【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及血红蛋白测定，特别涉及一种多模式测定血红蛋白洗脱液及其测定方法。
技术介绍
1、血红蛋白类、其中作为血红蛋白与葡萄糖结合而得到的糖化蛋白的糖化血红蛋白(hba1c)反映过去1～2个月间的平均血糖水平，因此，广泛用于包括糖尿病、代谢综合征在内的生活习惯病的检查和血糖管理等。因此，要求容易且高精度地测定hba1c等血红蛋白类的方法。
2、现有技术中，作为hba1c的测定方法，有高效液相色谱(hplc)法、免疫法、酶法、电泳法等。其中，作为hba1c的标准测定法，在临床检查领域中多采用hplc法。作为使用hplc法来对血红蛋白类进行分离、测定的方法，普遍的是使用阳离子基团色谱柱作为固定相，磷酸系、琥珀酸系缓冲液作为洗脱液来对试样中的血红蛋白类进行分析，通常能有效将血红蛋白hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c和hba0分离、测定。若分离、测定除上述以外的血红蛋白类，例如hba2、hbe、hbd、hbs和hbc，则需要更换不同的色谱柱和洗脱液，使用过程和操作上非常耗时和不便捷，这不仅效率低下，也影响了测定的准确性和重复性，例如伯乐、爱科来等。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种多模式测定血红蛋白洗脱液及其测定方法，本专利技术无需更换色谱柱固定相、流动相前提下，实现一种洗脱液对多种血红蛋白分离、测定模式。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供一种多模式测定血红蛋白洗脱液，所述洗脱液包括用于测定血红蛋白的洗脱液a、
3、所述洗脱液a的原料包括柠檬酸一水合物0.08wt％－0.12wt％、柠檬酸三碱金属盐水合物0.40wt％－0.50wt％、高氯酸碱金属盐0.3wt％－0.5wt％和氢氧化钠0.01wt％－0.04wt％；
4、所述洗脱液b的原料包括柠檬酸一水合物0.01wt％－0.08wt％、柠檬酸三碱金属盐水合物0.50wt％－0.60wt％、高氯酸碱金属盐1.0wt％－2.0wt％和氢氧化钠0.02wt％－0.08wt％；
5、所述洗脱液c的原料包括柠檬酸一水合物0.001wt％－0.01wt％、柠檬酸三碱金属盐水合物0.50wt％－0.60wt％、高氯酸碱金属盐0.05wt％－0.15wt％和氢氧化钠0.02wt％－0.08wt％；
6、所述洗脱液e由洗脱液a和洗脱液c混合而成，其重量比例为0.4－1.0；
7、所述洗脱液f由洗脱液b和洗脱液c混合而成，其重量比例为0.1至0.8；
8、所述洗脱液g由洗脱液c和洗脱液a混合而成，其重量比例为0.25至0.5。
9、优选地，所述洗脱液a的渗透压为100mosm-200mosm，ph值为5.0-6.0，电导率为8.2sm/cm-8.6sm/cm；
10、所述洗脱液b的渗透压为500mosm-700mosm，ph值为6.0-7.0，电导率为25sm/cm-35sm/cm；
11、所述洗脱液c的渗透压为10mosm-200mosm，ph值为6.0-7.0，电导率为3.0sm/cm至6.0sm/cm。
12、优选地，所述血红蛋白选自hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0、hba2、hbe、hbd、hbs和hbc中的一种或多种。
13、本专利技术还提供一种使用所述多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，包括如下步骤：
14、步骤x1：根据需要测定的血红蛋白类型，选择相应的洗脱液或洗脱液组合、测定模式；
15、步骤x2：在高压送液泵内输入填充剂，并使用高压送液泵将选定的洗脱液或洗脱液组合输送至色谱柱中；
16、步骤x3：在色谱柱中分离测定血红蛋白；
17、优选地，所述填充剂为甲基丙烯酸酯共聚物，用于连接高压送液泵与洗脱液，并对血红蛋白进行分离测定；所述色谱柱为阳离子交换基团为磺基、羧基和磷酸基中的一种或多种。
18、优选地，所述测定模式包括快速模式、快速变异模式、变异测定模式、地贫模式；
19、其中，快速模式用于对hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0类血红蛋白进行分离测定；
20、快速变异模式用于对hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0类血红蛋白和突变血红蛋白类v－win进行分离测定，其中突变血红蛋白类v－win为hbe、hbd、hbs和hbc的总称；
21、变异模式用于对hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0类血红蛋白和hbe、hbd、hbs和hbc进行分离测定；
22、地贫模式用于对hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0、hba2、hbe、hbd、hbs和hbc进行分离测定。
23、优选地，在快速模式中的具备步骤为：
24、s1：使用高压送液泵，将洗脱液a送至分离色谱柱中，流速为2.0ml/min，送液时间为25s；
25、s2：使用高压送液泵，将洗脱液b送至分离色谱柱中，流速为2.0ml/min，送液时间为10s；
26、s3：使用高压送液泵，将洗脱液g送至分离色谱柱中，通过高频电磁阀进行持续切换混合送液，流速1.8ml/min，时间为20s。
27、优选地，，在快速变异模式中的具体步骤为：
28、s4：使用高压送液泵，将洗脱液a送至分离色谱柱中，流速为1.8ml/min，送液时间为30s；
29、s5：使用高压送液泵，将洗脱液c送至分离色谱柱中，流速为1.8ml/min，送液时间为25s；
30、s6：使用高压送液泵，将洗脱液b送至分离色谱柱中，流速为1.8ml/min，送液时间为15s；
31、s7：使用高压送液泵，将洗脱液g送至分离色谱柱中，通过高频电磁阀进行持续切换混合送液，流速1.8ml/min，时间为30s。
32、优选地，在变异模式中的具体步骤为：
33、s8：使用高压送液泵，将洗脱液a送至分离色谱柱中：，流速为1.8ml/min，送液时间为35s；
34、s9：使用高压送液泵，将洗脱液c送至分离色谱柱中，流速为1.8ml/min，送液时间为45s；
35、s10：使用高压送液泵，将洗脱液a送至分离色谱柱中，流速为1.8ml/min，送液时间为10s.
36、s11：使用高压送液泵，将洗脱液c送至分离色谱柱中，流速为1.8ml/min，送液时间为10s；
37、s12：使用高压送液泵，将洗脱液b送至分离色谱柱中，流速为1.8ml/min，送液时间为10s；
38、s13：使用高压送液泵，将洗脱液g送至分离色谱柱中，通过高频电磁阀进行持续切换混合送液，流速1.8ml/min，时间为30s。
3本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种多模式测定血红蛋白洗脱液，其特征在于，所述洗脱液包括用于测定血红蛋白的洗脱液A、洗脱液B、洗脱液C、洗脱液E、洗脱液F、洗脱液G；
2.根据权利要求1所述的多模式测定血红蛋白洗脱液，其特征在于，所述洗脱液A的渗透压为100mOsm-200mOsm，pH值为5.0-6.0，电导率为8.2sm/cm-8.6sm/cm；
3.根据权利要求1所述的多模式测定血红蛋白洗脱液，其特征在于，所述血红蛋白选自HbA1a、HbA1b、HbF、L－A1c、HbA1c、HbA0、HbA2、HbE、HbD、HbS和HbC中的一种或多种。
4.一种使用如权利要求1至3任一项所述多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，所述填充剂为甲基丙烯酸酯共聚物，用于连接高压送液泵与洗脱液，并对血红蛋白进行分离测定；所述色谱柱为阳离子交换基团为磺基、羧基和磷酸基中的一种或多种。
6.根据权利要求4所述的多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，所述测定模
7.根据权利要求6所述的多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，在快速模式中的具备步骤为：
8.根据权利要求6所述的多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，在快速变异模式中的具体步骤为：
9.根据权利要求6所述的多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，在变异模式中的具体步骤为：
10.根据权利要求6所述的多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，在地贫模式中的具体步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种多模式测定血红蛋白洗脱液，其特征在于，所述洗脱液包括用于测定血红蛋白的洗脱液a、洗脱液b、洗脱液c、洗脱液e、洗脱液f、洗脱液g；
2.根据权利要求1所述的多模式测定血红蛋白洗脱液，其特征在于，所述洗脱液a的渗透压为100mosm-200mosm，ph值为5.0-6.0，电导率为8.2sm/cm-8.6sm/cm；
3.根据权利要求1所述的多模式测定血红蛋白洗脱液，其特征在于，所述血红蛋白选自hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0、hba2、hbe、hbd、hbs和hbc中的一种或多种。
4.一种使用如权利要求1至3任一项所述多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的多模式测定血红蛋白洗脱液的测定方法，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：冯永林，杨志刚，张继明，
申请(专利权)人：深圳市雷诺华科技实业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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