驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，包括：取驼乳，采用等电点沉淀方法分离得到驼乳乳清蛋白溶液；采用预先配置的上样缓冲液冲洗肝素亲和色谱柱直至紫外吸收基线及电导基线稳定；将驼乳乳清蛋白溶液上样至肝素亲和色谱柱，再用上样缓冲液冲洗肝素亲和色谱柱，以洗脱非目的蛋白；采用预先配置的洗脱缓冲液冲洗肝素亲和色谱柱，收集乳铁蛋白的洗脱峰，并透析于蒸馏水中进行除盐。本发明专利技术能够一步式从驼乳清中分离出纯度较高的乳铁蛋白，可作为标准品用于驼乳及相关产品中乳铁蛋白含量的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及驼乳深加工。更具体地说，本专利技术涉及一种驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法。

技术介绍

1、乳铁蛋白是一种分子量约为80kd的非血红素铁离子结合糖蛋白，最早是在上世纪30年代从牛乳中分离出来的，可平均分为由一个短的螺旋片段连接的两个同源的半部分

2、——n-叶和c-叶，每叶大小约为40kda并各自可以牢固的结合一个铁离子。属于转铁蛋白家族的一种，主要由哺乳动物乳腺上皮细胞分泌表达并存在于天然乳汁中，尤其在哺乳动物初乳期含量明显上升，是新生幼崽的主要防御介质。除了可以增强免疫力外，乳铁蛋白还被证明具有抗菌活性、成骨活性、抗癌活性、调节机体免疫、参与铁代谢、促进细胞生长、调节肠道菌群平衡等多种生物学功能。它可以作为一种天然的防腐成分延长化妆品的货架期，同时还具有抗炎美白的效果。因此，作为一种功能因子，乳铁蛋白在食品、生物、医药等行业具有巨大的应用前景。牛源乳铁蛋白也已经被美国食品和药物管理局和欧洲食品安全管理局批准为公认安全的膳食补充剂，目前主要作为一种食品添加剂应用于婴幼儿奶粉配方中。据文献显示驼乳中乳铁蛋白含量约为0.22mg/本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述的驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，所述上样缓冲液采用pH为7.5～8.0、浓度为0.15～0.2M的磷酸盐缓冲液；

3.如权利要求2所述的驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，步骤二中，用3～5倍柱体积的上样缓冲液以1.0～2.0mL/min的速度冲洗肝素亲和色谱柱至紫外吸收基线及电导基线稳定。

4.如权利要求3所述的驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，步骤三中，将驼乳乳清蛋白溶液用0.22um的水系滤膜过滤后，以1.0～2.0mL...

【技术特征摘要】

1.一种驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述的驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，所述上样缓冲液采用ph为7.5～8.0、浓度为0.15～0.2m的磷酸盐缓冲液；

3.如权利要求2所述的驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，步骤二中，用3～5倍柱体积的上样缓冲液以1.0～2.0ml/min的速度冲洗肝素亲和色谱柱至紫外吸收基线及电导基线稳定。

4.如权利要求3所述的驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，步骤三中，将驼乳乳清蛋白溶液用0.22um的水系滤膜过滤后，以1.0～2.0ml/min的速度上样至经步骤二处理的肝素亲和色谱柱，再用3～5倍柱体积的上样缓冲液冲洗肝素亲和色谱柱，至紫外吸收基线及电导基线稳定。

5.如权利要求4所述的驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，步骤四中，采用3～5倍柱体积的洗脱缓冲液以1.0～2.0ml/min的速度冲洗经步骤三处理的肝素亲和色谱柱。

6.如权利要求1所述的驼乳中高纯度乳铁蛋白的分离纯化方法，其特征在于，步骤一中，取驼乳，在4℃下经5000r/min离心20min，去除上层乳脂肪沉淀，取下层乳蛋白溶液，测定乳蛋白溶液的ph值并记录，采用...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘颖，岳海涛，杨洁，申彤，屈阳，张洪毅，程亚琪，冉春燕，
申请(专利权)人：新疆大学，
类型：发明
国别省市：