一种肝细胞损伤模型及其构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及细胞模型技术领域，具体涉及一种肝细胞损伤模型及其构建方法和应用。本发明专利技术提供一种过表达磷酸乙醇胺磷酸酶基因ETNPPL损伤肝细胞功能的模型，ETNPPL在肝细胞中过表达后，还原型谷胱甘肽降低，活性氧、谷草转氨酶和谷丙转氨酶升高；线粒体空泡化和结构受损，线粒体数量减少，细胞增殖能力下降；信号通路PI3K/AKT的Akt磷酸化位点p‑Akt‑Thr308和p‑Akt‑Ser473蛋白表达量降低，可作为肝细胞代谢功能受损模型，用于肝细胞损伤分子机制解析和作为靶向治疗措施评价的材料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞模型，尤其涉及一种肝细胞损伤模型及其构建方法和应用。

技术介绍

1、肝脏作为体内最大的实质性器官，具有解毒、消化、免疫和代谢等多种功能，功能障碍直接导致多种疾病发生。糖脂代谢紊乱引起的代谢紊乱相关脂肪性肝病日益严重。代谢紊乱相关脂肪性肝病显著增加了2型糖尿病和心血管疾病发生及致死概率，然而至今尚无批准用于其治疗的药物。代谢紊乱相关脂肪性肝病从单纯的肝脂肪变性发展成更具危害的代谢紊乱相关脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化是遗传易感、胰岛素抵抗、氧化应激和肠道菌群紊乱等“多重打击”的结果，其中，脂代谢紊乱引起的肝细胞损伤是病理进程级联反应的关键环节。

2、磷酸乙醇胺磷酸酶etnppl基因又名丙氨酸-乙醛酸转氨酶2类似物1agxt2l1，该基因编码的磷酸乙醇胺磷酸酶能将磷酸乙醇胺petn不可逆地分解为无机磷酸盐、氨和乙醛，并且etnppl对petn的水解具有高度的特异性。petn是cdp-乙醇胺（肯尼迪）途径中磷脂酰乙醇胺合成的前体。此外，petn还被视为线粒体呼吸的潜在抑制剂。乙醛主要在肝脏中进行代谢且具有细胞毒性，可导致肝脂肪变性、炎本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种肝细胞损伤模型的构建方法，其特征在于，所述方法包括：对肝细胞进行基因编辑，以使得所述肝细胞中ETNPPL蛋白的含量和/或活性提高。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述ETNPPL蛋白的含量提高通过以下1）和/或2）实现：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述ETNPPL蛋白的含量提高通过在所述肝细胞的基因组中插入ETNPPL基因的表达盒实现。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述ETNPPL基因的表达盒包含KOZAK序列和ETNPPL基因。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述肝细胞为人...

【技术特征摘要】

1.一种肝细胞损伤模型的构建方法，其特征在于，所述方法包括：对肝细胞进行基因编辑，以使得所述肝细胞中etnppl蛋白的含量和/或活性提高。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述etnppl蛋白的含量提高通过以下1）和/或2）实现：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述etnppl蛋白的含量提高通过在所述肝细胞的基因组中插入etnppl基因的表达盒实现。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述etnppl基因的表达盒包含kozak序列和et...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨述林，杜娟，王彦芳，吴添文，陶聪，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：