【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种高效合成2’-岩藻糖基乳糖的基因工程菌及其构建方法与应用,属于生物。
技术介绍
1、人乳寡糖(human milk oligosaccharides,hmos)是母乳中含量仅次于乳糖和脂类的第三大成分,是母乳区别于牛乳奶粉的主要成分之一。hmos由葡萄糖、d-半乳糖、n-乙酰葡萄糖胺(n-acetylglucosamine,glcnac)、l-岩藻糖和n-乙酰神经氨酸(n-acetylneuraminicacid,neu5ac)5种结构单元组成,根据单糖结构单元的不同空间构型、糖基序列、链长等,可以将hmos分为三类,中性岩藻糖基乳糖、酸性唾液酸乳糖和中性非岩藻糖基化乳糖,其中岩藻糖基化hmos大约占总量的50%。2’-岩藻糖基乳糖(2’-fucosyllactose,2’-fl)是目前研究最为广泛的一种岩藻糖基乳糖,2023年10月,国家卫生健康委发布公告,正式批准2’-岩藻糖基乳糖作为食品营养强化剂,可应用于婴幼儿配方奶粉、调制乳粉(儿童用),以及特殊医学婴儿食品,具有广阔的市场前景。
2、近年来,微生
...【技术保护点】
1.一种高效合成2′-岩藻糖基乳糖的基因工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述大肠杆菌为大肠杆菌K12DH1。
3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述UDP-葡萄糖脂质载体转移酶编码基因wcaJ的Gene ID为946583,所述β-半乳糖苷酶编码基因lacZ的Gene ID为945006,所述α-半乳糖苷酶编码基因melA的Gene ID为948636,所述β-硫代半乳糖苷转乙酰基酶编码基因lacA的Gene ID为945674,所述N-乙酰神经氨酸分解相关基因簇nanKE
...【技术特征摘要】
1.一种高效合成2′-岩藻糖基乳糖的基因工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述大肠杆菌为大肠杆菌k12dh1。
3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述udp-葡萄糖脂质载体转移酶编码基因wcaj的gene id为946583,所述β-半乳糖苷酶编码基因lacz的gene id为945006,所述α-半乳糖苷酶编码基因mela的gene id为948636,所述β-硫代半乳糖苷转乙酰基酶编码基因laca的gene id为945674,所述n-乙酰神经氨酸分解相关基因簇nanketa的nank、nane、nant和nana基因的gene id分别为947757、947745、947740和947742,所述葡聚糖葡糖基转移酶编码基因mdoh的gene id为945624,所述葡萄糖激酶编码基因glk的gene id为946858,所述丙酮酸氧化酶编码基因poxb的gene id为946132。
4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述岩藻糖模块基因包括磷酸甘露糖变位酶编码基因manb、甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶编码基因manc、gdp-甘露糖-6-脱氢酶编码基因gmd和gdp-岩藻糖合成酶编码基因fcl;所述的磷酸甘露糖变位酶编码基因manb、甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶编码基因manc、gdp-甘露糖-6-脱氢酶编码基因gmd和gdp-岩藻糖合成酶编码基因fcl的gene id分别为946574、946580、946562和946563。
5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述糖基转移酶模块基因包括α1,2-岩藻糖基转移酶编码基因wbgl;所述α1,2-岩藻糖基转移酶编码基因wbgl来源于大肠杆菌o126;所述的α1,2-岩藻糖基转移酶的genebank登录号为adn43847.1。
6.根据权利要求1或4~5中任意一项所述的构建方法,其特征在于,所述的整...
【专利技术属性】
技术研发人员:牛欢青,冷静,应汉杰,杨晟,蒋宇,孙兵兵,杨俊杰,杨思琪,李梦婷,柳东,陈勇,
申请(专利权)人:南京工业大学,
类型:发明
国别省市:
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