【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体而言，涉及一种atg16l1单克隆抗体及其用途。
技术介绍
1、目前自噬信号通路的关键蛋白已经成为疾病干预，肿瘤治疗的新的候选靶标，已受到越来越多学者的关注，但缺乏自主研发的单克隆抗体，而市售的产品只有兔源的多克隆抗体。很多免疫小鼠的抗原都是天然蛋白质，由于天然的蛋白质存在修饰，而且结构比较复杂（除了线性表位还有构象表位），因此天然蛋白质是优质抗原，但高纯度的天然蛋白质往往很难获取。大部分二抗是天然蛋白做抗原进行筛选得到的。
2、化学合成的多肽抗原是小分子，本身很难具有好的抗原性，只能诱导动物产生很弱的免疫反应，因而与载体蛋白交联是很重要的。载体蛋白含有很多抗原决定基，能够刺激t－帮助细胞，进而诱导 b－细胞反应。用于与多肽交联的载体蛋白有多种，其中常用的是keyhole limpet hemacyanin (klh)，牛血清白蛋白（bovine serum albumin，bsa），卵清蛋白（ovalbumin，ova）和牛甲状腺球蛋白（bovine thyroglobulin，thy)。klh具有更高的抗原性，是为常用的多肽交联载体。bsa也常用来作为多肽载体，但由于bsa经常被用做检测试验的阻断剂而使得该方法生产的抗体在应用上存在着一定的局限性。
3、人工合成多肽只是一个线性序列，针对这个多肽的抗体能否识别天然蛋白质是不确定的，所以在制备抗体之前，多肽的设计很重要。在难以获得蛋白抗原或者有同源蛋白但只有少量序列存在差异，或是特定位点制备修饰性抗体时，可以选择多肽抗原针对家
技术实现思路
1、本专利技术的首要目的是提供一种atg16l1单克隆抗体及其用途，通过设计一段atg16l1多肽序列，将人工合成多肽免疫小鼠后方可筛选到需要的特异性抗体。。
2、为此，本专利技术提供如下技术方案。
3、本专利技术的第一个方面提供了一种特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段的轻链可变区vl的lcdr1-3的氨基酸序列分别如seqid no: 3、4和5所示，且所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区vh的hcdr1-3的氨基酸序列分别如seqid no: 6、7和8所示。
4、作为本专利技术的一个优选实施例，其中所述vl包含与seq idno: 1具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，并且所述vh包含与seq id no: 2具有至少80%序列同一性的氨基酸序列。
5、作为本专利技术的一个优选实施例，其轻链恒定区cl包含与 seq id no: 9具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，并且重链恒定区ch包含与seq id no: 10具有至少80%序列同一性的氨基酸序列。
6、作为本专利技术的一个优选实施例，其中所述抗原结合片段选自双链抗体；所述抗体为鼠源单克隆抗体，其轻链包含与seq id no: 11具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，并且重链包含与seq id no: 12具有至少80%序列同一性的氨基酸序列。
7、本专利技术的第二个方面提供了一种核酸，其包含编码根据如前所述的特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列。
8、本专利技术的第三个方面提供了一种载体，其包含权如前所述的核酸。
9、本专利技术的第四个方面提供了一种宿主细胞，其包含如前所述的核酸或载体。
10、作为本专利技术的一个优选实施例，其中所述宿主细胞为哺乳动物细胞，所述哺乳动物细胞包括但不限于293f细胞、cho细胞。
11、本专利技术的第五个方面提供了一种制备如前所述的抗体或其抗原结合片段的方法，包括：在使得所述的抗体、其抗原结合片段表达的条件下，培养根据如前所述的宿主细胞。
12、本专利技术的第六个方面提供了一种检测试剂，其包含根据如前所述的特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段，
13、其中所述的特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段通过荧光标记后作为特异性识别atg16l1的流式荧光检测试剂组分。
14、本专利技术的第七个方面提供了一种如前所述的特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段、或检测试剂在制备用于检测样品中atg16l1含量的产品中的用途。
15、本专利技术的第八个方面提供了一种如前所述的特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段、核酸、载体、宿主细胞在制备检测atg16l1的产品中的应用。
16、借由上述技术方案，本专利技术至少具有下列优点：
17、本专利技术提供了一种抗atg16l1的单克隆抗体，避免了天然样本中的hama反应和fcr反应导致的背景高的问题。本专利技术所提供的抗体或其抗原结合片段具有高亲和力、高特异性的特点。本专利技术解决了目前市场上没有atg16l1检测项目抗体原料的问题。本专利技术所公开的抗体具有较高的灵敏度和特异性。
18、在筛选抗体时，本专利技术选用多种天然细胞抗原，对抗体特异性检测进行比较。经多轮筛选，得到对atg16l1特异性较好的抗体。在动物免疫过程中，采用皮下多次、多点注射，提高了最终动物血清的效价，提升了阳性克隆率。
19、上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本专利技术的较佳实施例详细说明如后。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种特异性结合ATG16L1的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段的轻链可变区VL的LCDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO: 3、4和5所示，且所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区VH的HCDR1-3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO: 6、7和8所示。
2.根据权利要求1所述的特异性结合ATG16L1的抗体或其抗原结合片段，其中所述VL包含与SEQ IDNO: 1具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，并且所述VH包含与SEQ ID NO: 2具有至少80%序列同一性的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的特异性结合ATG16L1的抗体或其抗原结合片段，其轻链恒定区CL包含与 SEQ ID NO: 9具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，并且重链恒定区CH包含与SEQ ID NO: 10具有至少80%序列同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1或2所述的特异性结合ATG16L1的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段选自双链抗体；所述抗体为鼠源单克隆抗体，其轻链包含与SEQ ID NO: 11具有至少80%序
5.核酸，其包含编码根据权利要求1-4中任一项所述的特异性结合ATG16L1的抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列。
6.载体，其包含权利要求5所述的核酸。
7.宿主细胞，其包含权利要求5所述的核酸或权利要求6所述的载体。
8.根据权利要求7所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为哺乳动物细胞，所述哺乳动物细胞包括但不限于293F细胞、CHO细胞。
9.制备权利要求1-4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段的方法，包括：在使得所述的抗体、其抗原结合片段表达的条件下，培养根据权利要求7或8所述的宿主细胞。
10.检测试剂，其包含根据权利要求1-4中任一项所述的特异性结合ATG16L1的抗体或其抗原结合片段，
11.权利要求1-4中任一项所述的特异性结合ATG16L1的抗体或其抗原结合片段、或权利要求10所述的检测试剂在制备用于检测样品中ATG16L1含量的产品中的用途。
12.权利要求1-4中任一项所述的特异性结合ATG16L1的抗体或其抗原结合片段、权利要求5所述的核酸、权利要求6所述的载体、权利要求7或8所述的宿主细胞在制备检测ATG16L1的产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段的轻链可变区vl的lcdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no: 3、4和5所示，且所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区vh的hcdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no: 6、7和8所示。
2.根据权利要求1所述的特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段，其中所述vl包含与seq idno: 1具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，并且所述vh包含与seq id no: 2具有至少80%序列同一性的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段，其轻链恒定区cl包含与 seq id no: 9具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，并且重链恒定区ch包含与seq id no: 10具有至少80%序列同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1或2所述的特异性结合atg16l1的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗原结合片段选自双链抗体；所述抗体为鼠源单克隆抗体，其轻链包含与seq id no: 11具有至少80%序列同一性的氨基酸序列，并且重链包含与seq id no: 12具有至少80%序列同一...
【专利技术属性】
技术研发人员：林佳丽，印夏莲，冯雅琦，王飞，王赛雅，
申请(专利权)人：江苏华创誉通医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。