【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于体外卵母细胞成熟和受精领域。
技术介绍
1、生殖衰老的特点是由于生殖系统和其他系统的损伤增加而导致的与年龄相关的生育能力丧失。卵母细胞以与年龄相关的方式积累损伤，并恶化到不能够受精、不能成熟或不能为早期胚胎发生生成合适环境的程度。在女性人类中，这在其他器官和组织开始衰老之前的相对较早的年龄发生。从20世纪70年代，美国(和其他国家)的平均生育年龄从21岁上升到超过28岁，更多的女性在40多岁生育孩子(cdc/nchs数据)。这种全球范围内的上升在极短时间段内发生，导致女性生育率整体下降(1960年在美国每名女性生育3.5个孩子，而现在是1.8个)，并且非整倍体相关综合征、不孕症和不孕相关综合征(如原发性卵巢功能不全，poi)的发生率上升。例如，在2003年至2012年间，瑞典记录的流产率从每10万例中40例上升到73例，并且在1997年至2009年间，美国记录的ivf病例数几乎两倍增加。因此，了解生殖衰老的潜在机制以提高衰老的卵母细胞的存活率并为全世界数百万患者带来为人父母的希望至关重要。
2、卵母细胞衰老是多...
【技术保护点】
1.一种细胞培养基，其包括黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)和至少一种组蛋白乙酰转移酶(HAT)抑制剂或逆转录酶(RT)抑制剂。
2.根据权利要求1所述的培养基，其中所述培养基是人类卵母细胞体外成熟(IVM)培养基，其包括至少HAT或RT抑制剂。
3.根据权利要求1或2所述的培养基，其中所述HAT选自E1A相关蛋白p300(p300)、环磷酸腺苷效应元件结合蛋白结合蛋白(CREBBP/CBP)、组蛋白乙酰转移酶KAT5(KAT5/Tip60)、KAT6A和N-乙酰转移酶10(NAT10)。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种细胞培养基，其包括黄体生成素(lh)、促卵泡激素(fsh)和至少一种组蛋白乙酰转移酶(hat)抑制剂或逆转录酶(rt)抑制剂。
2.根据权利要求1所述的培养基，其中所述培养基是人类卵母细胞体外成熟(ivm)培养基，其包括至少hat或rt抑制剂。
3.根据权利要求1或2所述的培养基，其中所述hat选自e1a相关蛋白p300(p300)、环磷酸腺苷效应元件结合蛋白结合蛋白(crebbp/cbp)、组蛋白乙酰转移酶kat5(kat5/tip60)、kat6a和n-乙酰转移酶10(nat10)。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的培养基，其中所述hat抑制剂不是p300/cbp相关因子(pcaf/kat2b)抑制剂。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的培养基，其中所述hat抑制剂选自：姜黄素、山竹子素、亚精胺基辅酶a(spd-coa)、lys-coa、组蛋白h4赖氨酸16(h4k16)-辅酶a、mg149、eml264、ltk-14、矢车菊苷配基-b3、表儿茶素没食子酸酯(egcg)、漆树酸、藤黄酸、飞燕草色素、remodelin、丁内酯3(mb-3)、nk13650a、落羽松二酮(np-15)、δ12-前列腺素j2(pgj2)、白花丹醌(rtk1)、nu9056、dc-m01-7、cct077791、nsc694614、pu141、c646、th1834、l002、wm-8014、dc-g16-11及其衍生物。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的培养基，其中所述hat抑制剂是天然存在的分子。
7.根据权利要求5所述的培养基，其中所述hat抑制剂选自姜黄素、白花丹醌和山竹子素。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的培养基，其中所述rt抑制剂选自：齐多夫定、地达诺新、扎西他滨、司他夫定、拉米夫定、阿巴卡韦、恩曲他滨、恩替卡韦、特鲁瓦达、阿兹夫定、替诺福韦、阿德福韦、依法韦仑、奈韦拉平、地拉夫定、依曲韦林、利匹韦林、多拉韦林、伊斯拉韦林及其衍生物。
9.根据权利要求8所述的培养基，其中所述rt抑制剂选自齐多夫定(叠氮胸苷，azt)和拉米夫定(3tc)。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的培养基，同时包括hat抑制剂和rt抑制剂。
11.根据权利要求10所述的培养基，包括姜黄素和azt。
12.根据权利要求5至11中任一项所述的培养基，其中所述姜黄素以约5-20μm的浓度存在。
13.根据权利要求12所述的培养基，其中所述姜黄素以约10μm的浓度存在。
14.根据权利要求8至13中任一项所述的培养基，其中所述azt以约0.5-5μm的浓度存在。
15.根据权利要求14所述的培养基，其中所述azt以约1μm的浓度存在。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的培养基，其中所述细胞培养基包括在6.8和7.8之间的ph值。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的培养基，其用于人类卵母细胞的ivm。
18.根据权利要求17所述的培养基，其中所述人类卵母细胞取自35岁或更大年龄的女性。
19.一种体外成熟人类卵母细胞的方法，所述方法包括从人类受试者接收未成熟卵母细胞，并在包括至少一种hat抑制剂或rt抑制剂的培养基中培养所述接收的未成熟卵母细胞一段时间使得足以实现从所述卵母细胞中的第一极体挤出，从而体外成熟人类卵母细胞。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述人类受试者至少35岁或更大年龄。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述人类受试者至少38岁或更大年龄。
22.根据权利要求19至21中任一项所述的方法，其中所述人类受试者在收获所述未成熟卵母细胞之前不接受激素注射。
23.根据权利要求22所述的方法，其中所述激素注射包括注射fsh、lh、人绝经期促性腺素(hmg)和人绒毛膜促性腺激素(hcg)中的至少一种。
24.根据权利要求19至23中任一项所述的方法，其中所述培养基是补充有至少一种促性腺激素的ivm培养基。
25.根据权利要求24所述的方法，其中所述ivm培养基补充有lh和fsh。
26.根据权利要求19至25中任一项所述的方法，其中所述hat选自e1a相关蛋白p300(p300)、环磷酸腺苷效应元件结合蛋白结合蛋白(crebbp/cbp)、组蛋白乙酰转移酶kat5(kat5/tip60)、kat6a和n-乙酰转移酶10(nat10)。
27.根据权利要求19至26中任一项所述的方法，其中所述hat抑制剂不是p300/cbp相关因子(pcaf/kat2b)抑制剂。
28.根据权利要求19至26中任一项所述的方法，其中所述hat抑制剂选自：姜黄素、山竹子素、亚精胺基辅酶a(spd-coa)、lys-coa、组蛋白h4赖氨酸16(h4k16)-辅酶a、mg149、eml264、ltk-14、矢车菊苷配基-b3、表儿茶素没食子酸酯(egcg)、漆树酸、藤黄酸、飞燕草色素、remodelin、丁内酯3(mb-3)、nk13650a、落羽松二酮(np-15)、δ12-前列腺素j2(pgj2)、白花丹醌(rtk1)、nu9056、dc-m01-7、cct077791、nsc694614、pu141、c646、th1834、l002、wm-8014、dc-g16-11及其衍生物。
29.根据权利要求19至28中任一项所述的方法，其中所述hat抑制剂是天然存在的分子。
30.根据权利要求29所述的方法，其中所述hat抑制剂选自姜黄素、白花丹醌和山竹子素。
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【专利技术属性】
技术研发人员：M·克卢特斯坦，P·瓦瑟祖格帕什，
申请(专利权)人：永恒实验室公司，
类型：发明
国别省市：
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