一种基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法及应用技术

本发明专利技术提出了一种基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法及应用。所述构建方法包括以下步骤：使用SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物序列从Addgene 24353载体上扩增质粒骨架；使用SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的引物序列扩增XM_054231212基因序列的5’UTR及CDS序列；使用SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的引物序列扩增LOC105216239基因序列的5’UTR上游2000bp序列；通过无缝克隆组装扩增得到的各片段，获得WPRP载体，筛选，获得WPRP质粒；将WPRP质粒与转座辅助酶质粒pHelper混合，得质粒溶液；将质粒溶液注射入瓜实蝇白蛹品系的卵中，卵发育为成虫后，繁殖的后代化蛹时出现棕色蛹。采用本发明专利技术方法，可将瓜实蝇蛹色恢复作为筛选标记，仅需肉眼观察就能分辨出阳性转化子，极大提高了筛选效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及瓜实蝇转基因工程，特别涉及一种基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法及应用。

技术介绍

1、在遗传学和生物
，对于基因转化和遗传筛选标记的研究一直是重要的课题。瓜实蝇(bactrocera cucurbitae)是双翅目实蝇科的昆虫，广泛分布于热带和亚热带地区。它主要以幼虫在瓜果内部取食为害，导致瓜果腐烂、变质，给果蔬种植业造成了严重的经济损失。瓜实蝇具有较强的繁殖能力和适应性，其生命周期短，世代重叠严重，这使得其防控工作面临巨大挑战。

2、构建瓜实蝇遗传筛选标记具有极其重要的意义。首先，精准有效的筛选标记能够帮助科研人员准确地识别和分离具有特定遗传特征的瓜实蝇个体，从而深入探究其遗传变异规律和进化机制。这对于揭示瓜实蝇的种群结构、扩散模式以及对环境的适应能力等方面具有关键作用。其次，通过筛选标记可以快速定位与抗药性、繁殖力等重要生物学特性相关的基因，为研发更高效、环保的害虫防治策略提供重要的理论依据和技术支持。再者，在基因功能研究中，筛选标记能够助力鉴定和分析关键基因的作用，推动对瓜实蝇生长发育、行为习性等方面的深入理本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法，其特征在于，WPRP质粒与转座辅助酶质粒pHelper的质量比为1～3:1。

3.根据权利要求1所述的基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法，其特征在于，

4.权利要求1所述的基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法在判断转基因是否成功中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述基因包括GAL4基因。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：...

【技术特征摘要】

1.一种基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法，其特征在于，wprp质粒与转座辅助酶质粒phelper的质量比为1～3:1。

3.根据权利要求1所述的基于蛹色变化的瓜实蝇遗传筛选标记的构建方法，其特征在于，

4.权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：林先武，范紫真，颜日辉，吴岩，查学宗，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：