球孢白僵菌中甾类羟化酶及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术涉及甾体药物领域和生物技术领域，涉及一种来自球孢白僵菌的新型甾类羟化酶CYP68BE1及其编码基因与应用。具体而言，本发明专利技术提供了一种来自球孢白僵菌的新型甾类羟化酶CYP68BE1，编码该酶的核酸分子，含有所述核酸分子的载体，以及含有所述载体或其中整合有所述核酸分子的重组菌。本发明专利技术通过重组酵母菌或微粒体转化甾体实验，发现CYP68BE1酶可催化甾体类化合物的C11α和/或C6β和/或C1β位和/或C1α上发生羟化反应。其中，转化产物中包括多种甾类药物中间体和/或甾类活性化合物，本发明专利技术具有较大的应用潜力及经济价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及甾体药物领域和生物，更具体地讲，本专利技术涉及一种球孢白僵菌中得到的甾类羟化酶及其编码基因。本专利技术还涉及该甾类羟化酶在甾体药物中间体及其甾类活性化合物制备中的应用。

技术介绍

1、甾体类化合物具有重要而广泛的药理活性，如抗感染、抗肿瘤、抗炎、抗艾滋病等，目前有超过400种甾体药物被广泛用于治疗炎症、癌症、风湿、关节炎等疾病。羟基是甾体药物骨架上的一个重要官能团，通过化学方法进行甾体母核的羟化通常步骤复杂且效率低。然而，与化学合成相比，微生物转化具有反应条件温和，绿色环保以及更简便的实验过程等优势。因此，采用微生物转化的方法用于甾体化合物特定位置的羟基化，成了甾体医药工业领域的关键技术，为甾体药物的工业生产和创新甾体药物研发奠定了基础。目前报道的微生物羟化的位置主要集中在c-1，c-6，c-7，c-9，c-11，c-14，c-15，c-16等(chen x，bao yj，wangy等，distinct regioselectivity offungal p450enzymes for steroidalhydroxylation.appli本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种使甾类化合物在C11α和/或C6β和/或C1β和/或C1α位发生羟基化反应的羟化酶CYP68BE1，其特征在于，所述羟化酶CYP68BE1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，或者如SEQID NO:1所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸得到的具有相同功能的序列。

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为编码如权利要求1所述的羟化酶CYP68BE1的核酸分子。

3.根据权利要求2的核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子的序列如SEQ ID NO:2所示，或者SEQ ID NO:2的序列经过密码子优化形成的序列，以及其互补序列。

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【技术特征摘要】

1.一种使甾类化合物在c11α和/或c6β和/或c1β和/或c1α位发生羟基化反应的羟化酶cyp68be1，其特征在于，所述羟化酶cyp68be1的氨基酸序列如seq id no:1所示，或者如seqid no:1所示的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸得到的具有相同功能的序列。

2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为编码如权利要求1所述的羟化酶cyp68be1的核酸分子。

3.根据权利要求2的核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子的序列如seq id no:2所示，或者seq id no:2的序列经过密码子优化形成的序列，以及其互补序列。

4.一种表达载体，其特征在于，所述载体含有如权利要求2–3任一项所述的核酸分子，所述表达载体为原核表达载体或真核表达载体；所述真核表达载体包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：巩婷，朱平，彭雨，王越，杨金玲，陈晶晶，陈天娇，
申请(专利权)人：中国医学科学院药物研究所，
类型：发明
国别省市：