一种提高本氏烟外源蛋白表达量的方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种提高本氏烟外源蛋白表达量的方法。通过设计蛋白酶SBT1.9‑1和蛋白酶SBT1.9‑2瞬时沉默片段，利用同源重组技术构建TRV2::SBT1.9载体，利用农杆菌将TRV2::SBT1.9载体注射至2周龄的本氏烟叶片构建植株，发现将蛋白酶SBT1.9‑1和蛋白酶SBT1.9‑2瞬时沉默后，外源目的蛋白的表达量明显上升，实现了改善本氏烟生物反应器的目的，在生产中具有重大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种提高本氏烟外源蛋白表达量的方法。

技术介绍

1、植物生物反应器是指利用植物细胞或组织等生产具有医药价值或者重要功能作用的疫苗、医用蛋白、工农业用酶、生物可降解塑料、特殊碳水化合物、酯类以及其他次生代谢产物等的方法。

2、目前，国内在一些植物如马铃薯和玉米等高效表达外源基因的技术上还不是很成熟，从植物中提取和纯化表达产物的技术还有待改进。本氏烟(nicotianabenthamiana)是一种常用的植物生物反应器，主要用于外源蛋白的瞬时表达，具有转化效率高、可携带较大目的片段的目的基因等优点。本氏烟也被广泛应用于疫苗生产、药物开发等领域。但本氏烟草生物量也小且生长缓慢，限制了本氏烟草作为生物反正器的可能。中国专利cn115478076b公开了一种提高栽培烟草云87外源蛋白瞬时表达的方法及应用，通过前期处理来解决云87烟草难以注射菌液、蛋白表达量低的缺点；中国专利cn116530385a公开了一种提高本氏烟草外源产物合成效率的方法及应用，通过采用红光和远红外配比的光照环境栽培本氏烟草幼苗，提高底盘烟草的均一性和异源产本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高本氏烟外源蛋白表达量的方法，其特征在于：设计蛋白酶SBT1.9-1和蛋白酶SBT1.9-2瞬时沉默片段，序列如SEQ ID NO.1所示，利用同源重组技术构建TRV2::SBT1.9载体，利用农杆菌将TRV2::SBT1.9载体注射至2周龄的本氏烟叶片得到外源蛋白高表达量的植株。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：构建载体所用引物如下：SBT1.9 F:

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：敲除的蛋白酶SBT1.9氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：编码蛋白酶SBT1.9-1的核酸序列如...

【技术特征摘要】

1.一种提高本氏烟外源蛋白表达量的方法，其特征在于：设计蛋白酶sbt1.9-1和蛋白酶sbt1.9-2瞬时沉默片段，序列如seq id no.1所示，利用同源重组技术构建trv2::sbt1.9载体，利用农杆菌将trv2::sbt1.9载体注射至2周龄的本氏烟叶片得到外源蛋白高表达量的植株。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：构建载体所用引物如下：sbt1.9 f:

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：敲...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭永峰，杨亚仑，高晓明，
申请(专利权)人：中国农业科学院烟草研究所中国烟草总公司青州烟草研究所，
类型：发明
国别省市：