【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于糖类物质合成，涉及一种酶法合成血型抗原nor1五糖的方法。
技术介绍
1、血型抗原nor1属于p1pk血型抗原家族，他们以糖脂的形式存在于人血红细胞以及其他细胞，糖链末端都具有galα1-4结构。由于血型抗原nor1在生物体内的稀少性，以提取的方式获取该血型抗原难度性较大。对于化学合成来说，由于nor1本身固有的活性相似的多羟基结构，在合成过程中需要繁琐的保护以及脱保护步骤来保证区域、立体选择性，导致其反应步骤多、总体收率低。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种酶法合成血型抗原nor1五糖的方法，利用糖基转移酶的底物特异性原理，通过nh2与nhac的互换，实现血型抗原nor1的合成。
2、为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种酶法合成血型抗原nor1五糖的方法，包括：利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1-4糖苷键偶联到乳糖或其修饰物上形成含有pk抗原的三糖；“一锅多酶”体系将三氟乙酰氨基半乳糖以β1-4糖苷键偶联到含有pk抗原的三糖上形成四糖化合...
【技术保护点】
1.一种酶法合成血型抗原NOR1五糖的方法，其特征在于，包括：利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1-4糖苷键偶联到乳糖或其修饰物上形成含有Pk抗原的三糖；“一锅多酶”体系将三氟乙酰氨基半乳糖以β1-4糖苷键偶联到含有Pk抗原的三糖上形成四糖化合物P-TFA；碱性条件下脱去三氟乙酰氨基半乳糖上的TFA基团，形成四糖化合物P-NH2；利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1-4糖苷键偶联到四糖化合物P-NH2上形成五糖化合物NOR1-NH2；将五糖化合物NOR1-NH2上的氨基变为乙酰氨基，形成五糖化合物NOR1；其中：
2.根据权利要求1所述的酶法合成血型抗原NOR...
【技术特征摘要】
1.一种酶法合成血型抗原nor1五糖的方法，其特征在于，包括：利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1-4糖苷键偶联到乳糖或其修饰物上形成含有pk抗原的三糖；“一锅多酶”体系将三氟乙酰氨基半乳糖以β1-4糖苷键偶联到含有pk抗原的三糖上形成四糖化合物p-tfa；碱性条件下脱去三氟乙酰氨基半乳糖上的tfa基团，形成四糖化合物p-nh2；利用“一锅多酶”体系将半乳糖以α1-4糖苷键偶联到四糖化合物p-nh2上形成五糖化合物nor1-nh2；将五糖化合物nor1-nh2上的氨基变为乙酰氨基，形成五糖化合物nor1；其中：
2.根据权利要求1所述的酶法合成血型抗原nor1五糖的方法，其特征在于，三糖的合成方法为：将乳糖或其修饰物与1.0-3.0当量半乳糖、1.2-4.0当量腺嘌呤核苷三磷酸、1.2-4.0当量尿嘧啶核苷三磷酸、5-150mm mgcl2、100-600 mm ph6-8的tris-hcl缓冲液配制水溶液，将反应体系ph调7.0-8.0之间，然后添加半乳糖激酶和udp-糖焦磷酸化酶，反应一小时后煮沸灭活，加入α1-4半乳糖基转移酶，反应时间为2小时，待反应完全后，纯化即可得到含有pk抗原的三糖化合物，反应路线如式（1）所示：
3.根据权利要求1所述的酶法合成血型抗原nor1五糖的方法，其特征在于，四糖的合成方法为：将含有pk抗原的三糖与1.0-3.0当量三氟乙酰氨基半乳糖、1.2-4.0当量腺嘌呤核苷三磷酸、1.2-4.0当量尿嘧啶核苷三磷酸、5-150mm mgcl2、100-600 mm ph6-8的tris-hcl缓冲液配制水溶液，将反应体系ph调6.0-7.0之间，然后添加n-乙酰氨基葡萄糖激酶和n-乙酰葡糖胺-1-p尿苷转移酶，反应一小时后加入β-1,3-n-乙酰半乳糖胺转移酶，反应时间为48小时，待反应完全后，纯化即可得到四糖化合物p-tfa；反应路线如式（2）所示：
4.根据权利要求3所述的酶法合成血型...
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