一种宽体金线蛭失稳酶融合蛋白及其应用制造技术

技术编号:43965863 阅读:43 留言:0更新日期:2025-01-07 21:51
本发明专利技术公开了一种活性提高的失稳酶融合蛋白,所述失稳酶融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3或SEQ ID No.5所示,本发明专利技术通过对宽体金线蛭来源的失稳酶Wpdestabilase表达策略的优化和序列改造,提高了失稳酶融合蛋白的抑菌活性、溶栓活性和异肽酶活性,提高了Wpdestabilase的应用前景和应用空间。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体涉及一种宽体金线蛭来源的失稳酶融合蛋白及其应用。


技术介绍

1、宽体金线蛭(whitmania pigra whitman)隶属于无吻蛭目,黄蛭科,金线蛭属,是中药材水蛭的基原动物之一,具有较大的药用价值,在我国分布广泛,常年栖息于水田及与其相同的沟渠中,以吸食新鲜螺类体液为生。

2、申请人从宽体金线蛭(w.pigra)唾液腺转录组数据库(srx16840326、srx16840327、srx16840328)中筛选到一种具有抑菌和溶血功效水蛭多肽的转录本,通过cdna序列克隆验证了序列的正确性。除去多肽信号肽后,基于pas方法,设计全长拼接引物,合成目的基因,在pet-32a载体的ncoⅰ和xhoⅰ酶切位点插入目的基因,构建了pet32a-trx-ek-wpdestabilase原核表达体系。经iptg诱导、破碎、纯化,sds-page检测得到n端带有trx等标签的融合目的蛋白,融合目的蛋白的抗菌活性为14.17μg/ml,溶血率为44.06%;详见中国专利技术专利,申请号:cn202111590989.2;授权公告号本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种活性提高的失稳酶融合蛋白,所述失稳酶融合蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNo.5所示。

2.包含权利要求1所述失稳酶融合蛋白或其编码基因的生物材料。

3.根据权利要求2所述的生物材料,其特征在于,所述生物材料选自:包含权利要求1所述失稳酶融合蛋白或其编码基因的载体,或者,包含权利要求1所述失稳酶融合蛋白或其编码基因的宿主细胞。

4.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,所述载体包括克隆载体和表达载体。

5.根据权利要求4所述的生物材料,其特征在于,所述载体为pCZN1。

6.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,所...

【技术特征摘要】

1.一种活性提高的失稳酶融合蛋白,所述失稳酶融合蛋白的氨基酸序列如seq idno.5所示。

2.包含权利要求1所述失稳酶融合蛋白或其编码基因的生物材料。

3.根据权利要求2所述的生物材料,其特征在于,所述生物材料选自:包含权利要求1所述失稳酶融合蛋白或其编码基因的载体,或者,包含权利要求1所述失稳酶融合蛋白或其编码基因的宿主细胞。

4.根据权利要求3所述的生物材料,其特征在于,所述载体包括克隆载体和表达载体。

5.根据权利要求4所述的生物材料,其特征在于,所述载体为pczn1。

6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:程搏幸刘飞郜天一张奎卢昱希
申请(专利权)人:贵州师范学院
类型:发明
国别省市:

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