一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法技术

技术编号:44004310 阅读:30 留言:0更新日期:2025-01-10 20:21
本发明专利技术公开了一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,具体涉及生物转基因育种领域,本发明专利技术通过使用发根农杆菌介导的方法,将外源基因质粒转化到发根农杆菌感受态细胞中,PCR鉴定含有目的基因的阳性菌,并通过该农杆菌侵染液将外源质粒整合到茄子基因组中,从而得到具有目的基因的转基因茄子毛状根,本发明专利技术采用基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因遗传转化方法,需要的种子数量少,检测方法简单,实验周期较传统外植体遗传转化方法大幅缩短。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及遗传转化,更具体地说,本专利技术涉及一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法


技术介绍

1、茄子是世界范围内广泛种植的重要蔬菜作物,但是由于茄子栽培种的遗传基础狭窄且种间群体构建困难等原因,很难利用常规育种实现优异性状的快速高效聚合,茄子的遗传转化体系仍不成熟且基因型依赖性强,在一定程度上限制了茄子分子育种和基础理论研究等的进程,目前关于茄子生物育种技术发展相对薄弱,能够快速、准确得到稳定遗传性状的优良品种尤其困难。本专利技术旨在通过发根农杆菌作为介导途径,将外源目的基因快速准确稳定地转化整合到茄子基因组中,该毛状根转化系统可用于茄子基因编辑体系效率的评价,为茄子基因功能研究和生物育种提供新的途径,是茄子稳定遗传转化的重要补充。


技术实现思路

1、为了克服现有技术的上述缺陷,本专利技术的实施例提供一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因遗传转化方法,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。

2、为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:

3、步骤a1:外源质粒转本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,其特征在于:所述步骤A1中,发根农杆菌感受态细胞转化的步骤具体为采用热激法将表达载体质粒转入农杆菌感受态细胞(K599)中,具体步骤如下:

3.根据权利要求1所述的一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,其特征在于:所述步骤A2中,农杆菌菌落PCR目的基因验证方法具体为:

4.根据权利要求1所述的一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,其特征在于:所述步骤...

【技术特征摘要】

1.一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,其特征在于:所述步骤a1中,发根农杆菌感受态细胞转化的步骤具体为采用热激法将表达载体质粒转入农杆菌感受态细胞(k599)中,具体步骤如下:

3.根据权利要求1所述的一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,其特征在于:所述步骤a2中,农杆菌菌落pcr目的基因验证方法具体为:

4.根据权利要求1所述的一种基于发根农杆菌介导的茄子毛状根转基因的遗传转化方法,其特征在于:所述步骤a3茄子催芽与播种方法具体为:将供试茄子种子放入两层滤纸中间,置于培养皿中,用400ppm赤霉素...

【专利技术属性】
技术研发人员:李强魏健常玉诺陈雪平罗双霞李丽宋利军张志硕张巍巍
申请(专利权)人:河北农业大学
类型:发明
国别省市:

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