来源于马肠道的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶制造技术

本发明专利技术公开了一种来源于马肠道的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶，其特征在于：其氨基酸序列为SEQ ID NO.1。通过原核表达系统表达目的蛋白，利用亲和层析的方法进行蛋白质纯化，利用Bradford法测得目的蛋白浓度为0.478 mg/mL，通过水杨酸法（DNS）测定目的蛋白的酶活，发现目的蛋白的降解底物是透明质酸钠，并产生N‑乙酰葡糖胺，酶活力为62.8 U，比活力为2.09 U/mg。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于微生物分子生物学领域，涉及一种从马肠道中分离得到的能降解透明质酸钠的糖苷水解酶。

技术介绍

1、碳水化合物在自然界中以多种形式存在，从蛋白质的连接聚糖到植物、真菌和细菌的细胞壁，以及淀粉和糖原等储存聚合物。动物体内的碳水化合物降解与其肠道微生物有着密切的关系，它们所缺乏的能降解碳水化合物的酶，大部分都存在于肠道微生物中[wardman, j.f., bains, r.k., rahfeld, p. et al. carbohydrate-active enzymes(cazymes) in the gut microbiome. nat rev microbiol 20, 542–556 (2022)]。尽管大多数已知的工业酶都是通过纯培养分离和筛选从微生物中获得的，但最近的估计表明，环境中99%以上的微生物无法通过常规微生物学方法培养。因此，近年来宏基因组学的出现提供了一种强有力的工具，可以获取任何环境中微生物的遗传和代谢多样性，绕过当前依赖培养方法的局限性[pabbathi npp, velidandi a, tavarna t, et 本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种来源于马肠道的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶，其特征在于：其氨基酸序列为 SEQ ID NO.1。

2.一种来源于马肠道的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶重组表达载体，其特征在于，将权利要求1所述的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶的核苷酸序列插入到大肠杆菌表达载体中得到的表达能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶的重组表达载体。

3.如权利要求2所述的来源于马肠道的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶重组表达载体，其特征在于，大肠杆菌表达载体为119-PET-32a。

4.一种重组菌株，其特征在于：将权利要求2或3所得到的重组表达载体导入大肠杆菌中，筛选得到。<...

【技术特征摘要】

1.一种来源于马肠道的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶，其特征在于：其氨基酸序列为 seq id no.1。

2.一种来源于马肠道的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶重组表达载体，其特征在于，将权利要求1所述的能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶的核苷酸序列插入到大肠杆菌表达载体中得到的表达能够降解透明质酸钠的糖苷水解酶的重组表达载体。

3.如权利要求2所述的来源于马肠道的能够降...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓悦，李村院，韩林，胡圣伟，倪伟，余金明，贺会宁，
申请(专利权)人：石河子大学，
类型：发明
国别省市：