本发明专利技术涉及中药成分检测技术领域，具体涉及一测多评法测定太子参中7种环肽成分含量的方法。所述方法包括：（1）取7种环肽成分对照品，加甲醇溶解，得到对照品溶液；（2）取太子参待测样品，加甲醇溶液超声提取，滤过，取续滤液，干燥后得到的残渣加甲醇溶液溶解，滤过，取续滤液，得到供试品溶液；（3）将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，以太子参环肽B为内参物，根据相对校正因子f<subgt;s/i</subgt;计算待测环肽成分含量；流动相为：乙腈（A）；水、0.1%磷酸水溶液、0.1%甲酸水溶液或20mM乙酸铵水溶液中的任意一种（B）。本发明专利技术的方法耐用性良好，步骤简单且准确度高，为太子参的质量控制提供了依据。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药成分检测，具体涉及一测多评法测定太子参中7种环肽成分含量的方法。
技术介绍
1、太子参，又名孩儿参，为石竹科植物孩儿参的块根，具有补脾益肺、益气生津的作用，临床上用于脾胃虚弱、食欲不振。太子参主要含有多糖、环肽、挥发油、生物碱、皂苷、酚类等成分，具有抑制酪氨酸酶、免疫调节、降血糖、抗炎、抗癌、保护细胞、抑制酪氨等药理作用。
2、太子参被收载于2020版《中国药典》，但仅有定性的真伪鉴别，无合格优劣的含量测定指标。环肽成分被认为是太子参特征成分，也是主要活性成分之一，其种类多达15种，但不同产地各环肽成分含量有较大差异，仅以单一环肽成分难以全面的评价太子参的质量现状。
3、一测多评法(quantitative analysis of multicomponents by single marker，qams)是指利用中药有效成分内在的函数关系和比例关系，只测定其中的一个成分(对照品易于得到)，来实现多个成分(对照品难以得到或供应)的同步测定，是适合中药特点的多指标质量评价模式。在对照品不足的情况下，利用相对校正因子(relative correctionfactor，rcf)对药材进行质量控制是方便、快速、廉价的，其方法将会是中药多组分同步定量的发展方向。
4、目前，用一测多评法评价中药材质量的相关文献较少，而用一测多评法同时测定太子参中多种成分的含量未见报道。
5、因此，开发一种能解决上述技术问题的一测多评法测定太子参中7种环肽成分含量的方法是非常必要的。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是克服现有技术的不足而提供一种一测多评法测定太子参中7种环肽成分含量的方法，该方法以太子参环肽b为内参物，能够快速检测太子参中的太子参环肽a、太子参环肽甲、太子参环肽乙、太子参环肽丁、太子参环肽戊和太子参环肽庚的含量，线性相关系数高，精密度、重复性和稳定性好，加样回收率效果好，耐用性良好，步骤简单且准确度高，为太子参的质量控制提供了依据。
2、本专利技术是通过以下技术方案予以实现的：
3、一测多评法测定太子参中7种环肽成分含量的方法，包括如下步骤：
4、（1）制备对照品溶液：取太子参环肽a、太子参环肽b、太子参环肽甲、太子参环肽乙、太子参环肽丁、太子参环肽戊和太子参环肽庚7种环肽成分对照品，加甲醇溶解，得到对照品溶液；
5、（2）制备供试品溶液：取太子参待测样品，加甲醇溶液超声提取，滤过，取续滤液，干燥后得到的残渣加甲醇溶液溶解，滤过，取续滤液，得到供试品溶液；
6、（3）将对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，以太子参环肽b为内参物，根据相对校正因子fs/i计算其他6种待测环肽成分的含量；
7、步骤（3）中所述高效液相色谱仪采用的流动相为：a相，乙腈；b相，水、0.1%磷酸水溶液、0.1%甲酸水溶液或20mm乙酸铵水溶液中的任意一种，即流动相选用如下任意一种：①乙腈(a)-水(b)；②乙腈(a)-0.1%磷酸水溶液(b)；③乙腈（a）-0.1%甲酸水溶液（b）；④乙腈-20mm乙酸铵水溶液。
8、在本专利技术的一些实施例中，步骤（1）中所述对照品溶液中7种环肽成分对照品的浓度均为10μg/ml-300μg/l。
9、本专利技术的对照品溶液制备过程中，可以先制备单一对照品溶液再进行混合，也可以直接制备对照品溶液，优选前者。
10、在本专利技术优选的一些实施例中，对照品溶液的制备包括：取太子参环肽a、太子参环肽b、太子参环肽甲、太子参环肽乙、太子参环肽丁、太子参环肽戊和太子参环肽庚对照品，分别加甲醇溶解并稀释得到浓度均为0.3mg/ml-3mg/ml的单一对照品溶液；将单一对照品溶液置于量瓶中，加甲醇溶液稀释，得到浓度均为10μg/ml-300μg/ml的对照品溶液。
11、在本专利技术的一些实施例中，步骤（2）还包括以下条件中的至少一种：
12、ii1)所述太子参待测样品与甲醇溶液的用量比为2-5g：5-10ml；
13、ii2)所述超声提取采用的甲醇溶液的体积百分浓度为60%-100%；
14、ii3)所述超声提取的时间为0.5h-1.5h。
15、本专利技术步骤（3）中用高效液相色谱仪分别测定供试品溶液和对照品溶液中太子参环肽b的峰面积，使用外标一点法或工作曲线法计算太子参环肽b含量。
16、在本专利技术的一些实施例中，步骤（3）中所述高效液相色谱仪采用的洗脱方式为梯度洗脱，具体包括以下任意一种：
17、①0-5min，20%a；5-15min，20%→40%a；15-30min，40%a；30-36min，40%→80%a；36-55min，80%a；55-56min，80%→20%a；
18、②0-5min，2%→35%a；5-20min，35%→45% a；20-25min，45%→55% a；25-30min，55%→80%a，30-40min，80%a；
19、③0-5min，30%a；5-60min，30%→45%a；60-61min，45%→80%a；61-70min，80%a；
20、④0-15min，20%→30%a；15-35min，30%→40%a；35-45min，40%a；45-55min，40%→80%a；55-65min，80%a。
21、在本专利技术的一些实施例中，步骤（3）中所述高效液相色谱仪的测试条件包括：
22、色谱柱：选择5μm填料尺寸的色谱柱；
23、流速：0.8-1.2ml/min；
24、柱温：25-35℃；
25、进样量：2-25μl；
26、检测波长：203nm-220nm。
27、在本专利技术的一些实施例中，步骤（3）中所述高效液相色谱仪的测试条件包括：
28、色谱柱：ymc triart c18；
29、流动相：a相，乙腈；b相，水；
30、梯度洗脱程序：0-5min，20%a；5-15min，20%→40%a；15-30min，40%a；30-36min，40%→80%a；36-55min，80%a；55-56min，80%→20%a；
31、流速：0.8-1.2ml/min；
32、柱温：25-35℃；
33、进样量：5-25μl；
34、检测波长：203-220nm。
35、本专利技术采用相对保留时间和相对校正因子分别确定和计算样品中太子参环肽a、太子参环肽甲、太子参环肽乙、太子参环肽丁、太子参环肽戊和太子参环肽庚的峰位置和含量。
36、在本专利技术的一些实施例中，太子参环肽a、太子参环肽甲、太子参环肽乙、太子参环肽丁、太子参环肽戊和太子参环肽庚相对于太子参环肽b的相对保留时间分别为1.07-1.38，0.61-0.87，0.70本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一测多评法测定太子参中7种环肽成分含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述对照品溶液中7种环肽成分对照品的浓度均为10μg/mL-300μg/mL。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）还包括以下条件中的至少一种：
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中所述高效液相色谱仪的测试条件包括：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中所述高效液相色谱仪的测试条件包括：
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，太子参环肽A、太子参环肽甲、太子参环肽乙、太子参环肽丁、太子参环肽戊和太子参环肽庚相对于太子参环肽B的相对保留时间分别为1.07-1.38，0.61-0.87，0.70-0.99，0.87-1.23，1.25-1.74，1.14-1.53。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中所述相对校正因子fs/i采用多点校正法计算，计算方式如下：
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，太子参环肽A、太子参环肽甲、太子参环肽乙、太子参环肽丁、太子参环肽戊和太子参环肽庚相对于太子参环肽B的相对校正因子fs/i分别为1.11-1.62，0.82-1.20，0.73-1.18，0.78-1.34，0.81-1.35，0.58-1.25。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）所述待测环肽成分的含量的计算方式如下：
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【技术特征摘要】
1.一测多评法测定太子参中7种环肽成分含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中所述对照品溶液中7种环肽成分对照品的浓度均为10μg/ml-300μg/ml。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）还包括以下条件中的至少一种：
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中所述高效液相色谱仪的测试条件包括：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中所述高效液相色谱仪的测试条件包括：
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，太子参环肽a、太子参环肽甲、太子参环肽乙、太子参环肽丁、太子参环肽戊和太子参环肽庚相对于太子参环肽b...
【专利技术属性】
技术研发人员：李诒光，熊艳霞，邵坚，赵晗宇，杨晓阳，童永月，
申请(专利权)人：江中药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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