聚糖酶亲本的第88位苏氨酸t和第255位色氨酸w突变为组氨酸h得到的。
3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。
4.携带权利要求3所述基因的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体是以所述重组载体是以质粒ppicza(alpha)为表达载体，可选地，将所述表达载体的信号肽替换为suc2为表达载体。
6.表达有权利要求1或2所述突变体，或者含有权利要求3所述基因，...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭政，张娟，侯瑞阳，陈坚，堵国成，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：
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